Edestin, kenevir tohumunun baskın depo proteinidir ve enzimatik hidroliz veya gastrointestinal sindirim sonrasında sindirilebilir bir protein ve biyoaktif peptit kaynağı olarak sıklıkla tartışılmaktadır [1–5]. Bu inceleme, vasküler biyoloji ile ilgili mekanistik alanlardaki verileri, fleboloji (venöz hastalıklar) alanındaki potansiyel (doğrudan veya dolaylı) uygulamalara odaklanarak sentezlemektedir. Dahil edilen literatür en tutarlı şekilde, renin-anjiyotensin sistemi modülasyonu (ACE/renin inhibisyonu) yoluyla antihipertansif aktiviteyi, kimyasal ve hücre bazlı testlerdeki antioksidan etkileri, anti-inflamatuar yolak modülasyonunu ve hepatosit modellerindeki bazı mekanistik hipolipidemik etkilerle birlikte endotelyal/NO ilişkili vasküler etkileri desteklemektedir [2, 4, 6–14]. Bununla birlikte, sunulan özetlerde edestin veya kenevir tohumu proteini için venöz klinik sonuçlar gösterilmemiştir; sağlanan açıkça venöz klinik çalışma kanıtları bunun yerine, bacak ağrısı ve ödem gibi kronik venöz yetmezlik (CVI) semptomları için at kestanesi tohumu ekstresi (HCSE) ile ilgilidir [15]. Genel olarak kanıt tabanı, venöz ilişki (endotelyal fonksiyon, oksidatif stres, inflamasyon ve hemostatik yolaklar) için mekanistik makuliyeti desteklemekte ancak sunulan derlemde edestini kanıta dayalı bir fleboloji müdahalesi olarak tanımlamamaktadır [1, 2, 5, 10, 15].
Edestin genel bakış
Edestin, ağırlıklı olarak 11S globülin (legümin benzeri) fraksiyonunda bulunan bir kenevir tohumu depo proteini olarak tanımlanmakta ve atıfta bulunulan inceleme literatüründe toplam kenevir tohumu proteininin yaklaşık %60–80'ini oluşturduğu bildirilmektedir [1, 3]. Kenevir tohumu proteininin edestin ve albümin açısından zengin olduğu bildirilmekte; nispeten yüksek arjinin ve glutamik asit içeriği sağlarken "kolayca sindirilebilir" olarak tanımlanmaktadır [2]. Sunulan materyalde özetlenen in vivo sindirilebilirlik tahminleri, tam tohumlar için %85, kenevir küspesi için %87 ve kabuğu çıkarılmış kenevir tohumları için %95 protein sindirilebilirliği bildirmektedir [3] ve ek bir inceleme beyanı %88'i aşan in vitro protein sindirilebilirliği bildirmektedir [4].
İşlemenin protein kalitesini ve fonksiyonel özelliklerini etkilediği defalarca gösterilmiştir. Kabuk çıkarma (hulling), antinütrientlerin azaltılması veya ortadan kaldırılması olarak tanımlanmakta ve gelişmiş sindirilebilirlik ile ilişkilendirilmektedir [1]. Kenevir proteinlerinin ekstraksiyon ve çözünürlük davranışı büyük ölçüde pH'a bağlıdır; pH 12'ye kadar artan ekstrakte edilebilirlik ve pH 11–12'de en yüksek çözünürlük bildirilirken, en düşük çözünürlük pH 4.6'daki izoelektrik nokta civarında (izolat hazırlama sırasında protein çökeltilmesi için de kullanılır) meydana gelmektedir [16]. Ürün formları arasında sindirilebilirlik değerleri önemli ölçüde değişebilir (örneğin, kenevir içinden elde edilen protein izolatı için %98.5 bildirilirken, kenevir kabuğundan elde edilen izolat için %87.8) [17].
Enzimatik hidroliz, edestin ve kenevir proteinleri için "biyoaktif peptit" rasyonelinin merkezinde yer almaktadır. Hidroliz koşulları peptit verimini ve hidroliz derecesini değiştirir (örneğin, peptik hidrolizat için %16'ya karşı pankreatik hidrolizat verimi %43 ve peptik için %19.7'ye karşı %47.5 pankreatik hidroliz derecesi değerleri) [18]. Sağlanan hidrolizat çalışmalarındaki boyut dışlama kromatografisi profilleri, birçok peptiti yaklaşık 300–9,560 Da aralığına yerleştirmektedir [19, 20]. Alt akış fizyolojik makuliyet için önemli olarak, bağırsak transport deneylerinde 3 kDa'nın altında filtrelenmiş peptit fraksiyonları kullanılmış ve yazarlar kenevir hidrolizatlarındaki peptitlerin gastrointestinal bariyeri geçebildiğini ve hala antioksidan kapasite sergileyebildiğini bildirmektedir [5].
Yöntemler
Bu inceleme, bileşimsel/sindirilebilirlik karakterizasyonu, in vitro peptit biyoaktivite testleri, oksidatif stres ve inflamasyon hücre modelleri, hayvan vasküler fonksiyon modelleri, hayvan hipertansiyon modelleri ve sınırlı insan kan basıncı/biyobelirteç sonuçlarını kapsayan sunulan kanıt özetlerinin yapılandırılmış bir anlatı sentezidir [1, 3, 7–11, 19, 21]. Mekanistik alanlar, venöz patoloji ile muhtemelen ilgili olan son noktalara (oksidatif stres, inflamasyon, endotelyal fonksiyon/NO sinyali ve trombosit/hemostatik süreçler) vurgu yapılarak ayrı kanıt kümeleri olarak ele alınırken, sağlanan materyalde mevcut olduğunda (örneğin, CVI'da HCSE) açıkça venöz klinik sonuçlar tanımlanmıştır [10, 11, 15].
Sağlık alanına göre kanıtlar
Bileşim ve sindirilebilirlik
İncelemeler ve deneysel çalışmalar genelinde edestin, genellikle toplam tohum proteininin ~%60–80'ini oluşturan ana kenevir tohumu depo proteini olarak tutarlı bir şekilde tanımlanmaktadır [1, 3]. Sindirilebilirlik birden fazla preparat genelinde yüksek olarak bildirilmiştir; in vivo sindirilebilirlik %85 (tam tohumlar), %87 (kenevir küspesi) ve %95 (kabuğu çıkarılmış kenevir tohumları) olarak özetlenmiş, in vitro sindirilebilirlik ise bir incelemede %88'i aşıyor olarak tanımlanmıştır [3, 4]. İşleme süreci materyal düzeyinde katkı sağlar: kabuk çıkarma antinütrientleri azaltmak ve protein kullanımını ve sindirilebilirliğini artırmak olarak tanımlanır [1] ve protein çözünürlüğü/ekstrakte edilebilirliği, izolat hazırlama ile ilgili güçlü pH bağımlılığı gösterir (alkali pH'da daha yüksek ekstrakte edilebilirlik ve çözünürlük, çöktürme için kullanılan pH 4.6 izoelektrik noktası yakınında en düşük çözünürlük) [16]. Hidroliz ile ilgili karakterizasyon ayrıca farklı enzim sistemlerinin farklı peptit verimleri ve hidroliz dereceleri oluşturduğunu göstermektedir ve SEC analizlerinde ~300–9,560 Da aralığında peptit karışımları bildirilmiştir [18–20]. Transport modeli çalışması, kenevir hidrolizatlarındaki peptitlerin (<3 kDa fraksiyonları dahil) gastrointestinal bariyeri geçebildiğini ve antioksidan kapasitesini koruyabildiğini bildirerek biyolojik makuliyet eklemektedir [5].
Fleboloji bağlantısı: Fleboloji ile doğrudan ilişki dolaylıdır ancak sindirilebilirlik ve peptitlerin bir bağırsak bariyeri modelini geçme yeteneği, venöz endotel biyolojisini (prensipte) etkileyebilecek sistemik vasküler etkiler için bir ön koşuldur [5]. Ayrıca, sunulan incelemeler, venöz hastalık mekanizmalarıyla ilgili olabilecek vasküler tonus ve endotelyal fonksiyon ile teorik bir bağlantıyı destekleyen, "kan damarlarını gevşeten ve genişleten" nitrik oksit öncüsü olarak arjinini vurgulamaktadır [22].
Antihipertansif aktivite ve ACE renin inhibisyonu
Birden fazla inceleme, hidrolize kenevir tohumu proteinlerinin ACE ve renin inhibisyonuna atfedilen antihipertansif etkilerini tanımlamakta [2, 6] ve ek inceleme düzeyindeki beyanlar, kenevir peptitlerinin kan basıncı düzenlemesini desteklemek için ACE'yi inhibe ettiğini ve sindirimin antihipertansif biyoaktif peptitler oluşturabileceğini belirtmektedir [1, 4]. In vitro peptit ve fraksiyon çalışmaları, edestin kaynaklı ACE inhibitörü peptitler için potens tahminleri sağlar: GVLY, LGV ve RVR peptitleri sırasıyla , ve ACE değerleri ile bildirilmiştir ve bu peptitler açıkça edestin hidrolizinden türetilenler olarak tanımlanmıştır; buna karşılık IEE neredeyse inaktif (%20.5 inhibisyon) olarak tanımlanmıştır [23]. Ek in vitro çalışmalar, sabit 1 mg/mL dozunda peptit karışımları tarafından ACE inhibisyonu bildirmiş (S için %57.5, M için %15.7 ve T için %32.4) [24] ve kenevir proteini yan ürünlerinin fraksiyonlanması/hidrolizinin ACE inhibitörü aktiviteyi artırdığı bildirilmiştir (örneğin, atıfta bulunulan çalışmada 80 mg/L'lik bir Alcalase hidrolizatı ve 72 mg/L civarında ultrafiltre edilmiş fraksiyonlar) [25]. Pankreatik bir hidrolizatın fraksiyonlanmasının, 1.0 mg/mL'de %84.9 ACE inhibisyonu ve değerine sahip bir fraksiyon sağladığı bildirilirken, fraksiyonlanmamış hidrolizat 1.1 mg/mL'de %44.8 ACE inhibisyonu sağlamıştır [26].
In vivo kanıtlar, incelemelerde özetlenen spontan hipertansif sıçanlarda kenevir tohumu protein hidrolizatı uygulamasından sonra kan basıncının düşmesi ve plazma ACE aktivitesinin azalması bulgularını [7] ve atıfta bulunulan klinik öncesi özetlerde kenevir tohumu proteini ile besleme ile plazma renin konsantrasyonu ve ACE aktivitesinde bildirilen azalmaları içermektedir [27]. Sunulan özetlerdeki insan kanıtları, kenevir tohumu proteinlerini ve peptitlerini değerlendiren hafif hipertansiyonu olan 35 yetişkinde tanımlanan çift-kör randomize çapraz geçişli bir çalışmayı içerir [28]; bildirilen sonuçlar hem kenevir tohumu proteinlerinin hem de peptitlerinin alımının 24 saatlik sistolik ve diyastolik kan basıncını düşürdüğünü ve plazma ACE aktivitesini azalttığını göstermektedir; atıfta bulunulan raporda NO ilişkili biyobelirteçler dahil ek değişiklikler mevcuttur [8, 28].
Fleboloji bağlantısı: Fleboloji bağlantısı, venöz uç noktalara dayalı olmaktan ziyade mekanistik olarak yakındır çünkü sunulan kanıtlar CVI semptomları veya venöz hemodinamik gibi sonuçlardan ziyade ACE/renin modülasyonu ve ilgili NO değişikliklerini vurgulamaktadır [2, 4, 7, 8]. Aynı insan hipertansiyon raporu, her iki tedavinin de kazeine kıyasla ACE ve renin aktivitelerini düşürdüğünü ve plazma NO seviyesini yükselttiğini belirtmektedir; bu durum venöz patofizyolojiyi muhtemelen etkileyebilecek endotelyal fonksiyon ve vasküler tonus ile ilgilidir [8].
Antioksidan etkiler
Sunulan kanıtlardaki antioksidan aktivite, öncelikle in vitro kimyasal testler ve hücre bazlı oksidatif stres modelleri ile desteklenmektedir. Bir çalışma, hidrolizatların proteinlerden daha yüksek antioksidan aktiviteye sahip olduğunu gösteren istatistiksel olarak anlamlı bir fark bildirmekte [29] ve başka bir rapor DPPH, TEAC, FRAP ve ORAC testleri ile değerlendirilen kenevir hidrolizatlarının "güçlü, doğrudan antioksidan aktivitesini" tanımlamaktadır [9]. Hidroliz parametreleri önemli görünmektedir; en yüksek hidroliz derecesine (%9) sahip numuneler için en güçlü antioksidan aktivite bildirilmiş ve karşılaştırmalara dayanarak pankreatin kaynaklı hidrolizatların alcalase kaynaklı hidrolizatlardan daha güçlü antioksidanlar olduğu bildirilmiştir [30]. HepG2 oksidatif stres modellerinde, H2 ve H3 peptitlerinin ROS, lipid peroksidasyonu ve NO üretimini azalttığı ve stimülasyon altında Nrf-2 ve iNOS yolaklarını modüle ettiği bildirilmiştir [10]. Spesifik H3 peptidi (IGFLIIWV), azalmış -kaynaklı ROS, NO ve lipid peroksidasyonu ile Nrf-2/iNOS modülasyonu yoluyla antioksidan aktivite sağlayan bileşen olarak tanımlanmıştır [31]. In vivo antioksidan savunma değişiklikleri, spontan hipertansif sıçanlarda da bildirilmiştir; burada kenevirle ilgili bir preparatın (HMH) diyete dahil edilmesi plazma SOD ve CAT düzeylerini artırmış ve TPx düzeylerini düşürmüştür [32]. Hidrolizat literatüründe yapı-aktivite özellikleri tartışılmaktadır; küçük peptitlerdeki (AY, VY, TY ve LLY) C-terminal Tyr'nin antioksidan aktivite için çok önemli olduğu belirtilmektedir [25].
Fleboloji bağlantısı: Fleboloji ilişkisi dolaylıdır ancak biyolojik olarak makuldür, çünkü venöz bozukluklar endotelyal disfonksiyon ve oksidatif stresi içerir ve kenevir kaynaklı birkaç peptit, hücresel stres modellerinde Nrf-2/iNOS yolaklarını modüle ederken ROS ve lipid peroksidasyonunu azaltır [10, 31]. Ek mekanistik bağlam, HO-1 indüksiyonunun endotelyal disfonksiyon ve oksidatif strese karşı koruma sağladığının gösterildiğini belirten bir inceleme beyanı ile sağlanmaktadır; bu durum bu özetlerde venöz uç noktalar ölçülmese bile antioksidan yolakları vasküler açıdan ilgili kılmaktadır [22].
Anti-inflamatuar ve immünomodülatör etkiler
Sağlanan özetlerdeki anti-inflamatuar kanıtlar büyük ölçüde hücre modeli çalışmalarından ve kenevir proteini biyoaktivitelerinin inceleme düzeyindeki tanımlarından türetilmiştir. Bir inceleme beyanı, kenevir proteininin hidroliz sırasında salınan ve antioksidan ve antihipertansif aktivitelerin yanı sıra anti-inflamatuar aktivite sergileyen biyoaktif peptitler içerdiğini [4] ve başka bir inceleme, kenevir peptitlerinin anahtar hücresel yolakların modülasyonu yoluyla anti-inflamatuar özelliklerini not etmektedir [4]. LPS ile stimüle edilmiş bir BV-2 hücre modelinde, LPS maruziyeti tedavi edilmemiş kontrollere kıyasla inflamazom ile ilgili mRNA ekspresyonunu (Asc) artırmış ve bu sistemde inflamatuar aktivasyonu göstermiştir [11]. Aynı çalışma, hücre modelinde anti-inflamatuar bir M2 fenotipine doğru kutuplaşma bildirmekte ve hidrolizatlar dahil tedavilerle ekspresyonunda azalmalar ile şekil referanslı sonuçlarda spesifik tedavi karşılaştırmalarını takiben bir M2 belirtecinde (Arg1) artışlar tanımlamaktadır [11]. Hakemli olmayan bir web kaynağı, edestinin potansiyel anti-inflamatuar ve immünomodülatör yetenekleri için araştırıldığını belirtmektedir; bu durum daha geniş anti-inflamatuar çerçeveleme ile tutarlıdır ancak klinik etkinlik kanıtı değildir [33].
Fleboloji bağlantısı: Bu kanıt flebolojiye mekanistik olarak yakındır çünkü venöz hastalık inflamatuar aktivasyon ve endotelyal disfonksiyonu içerir ve sunulan hücre modeli bulguları, LPS ile stimüle edilmiş sistemlerde anti-inflamatuar kutuplaşmaya ve inflamatuar gen ekspresyonunun modülasyonuna işaret etmektedir [11]. Bununla birlikte, sunulan özetler bu alanda edestin/kenevir tohumu proteini için venöz klinik uç noktalar sunmamaktadır, bu nedenle fleboloji bağlantısı kanıtlanmış etkinlikten ziyade hipotez oluşturma aşamasında kalmaktadır [33].
Endotelyal ve vasküler fonksiyon
Obez Zucker sıçanlarındaki hayvan vasküler fizyolojisi kanıtları, kenevir tohumlarının endotelyal bağımlı gevşemeyi iyileştirdiğini göstermektedir: zayıflamış asetilkolin kaynaklı gevşetici yanıt kenevir tohumları tarafından iyileştirilmiş ancak kenevir tohumu yağı tarafından iyileştirilmemiştir ve asetilkolin kaynaklı gevşeme, atıfta bulunulan analizde kenevir tohumları (HS) ile 1.21 kat güçlenmiş ancak kenevir yağı (HO) ile güçlenmemiştir [14, 21]. Aynı deneysel çerçeve ayrıca, hem HO hem de HS gruplarında artan noradrenalin kaynaklı kasılma ve potasyum kanalı modülatörlerine gevşetici yanıtlardaki kaymalar (pinasidil yanıtı sağa kaymış; NS1619 yanıtı hem HO hem de HS ile belirgin şekilde artmış) dahil olmak üzere vasküler yanıttaki değişiklikleri bildirmektedir [14, 21]. Sunulan incelemelerdeki mekanistik bağlam, arjininin NO'nun bir öncüsü olduğunu ve NO'nun kan damarlarını gevşetip genişlettiğini vurgulayarak kenevirin besinsel bileşimi ile endotelyal fonksiyon arasında yolak düzeyinde bir bağlantıyı desteklemektedir [7]. Bir insan hipertansiyon çalışmasında, HSP+ tüketimi kazeine kıyasla plazma NO'sunu artırmış ve HSP (kazeine karşı) plazma ACE aktivitesini ve renin konsantrasyonunu düşürürken plazma NO konsantrasyonunu yükselterek endotelyal biyobelirteç değişikliklerini RAAS modülasyonu ile hizalamıştır [8].
Fleboloji bağlantısı: Venöz bozukluklar, daha geniş endotelyal disfonksiyon ve değişmiş vazoaktif sinyalleşme ile patofizyolojik özellikleri paylaşır ve sunulan kanıtlar, venöz spesifik sonuçlar bu özetlerde ölçülmemiş olsa bile mekanistik olarak ilgili olan NO ile ilişkili biyobelirteç artışlarını ve hayvan modellerinde iyileşmiş endotelyal bağımlı gevşemeyi göstermektedir [8, 14, 21]. Ek endotelyal aktivasyon bağlamı, β-sitosterolün deneysel modellerde endotelyal adezyon moleküllerini (VCAM-1 ve ICAM-1) azaltabildiğini belirten bir incelemeden gelmektedir; bu durum arteriyel ve venöz hastalıklar arasında potansiyel olarak paylaşılan endotelyal inflamasyon mekanizmalarıyla ilgilidir [6].
Hipolipidemik ve lipid düzenleyici mekanizmalar
Sunulan set içerisindeki en güçlü hipolipidemik kanıtlar mekanistik ve hücre bazlıdır. Birden fazla in vitro çalışma, bir çalışmada 1.0 mg/mL'de %80.0'e varan inhibisyon değerleri dahil olmak üzere, kenevir kaynaklı peptit preparatları tarafından HMG-CoA redüktaz (HMGCoAR) aktivitesinin doza bağlı inhibisyonunu bildirmektedir [12, 34]. Tamamlayıcı mekanistik bulgular, hepatosit modellerinde kenevir peptit tedavisinden sonra SREBP2'nin (olgun form) yukarı regülasyonunu, artan AMPK fosforilasyonunu, artan LDL alımını ve artan LDLR protein seviyelerini bildirmektedir [13, 35]. Spesifik bir peptit olan H3'ün, ile HMGCoAR'yi inhibe ettiği ve olgun SREBP-2 ve membrana lokalize LDLR proteinlerini artırdığı, buna karşılık gelen şekilde HepG2 hücreleri tarafından fonksiyonel LDL emiliminde bir artış sağladığı bildirilmiştir [36]. In vivo lipid sonuçlarına ilişkin kanıtlar, hayvan ve insan çalışmaları arasında karışıktır; bir sıçan karşılaştırmasında toplam kolesterol ve HDL'de (TG değişikliği olmadan) azalmalar ve bir diğerinde kenevir yağı ile HDL ve TG'de azalmalar bildirilmiş, ayrıca bir insan denemesinde kenevir tohumu müdahalesinden sonra plazma TC, HDL-C, LDL-C veya TG'de anlamlı bir değişiklik olmadığı ancak başka bir yağ takviyesi bağlamında TC:HDL oranının düştüğü bildirilmiştir [14, 37].
Fleboloji bağlantısı: Lipid düzenlemesi endotelyal aktivasyon ve inflamasyonla ilgili olabilir ve sunulan kanıtlar, fitosterol benzeri bileşiklerin emilim için kolesterolle rekabet edebileceğini ve β-sitosterolün deneysel modellerde endotelyal adezyon molekülü ekspresyonunu azalttığını belirten bir inceleme beyanı içererek venöz uç noktalardan ziyade endotelyal inflamasyon yolakları üzerinden mekanistik bir köprü sunmaktadır [6, 7]. Bununla birlikte, sunulan hipolipidemik bulgular venöz klinik sonuçları veya venöz tromboz uç noktalarını doğrudan ölçmemektedir, bu nedenle bu veri setinde fleboloji ilişkisi dolaylı kalmaktadır [37].
Antitrombotik ve trombositlerle ilgili bulgular
Sunulan özetlerdeki trombosit ve trombozla ilgili kanıtlar karışıktır ve bileşene özgü görünmektedir. Bir inceleme, kenevir tohumunun trombosit agregasyonu ve tromboz üzerindeki etkilerine ilişkin tutarsız hayvan bulgularını not etmektedir [6]. Aynı inceleme, bunu trombositlerde CLEC-2 sinyali yoluyla ve artan P-selektin, GPIIb/IIIa aktivasyonu ve fosfatidilserin maruziyeti gibi ilişkili aktivasyon belirteçleri ile trombosit aktivasyonunu ve trombozu indükleyen hemin (kenevir tohumunun bir bileşeni olarak tanımlanır) ile karşılaştırmaktadır [6]. Diyetsel modellerde, bir rapor sıçanlarda kenevir tohumu takviyesinin toplam plazma PUFA'larını artırdığını ve daha düşük bir agregasyon oranı ile trombosit agregasyonunu önemli ölçüde inhibe ettiğini tanımlarken [37], bir başka tavşan hiperkolesterolemi modelinin %10 kenevir tohumu ilavesiyle trombosit agregasyon değerlerinde normalleşme gösterdiği ve bunu kısmen artan plazma gama-linolenik aside bağladığı tanımlanmaktadır [37]. Buna karşılık, sağlıklı deneklerde yapılan bir insan raporu, kenevir tohumu yağı takviyesi ile kolajen veya trombin ile stimüle edilmiş trombosit agregasyonunda hiçbir değişiklik bulmamıştır [37].
Fleboloji bağlantısı: Venöz tromboz riski fleboloji ile ilgilidir ancak sunulan kanıtlar, bildirilen tutarsızlık ve hemin için pro-trombosit mekanizmaların varlığı göz önüne alındığında, bağlamlar genelinde kenevir tohumu proteinleri veya edestin kaynaklı peptitler için net bir antitrombotik etki oluşturmamaktadır [6]. Hayvan modellerindeki diyetsel inhibisyon/normalleşme bulguları, bazı koşullar altında kenevir tohumu tüketiminin olası antiplatelet etkilerini düşündürürken, sağlıklı insanlardaki boş agregasyon bulgusu ve hemin protromboti̇k mekanizması, herhangi bir venöz trombozla ilgili uygulama için belirsizliğin ve fraksiyona özgü karakterizasyonun öneminin altını çizmektedir [37].
Venöz ve fleboloji sonuçları
Özetlerde açıkça sağlanan venöz klinik sonuç kanıtları, edestin veya kenevir tohumu proteininden ziyade at kestanesi tohumu ekstresi (HCSE) ile ilgilidir. Atıfta bulunulan kanıtlar, HCSE ile plaseboya kıyasla CVI ile ilgili belirti ve semptomlarda iyileşme bildirmektedir [15]; buna birden fazla denemede bacak ağrısında bildirilen anlamlı azalmalar ve ödemdeki azalmalar (istatistiksel olarak anlamlı ödem azalmaları bildiren dört deneme dahil) ve birkaç çalışmada ayak bileği ve baldır çevrelerindeki azalmalar dahildir [15]. Aynı kaynak, advers olayları genellikle hafif ve seyrek olarak tanımlamakta ve kanıtların HCSE'nin CVI için etkili ve güvenli bir kısa süreli tedavi olduğunu düşündürdüğü sonucuna varmaktadır [15].
Fleboloji bağlantısı: Bu HCSE bulguları, kontrollü denemelerde doğrudan fleboloji uç noktalarının neye benzediğine dair bir örnek sağlar (ağrı, ödem ve ekstremite çevresi sonuçları) ancak edestinin kendisi için kanıt teşkil etmez [15]. Buna karşılık, sunulan set içerisindeki edestin/kenevir tohumu proteini kanıtları, venöz hastalık için klinik kullanımı desteklemekten ziyade venöz odaklı hipotez testlerini motive edebilecek vasküler-yakın mekanizmaları (ACE/renin inhibisyonu, NO değişiklikleri, antioksidan ve anti-inflamatuar aktivite) vurgulamaktadır [2, 8, 10, 11].
Sağlıkla ilgili diğer bulgular
Birkaç ek bulgu, venöz klinik uç noktalar sağlamadan geniş kardiyometabolik makuliyeti desteklemektedir. Enzimatik kenevir tohumu hidrolizatları, bir inceleme beyanında in vitro ve in vivo testlerde etkili antioksidan ve antihipertansif ajanlar olarak tanımlanmaktadır [2]. Yapısal karakterizasyon, edestini disülfür bağlarıyla bağlanan asidik ve bazik alt birimlerden oluşan bir hekzamer olarak tanımlamakta ve edestinler için soya fasulyesi veya kazeinden daha yüksek olan ve kardiyovasküler sağlığı destekleyen gıda formülasyonlarını desteklediği öne sürülen Arg/Lys oranlarını (5.27, 5.32 ve 4.00) bildirmektedir [38]. Fermente bir kenevir tohumu proteini ekstresi, HCT116 hücre proliferasyonunu istatistiksel anlamlılıkla inhibe etmiş ve yazarlar bu etkiyi edestinden biyoaktif peptitlerin oluşumuna bağlamıştır [39]. Kanıtlar ayrıca translasyon konusunda açık bir uyarı içermektedir: peptit çalışması, bazı peptitlerin insanlarda veya sıçanlarda doğrulanmış biyoyararlanıma sahip olduğunu not etmekte ancak fizyolojik önemi anlamak için in vivo araştırmaların gerekli olduğunu belirtmektedir [40].
Fleboloji bağlantısı: Bu ek bulgu ve mekanistik makuliyet esas olarak doğrudan venöz uç noktalardan ziyade kardiyovasküler ve oksidatif stres yolakları yoluyla katkıda bulunur ve bu nedenle flebolojide klinik rehberlikten ziyade öncelikle hedeflenmiş venöz araştırmalar için gerekçe işlevi görür [2, 38, 40].
Fleboloji sentezi
Sunulan kanıtlar, venöz klinik sonuçların bazı edestin dışı müdahalelerle iyileştirilebileceğini göstermektedir (örneğin, bacak ağrısı ve ödem dahil CVI semptomlarını iyileştiren ve özel bir venöz endikasyonda etkinlik ve kısa süreli güvenlik sonucunu destekleyen HCSE) [15]. Karşılaştırmalı olarak, sunulan özetlerdeki edestin/kenevir tohumu proteini kanıtları, venöz hastalık için muhtemelen önemli olabilecek mekanistik alanlara odaklanmaktadır; özellikle kan basıncı ve biyobelirteç değişiklikleri ile ACE/renin inhibisyonu, NO ile ilişkili endotelyal sinyalleşme ve hücresel modellerde oksidatif stres ve inflamatuar yolak modülasyonu [2, 7, 8, 10, 11].
Mekanistik köprüyü açık hale getirmek için kanıtlar şunları içerir: (i) hayvan ve insan çalışmalarında ACE/renin inhibisyonu ve ilgili BP etkilerinden gelen antihipertansif rasyonel [2, 7, 8, 28], (ii) insanlarda kenevir proteini müdahalelerine eşlik eden NO artışları ve kenevir tohumu ile yapılan hayvan vasküler çalışmalarında iyileşmiş endotelyal bağımlı gevşeme [8, 14, 21] ve (iii) stres stimülasyonu altında azalmış ROS, lipid peroksidasyonu ve Nrf-2/iNOS ve inflamatuar kutuplaşma modellerinin modülasyonu dahil olmak üzere antioksidan ve anti-inflamatuar hücresel etkiler [10, 11, 31]. Bu yakınsak mekanizmalar, prensipte venöz duvar inflamasyonu, venöz endotelyal aktivasyon ve tromboz riski ile ilgili olabilecek ortak vasküler ve endotelyal disfonksiyon yolakları ile uyumludur, ancak sunulan edestin odaklı kanıtlarda venöz klinik etkinlik olarak test edilmemişlerdir [6, 10].
Tartışma
Mekanistik alanlar genelinde, edestin açısından zengin kenevir proteinleri için en tutarlı sinyaller, sindirim ve enzimatik hidrolizin ölçülebilir biyoaktiviteye sahip peptitler oluşturması ve bu peptitlerin in vitro ve (sınırlı durumlarda) bağırsak bariyeri transport modellemesinden sonra işlevlerini koruyabilmesidir [5, 18, 19, 29]. ACE inhibisyonu, nicelleştirilmiş değerlere sahip edestin kaynaklı peptit dizileri, fraksiyon düzeyinde inhibisyon ve in vivo ve küçük bir randomize çapraz hipertansiyon çalışmasında kan basıncı/RAAS biyobelirteç değişiklikleri dahil olmak üzere birden fazla düzeyde desteklenmektedir [8, 23, 26]. Antioksidan ve anti-inflamatuar sinyaller, esas olarak peptit fraksiyonlarının ROS/NO ile ilişkili stres çıktılarını azalttığı ve uyarılmış koşullar altında Nrf-2/iNOS ve inflamatuar fenotipleri modüle ettiği kimyasal testler ve hücre modelleri tarafından desteklenmektedir [9–11, 31]. Endotelyal fonksiyon kanıtları, bir hayvan modelinde kenevir tohumları ile iyileştirilmiş asetilkolin aracılı gevşemeyi ve insan müdahalelerindeki NO artışlarını içerir; bunlar birlikte sadece BP düşürmenin ötesinde vasküler biyoaktiviteyi düşündürür [8, 14, 21].
Fleboloji için temel yorumlayıcı kısıtlama, sunulan doğrudan venöz klinik kanıtların edestinden ziyade HCSE ile ilgili olması ve sunulan edestin/kenevir tohumu proteini verilerinin venöz uç nokta denemelerinden ziyade büyük ölçüde mekanistik veya kardiyometabolik olmasıdır [2, 15]. Bu nedenle, edestinin herhangi bir fleboloji uygulaması hipotez odaklı olarak çerçevelenmelidir: CVI denemelerinde kullanılanlara (ağrı, ödem, ekstremite çevresi ve diğer objektif ölçümler) benzer venöz uç noktaları hedeflerken, hipertansiyon/endotel literatüründe halihazırda kullanılan mekanistik biyobelirteçlerden (ACE, renin ve plazma NO) ve ilgili vasküler hücre tiplerindeki oksidatif stres uç noktalarından yararlanılmalıdır [8, 10, 15].
Kısıtlılıklar
Sunulan kanıtların temel bir kısıtlılığı, biyoaktivite çalışmalarının çoğunun klinik öncesi veya mekanistik olmasıdır (kimyasal testler, hücre modelleri, peptit fraksiyonlama çalışmaları); bu durum venöz hastalık için klinik çıkarımı kısıtlamaktadır [9, 10, 25]. İnsan kanıtlarının mevcut olduğu yerlerde bile, bunlar venöz uç noktalardan ziyade hipertansiyon ve biyobelirteçlere (24 saatlik BP, ACE/renin aktivitesi ve NO) odaklanmıştır ve bu da flebolojiye doğrudan translasyonel ilgiyi sınırlamaktadır [8]. Veri seti ayrıca, insanlarda veya sıçanlarda biyoyararlanıma dair bazı kanıtlara rağmen, iddia edilen biyoaktiviteyi doğrulamak için in vivo araştırmaların gerekli olduğuna dair açık ifadelerle, peptit biyoaktivitesinin fizyolojik önemi ve translasyonuna ilişkin belirsizliği vurgulamaktadır [40]. Son olarak, trombosit/trombozla ilgili kanıtlar yönsel olarak karışıktır ve inhibe edilmiş agregasyondan değişikliğe kadar değişen hayvan ve insan diyetsel bulgularının yanı sıra bileşene özgü protromboti̇k mekanizmaları (hemin) içerir; bu durum daha fazla fraksiyona özgü klinik test olmaksızın venöz tromboz riski için çıkarımı karmaşıklaştırmaktadır [6, 37].
Sonuçlar ve araştırma öncelikleri
Sunulan kanıtlar, edestin açısından zengin kenevir tohumu proteinini, bir model sistemde bağırsak bariyeri geçişi yapabilen ve in vitro ve in vivo olarak ölçülebilir biyoaktivitelere, özellikle ACE inhibisyonu, antioksidan aktivite ve inflamatuar modülasyona sahip peptit karışımları oluşturabilen, yüksek oranda sindirilebilir bir protein kaynağı olarak desteklemektedir [1–3, 5, 11, 29]. Sunulan en klinik yakın kanıtlar, venöz sonuçlardan ziyade hafif hipertansiyonda kan basıncı düşüşü ve RAAS/NO biyobelirteç değişiklikleri ile ilgilidir; sunulan özetlerdeki açık venöz etkinlik kanıtı ise edestinden ziyade CVI'da HCSE için gösterilmiştir [8, 15].
Sunulan kanıtlar tarafından doğrudan motive edilen ve her biri mekanistik makuliyeti venöz açıdan ilgili kanıta dönüştürmek için tasarlanmış gelecekteki araştırma yönleri şunları içerir:
- HCSE literatürüne benzer sonuçlar (bacak ağrısı, ödem ve ekstremite çevresi) kullanan ancak edestin açısından zengin kenevir tohumu proteinini veya tanımlanmış peptit preparatlarını test eden venöz uç noktalı klinik çalışmalar [15].
- H3 (IGFLIIWV) gibi kanıtlanmış hücresel aktiviteye sahip peptitleri kullanarak, diğer hücre sistemlerinde modüle edildiği halihazırda gösterilmiş olan oksidatif stres ve inflamatuar sinyal uç noktalarını (örneğin, ROS, lipid peroksidasyonu, Nrf-2/iNOS ile ilgili çıktılar ve stres stimülasyonu altındaki inflamatuar kutuplaşma modelleri) değerlendiren venöz endotelyal ve venöz duvar hücre modelleri [10, 11, 31].
- Bağırsak transport kanıtlarından ve fizyolojik önemin in vivo doğrulanması çağrısından yola çıkarak, edestin kaynaklı hangi peptitlerin sindirimden sonra dolaşıma ulaştığını nicelleştiren farmakokinetik ve biyoyararlanım çalışmaları [5, 40].
- Edestin kaynaklı preparatlar alan venöz hastalığı olan kişilerde bu yolakların değişip değişmediğini test etmek için hipertansiyon çalışmalarında halihazırda kullanılan RAAS/NO biyobelirteç panellerini (ACE, renin, plazma NO) entegre eden mekanistik venöz hemodinamik çalışmaları [8].
- İnceleme literatüründe tanımlanan hemin aracılı trombosit aktivasyonu gibi bileşene özgü protromboti̇k mekanizmaları ve karışık trombosit kanıtlarını açıkça hesaba katan, venöz tromboz riski altındaki popülasyonlarda güvenlik odaklı değerlendirmeler [6].
