Η Edestin είναι η κυρίαρχη πρωτεΐνη αποθήκευσης του σπόρου κάνναβης και συζητείται συχνά ως πηγή εύπεπτης πρωτεΐνης και βιοδραστικών πεπτιδίων μετά από ενζυματική υδρόλυση ή γαστρεντερική πέψη[1–5]. Αυτή η ανασκόπηση συνθέτει τα παρεχόμενα στοιχεία σε μηχανιστικούς τομείς που σχετίζονται με την αγγειακή βιολογία, με έμφαση σε πιθανές (άμεσες ή έμμεσες) εφαρμογές στη φλεβολογία (φλεβική νόσος). Η περιλαμβανόμενη βιβλιογραφία υποστηρίζει με τη μεγαλύτερη συνέπεια την αντιυπερτασική δράση μέσω της ρύθμισης του συστήματος ρενίνης–αγγειοτενσίνης (αναστολή ACE/ρενίνης), τις αντιοξειδωτικές επιδράσεις σε χημικές και κυτταρικές δοκιμασίες, τη ρύθμιση των αντιφλεγμονωδών μονοπατιών και τις ενδοθηλιακές/σχετιζόμενες με το NO αγγειακές επιδράσεις, με ορισμένες μηχανιστικές υπολιπιδαιμικές δράσεις σε μοντέλα ηπατοκυττάρων[2, 4, 6–14]. Ωστόσο, οι φλεβικές κλινικές εκβάσεις δεν αποδεικνύονται για την Edestin ή την πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης στα παρεχόμενα αποσπάσματα· τα ρητά κλινικά στοιχεία φλεβικών δοκιμών που παρέχονται σχετίζονται αντίθετα με το horse chestnut seed extract (HCSE) για τα συμπτώματα της χρόνιας φλεβικής ανεπάρκειας (CVI), όπως ο πόνος στα πόδια και το οίδημα[15]. Συνολικά, η βάση των στοιχείων υποστηρίζει τη μηχανιστική αληθοφάνεια για τη φλεβική συνάφεια (ενδοθηλιακή λειτουργία, οξειδωτικό στρες, φλεγμονή και αιμοστατικά μονοπάτια), αλλά δεν καθιερώνει την Edestin ως τεκμηριωμένη φλεβολογική παρέμβαση στο παρεχόμενο σώμα κειμένων[1, 2, 5, 10, 15].
Επισκόπηση της Edestin
Η Edestin περιγράφεται ως μια πρωτεΐνη αποθήκευσης σπόρων κάνναβης που απαντάται κυρίως στο κλάσμα της 11S σφαιρίνης (τύπου λεγουμίνης) και αναφέρεται ότι αποτελεί περίπου το 60–80% της συνολικής πρωτεΐνης του σπόρου κάνναβης στην αναφερόμενη βιβλιογραφία ανασκόπησης[1, 3]. Η πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης αναφέρεται ότι είναι πλούσια σε Edestin και αλβουμίνη και περιγράφεται ως «εύπεπτη», παρέχοντας παράλληλα απαραίτητα αμινοξέα, συμπεριλαμβανομένης της σχετικά υψηλής περιεκτικότητας σε Arginine και Glutamic acid[2]. Οι εκτιμήσεις της in vivo πεπτικότητας που συνοψίζονται στο παρεχόμενο υλικό αναφέρουν πεπτικότητα πρωτεΐνης 85% για ολόκληρους σπόρους, 87% για το άλευρο κάνναβης και 95% για αποφλοιωμένους σπόρους κάνναβης[3], ενώ μια επιπλέον δήλωση ανασκόπησης αναφέρει in vitro πεπτικότητα πρωτεΐνης που υπερβαίνει το 88%[4].
Η επεξεργασία αποδεικνύεται επανειλημμένα ότι επηρεάζει την ποιότητα της πρωτεΐνης και τις λειτουργικές της ιδιότητες. Η αποφλοίωση (αφαίρεση του κελύφους) περιγράφεται ότι μειώνει ή εξαλείφει τα αντιθρεπτικά συστατικά και σχετίζεται με βελτιωμένη πεπτικότητα[1]. Η συμπεριφορά εκχύλισης και διαλυτότητας των πρωτεϊνών κάνναβης εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από το pH, με αυξημένη εκχυλισιμότητα να αναφέρεται έως το pH 12 και υψηλότερη διαλυτότητα στο pH 11–12, ενώ η χαμηλότερη διαλυτότητα εμφανίζεται κοντά στο ισοηλεκτρικό σημείο στο pH 4.6 (που χρησιμοποιείται επίσης για την καθίζηση πρωτεϊνών κατά την παρασκευή απομονωμάτων)[16]. Σε όλες τις μορφές προϊόντων, οι τιμές πεπτικότητας μπορούν να ποικίλλουν σημαντικά (π.χ. αναφερόμενο 98.5% για το πρωτεϊνικό απομόνωμα από καρδιές κάνναβης έναντι 87.8% για το απομόνωμα από φλοιούς κάνναβης)[17].
Η ενζυματική υδρόλυση είναι κεντρικής σημασίας για το σκεπτικό των «βιοδραστικών πεπτιδίων» για την Edestin και τις πρωτεΐνες κάνναβης. Οι συνθήκες υδρόλυσης αλλάζουν την απόδοση των πεπτιδίων και τον βαθμό υδρόλυσης (π.χ. απόδοση παγκρεατικού υδρολύματος 43% έναντι 16% για πεπτικό υδρόλυμα, και τιμές βαθμού υδρόλυσης 47.5% παγκρεατικού έναντι 19.7% πεπτικού)[18]. Τα προφίλ χρωματογραφίας αποκλεισμού μεγέθους στις παρεχόμενες μελέτες υδρολυμάτων τοποθετούν πολλά πεπτίδια περίπου εντός των 300–9,560 Da[19, 20]. Σημαντικό για τη μεταγενέστερη φυσιολογική αληθοφάνεια είναι ότι τα κλάσματα πεπτιδίων που φιλτράρονται κάτω από 3 kDa χρησιμοποιήθηκαν σε πειράματα εντερικής μεταφοράς, και οι συγγραφείς αναφέρουν ότι τα πεπτίδια στα υδρολύματα κάνναβης μπορούν να περάσουν τον γαστρεντερικό φραγμό και να ασκήσουν ακόμα αντιοξειδωτική ικανότητα[5].
Μέθοδοι
Αυτή η ανασκόπηση αποτελεί μια δομημένη αφηγηματική σύνθεση των παρεχόμενων αποσπασμάτων τεκμηρίωσης που καλύπτουν τον χαρακτηρισμό σύνθεσης/πεπτικότητας, in vitro δοκιμασίες βιοδραστικότητας πεπτιδίων, κυτταρικά μοντέλα οξειδωτικού στρες και φλεγμονής, ζωικά μοντέλα αγγειακής λειτουργίας, ζωικά μοντέλα υπέρτασης και περιορισμένες εκβάσεις αρτηριακής πίεσης/βιοδεικτών σε ανθρώπους[1, 3, 7–11, 19, 21]. Οι μηχανιστικοί τομείς αντιμετωπίστηκαν ως διακριτές ομάδες τεκμηρίωσης, με έμφαση σε τελικά σημεία που είναι πιθανώς σχετικά με τη φλεβική παθολογία (οξειδωτικό στρες, φλεγμονή, ενδοθηλιακή λειτουργία/σηματοδότηση NO και διαδικασίες αιμοπεταλίων/αιμόστασης), ενώ οι ρητά φλεβικές κλινικές εκβάσεις προσδιορίστηκαν όταν υπήρχαν στο παρεχόμενο υλικό (π.χ. HCSE σε CVI)[10, 11, 15].
Τεκμηρίωση ανά τομέα υγείας
Σύνθεση και πεπτικότητα
Σε όλες τις ανασκοπήσεις και τις πειραματικές μελέτες, η Edestin περιγράφεται σταθερά ως κύρια πρωτεΐνη αποθήκευσης του σπόρου κάνναβης, αντιπροσωπεύοντας συνήθως το ~60–80% της συνολικής πρωτεΐνης του σπόρου[1, 3]. Η πεπτικότητα αναφέρεται ως υψηλή σε πολλαπλά σκευάσματα, με την in vivo πεπτικότητα να συνοψίζεται στο 85% (ολόκληροι σπόροι), 87% (άλευρο κάνναβης) και 95% (αποφλοιωμένοι σπόροι κάνναβης), ενώ η in vitro πεπτικότητα περιγράφεται ότι υπερβαίνει το 88% σε μία ανασκόπηση[3, 4]. Η επεξεργασία συμβάλλει ουσιαστικά: η αποφλοίωση περιγράφεται ότι μειώνει τα αντιθρεπτικά συστατικά και βελτιώνει τη χρήση και την πεπτικότητα της πρωτεΐνης[1], και η διαλυτότητα/εκχυλισιμότητα της πρωτεΐνης δείχνει ισχυρή εξάρτηση από το pH που σχετίζεται με την παρασκευή απομονωμάτων (υψηλότερη εκχυλισιμότητα και διαλυτότητα σε αλκαλικό pH, χαμηλότερη διαλυτότητα κοντά στο ισοηλεκτρικό σημείο pH 4.6 που χρησιμοποιείται για την καθίζηση)[16]. Ο χαρακτηρισμός που σχετίζεται με την υδρόλυση υποδεικνύει περαιτέρω ότι διαφορετικά ενζυμικά συστήματα παράγουν διαφορετικές αποδόσεις πεπτιδίων και βαθμούς υδρόλυσης, και τα μείγματα πεπτιδίων αναφέρονται στο εύρος ~300–9,560 Da στις αναλύσεις SEC[18–20]. Η εργασία σε μοντέλα μεταφοράς προσθέτει βιολογική αληθοφάνεια αναφέροντας ότι τα πεπτίδια στα υδρολύματα κάνναβης (συμπεριλαμβανομένων των κλασμάτων <3 kDa) μπορούν να περάσουν τον γαστρεντερικό φραγμό και να διατηρήσουν την αντιοξειδωτική τους ικανότητα[5].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Η άμεση συνάφεια με τη φλεβολογία είναι έμμεση, αλλά η πεπτικότητα και η ικανότητα των πεπτιδίων να διασχίζουν ένα μοντέλο εντερικού φραγμού αποτελεί προϋπόθεση για συστηματικές αγγειακές επιδράσεις που θα μπορούσαν (καταρχήν) να επηρεάσουν τη βιολογία του φλεβικού ενδοθηλίου[5]. Ξεχωριστά, οι παρεχόμενες ανασκοπήσεις δίνουν έμφαση στην Arginine ως πρόδρομο του Nitric oxide (NO), το οποίο «χαλαρώνει και διαστέλλει τα αιμοφόρα αγγεία», υποστηρίζοντας μια θεωρητική σύνδεση με τον αγγειακό τόνο και την ενδοθηλιακή λειτουργία που θα μπορούσε να είναι σχετική με τους μηχανισμούς της φλεβικής νόσου[22].
Αντιυπερτασική δράση και αναστολή ACE και ρενίνης
Πολλαπλές ανασκοπήσεις περιγράφουν αντιυπερτασικές επιδράσεις των υδρολυμένων πρωτεϊνών σπόρων κάνναβης που αποδίδονται στην αναστολή των ACE και ρενίνης[2, 6], ενώ πρόσθετες δηλώσεις σε επίπεδο ανασκόπησης σημειώνουν ότι τα πεπτίδια κάνναβης αναστέλλουν την ACE για την υποστήριξη της ρύθμισης της αρτηριακής πίεσης και ότι η πέψη μπορεί να παράγει αντιυπερτασικά βιοδραστικά πεπτίδια[1, 4]. In vitro μελέτες πεπτιδίων και κλασμάτων παρέχουν εκτιμήσεις ισχύος για πεπτίδια που αναστέλλουν την ACE προερχόμενα από την Edestin: τα πεπτίδια GVLY, LGV και RVR αναφέρονται με τιμές ACE IC50 , , και , και αυτά τα πεπτίδια περιγράφονται ρητά ως προερχόμενα από την υδρόλυση της Edestin· αντίθετα, το IEE περιγράφεται ως σχεδόν ανενεργό (20.5% αναστολή στην υψηλότερη ελεγχόμενη συγκέντρωση)[23]. Πρόσθετη in vitro εργασία αναφέρει αναστολή της ACE από μείγματα πεπτιδίων σε σταθερή συγκέντρωση 1 mg/mL (57.5% για S, 15.7% for M, και 32.4% for T)[24], και η κλασμάτωση/υδρόλυση παραπροϊόντων πρωτεΐνης κάνναβης αναφέρεται ότι αυξάνει την ανασταλτική δράση της ACE (π.χ. ένα υδρόλυμα Alcalase IC50 80 mg/L και υπερφιλτραρισμένα κλάσματα περίπου 72 mg/L στην αναφερόμενη μελέτη)[25]. Η κλασμάτωση ενός παγκρεατικού υδρολύματος αναφέρεται ότι αποδίδει ένα κλάσμα με 84.9% αναστολή της ACE στα 1.0 mg/mL και IC50 , ενώ το μη κλασματωμένο υδρόλυμα πέτυχε 44.8% αναστολή της ACE στα 1.1 mg/mL[26].
Η in vivo τεκμηρίωση περιλαμβάνει ευρήματα σε αυθόρμητα υπερτασικούς επίμυες που συνοψίζονται σε ανασκοπήσεις ως μείωση της αρτηριακής πίεσης και μειωμένη δραστικότητα της ACE στο πλάσμα μετά από χορήγηση υδρολύματος πρωτεΐνης σπόρων κάνναβης[7], μαζί με αναφερόμενες μειώσεις στη συγκέντρωση ρενίνης στο πλάσμα και στη δραστικότητα της ACE με τη διατροφή πρωτεΐνης σπόρων κάνναβης σε αναφερόμενες προκλινικές συνόψεις[27]. Τα στοιχεία σε ανθρώπους στα παρεχόμενα αποσπάσματα περιλαμβάνουν μια περιγραφόμενη διπλή-τυφλή τυχαιοποιημένη διασταυρούμενη δοκιμή σε 35 ενήλικες με ήπια υπέρταση που αξιολογεί πρωτεΐνες και πεπτίδια σπόρων κάνναβης[28], και τα αναφερόμενα αποτελέσματα δείχνουν ότι η πρόσληψη τόσο των πρωτεϊνών όσο και των πεπτιδίων σπόρων κάνναβης μείωσε την 24-ωρη συστολική και διαστολική αρτηριακή πίεση και μείωσε τη δραστικότητα της ACE στο πλάσμα, με πρόσθετες αλλαγές που περιλαμβάνουν βιοδείκτες σχετιζόμενους με το NO στην αναφερόμενη έκθεση[8, 28].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Η σύνδεση με τη φλεβολογία είναι περισσότερο παραπλήσια προς τον μηχανισμό παρά βασισμένη σε φλεβικά τελικά σημεία, επειδή τα παρεχόμενα στοιχεία δίνουν έμφαση στη ρύθμιση ACE/ρενίνης και στις σχετικές αλλαγές στο NO παρά σε εκβάσεις όπως τα συμπτώματα CVI ή η φλεβική αιμοδυναμική[2, 4, 7, 8]. Η ίδια έκθεση για την ανθρώπινη υπέρταση σημειώνει ότι και οι δύο θεραπείες μείωσαν τις δραστικότητες της ACE και της ρενίνης και αύξησαν το NO στο πλάσμα σε σύγκριση με την Casein, κάτι που είναι σχετικό με την ενδοθηλιακή λειτουργία και τον αγγειακό τόνο που θα μπορούσαν πιθανώς να επηρεάσουν τη φλεβική παθοφυσιολογία[8].
Αντιοξειδωτικές επιδράσεις
Η αντιοξειδωτική δράση στα παρεχόμενα στοιχεία υποστηρίζεται κυρίως από in vitro χημικές δοκιμασίες και κυτταρικά μοντέλα οξειδωτικού στρες. Μία μελέτη αναφέρει στατιστικά σημαντική διαφορά που υποδεικνύει ότι τα υδρολύματα έχουν υψηλότερη αντιοξειδωτική δράση από τις πρωτεΐνες[29], και μια άλλη έκθεση περιγράφει «ισχυρή, άμεση αντιοξειδωτική δράση» των υδρολυμάτων κάνναβης που αξιολογήθηκε με δοκιμασίες DPPH, TEAC, FRAP και ORAC[9]. Οι παράμετροι υδρόλυσης φαίνονται σημαντικές, με την ισχυρότερη αντιοξειδωτική δράση να αναφέρεται για δείγματα στον υψηλότερο βαθμό υδρόλυσης (9%) και με τα υδρολύματα που προέρχονται από παγκρεατίνη να αναφέρονται ως ισχυρότερα αντιοξειδωτικά από τα υδρολύματα που προέρχονται από αλκαλάση με βάση τις συγκρίσεις[30]. Σε μοντέλα οξειδωτικού στρες HepG2, τα πεπτίδια H2 και H3 αναφέρεται ότι μειώνουν τα ROS, την υπεροξείδωση των λιπιδίων και την παραγωγή NO και ρυθμίζουν τα μονοπάτια Nrf-2 και iNOS υπό διέγερση[10], και το συγκεκριμένο πεπτίδιο H3 (IGFLIIWV) περιγράφεται ότι παρέχει αντιοξειδωτική δράση μέσω της ρύθμισης Nrf-2/iNOS με μειωμένα ROS, NO και υπεροξείδωση λιπιδίων που επάγονται από H2O2[31]. In vivo αλλαγές στην αντιοξειδωτική άμυνα αναφέρονται επίσης σε αυθόρμητα υπερτασικούς επίμυες, όπου η διατροφική συμπερίληψη ενός σκευάσματος σχετικού με την κάνναβη (HMH) αύξησε τα επίπεδα SOD και CAT στο πλάσμα και μείωσε τα επίπεδα TPx[32]. Τα χαρακτηριστικά δομής-δραστικότητας συζητούνται στη βιβλιογραφία των υδρολυμάτων, συμπεριλαμβανομένης μιας δήλωσης ότι η C-τελική Tyr σε μικρά πεπτίδια (AY, VY, TY και LLY) είναι καθοριστική για την αντιοξειδωτική δράση[25].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Η συνάφεια με τη φλεβολογία είναι έμμεση αλλά βιολογικά αληθοφανής, επειδή οι φλεβικές διαταραχές περιλαμβάνουν ενδοθηλιακή δυσλειτουργία και οξειδωτικό στρες, και αρκετά πεπτίδια που προέρχονται από την κάνναβη μειώνουν τα ROS και την υπεροξείδωση των λιπιδίων ενώ ρυθμίζουν τα μονοπάτια Nrf-2/iNOS σε μοντέλα κυτταρικού στρες[10, 31]. Πρόσθετο μηχανιστικό πλαίσιο παρέχεται από μια δήλωση ανασκόπησης ότι η επαγωγή της HO-1 έχει αποδειχθεί ότι προστατεύει από την ενδοθηλιακή δυσλειτουργία και το οξειδωτικό στρες, γεγονός που τοποθετεί τα αντιοξειδωτικά μονοπάτια ως αγγειακά σχετιζόμενα, ακόμη και αν τα φλεβικά τελικά σημεία δεν μετρώνται σε αυτά τα αποσπάσματα[22].
Αντιφλεγμονώδεις και ανοσορρυθμιστικές επιδράσεις
Η αντιφλεγμονώδης τεκμηρίωση στα παρεχόμενα αποσπάσματα προέρχεται κυρίως από εργασία σε κυτταρικά μοντέλα και περιγραφές επιπέδου ανασκόπησης των βιοδραστικοτήτων της πρωτεΐνης κάνναβης. Μια δήλωση ανασκόπησης σημειώνει ότι η πρωτεΐνη κάνναβης περιέχει βιοδραστικά πεπτίδια που απελευθερώνονται κατά την υδρόλυση και εμφανίζουν αντιφλεγμονώδη δράση παράλληλα με την αντιοξειδωτική και αντιυπερτασική δράση[4], και μια άλλη ανασκόπηση σημειώνει τις αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες των πεπτιδίων κάνναβης μέσω της ρύθμισης βασικών κυτταρικών μονοπατιών[4]. Σε ένα μοντέλο κυττάρων BV-2 διεγερμένων με LPS, η έκθεση σε LPS αύξησε την έκφραση mRNA που σχετίζεται με το φλεγμονωσώμα (Asc) σε σχέση με τους μη επεξεργασμένους μάρτυρες, υποδεικνύοντας φλεγμονώδη ενεργοποίηση σε αυτό το σύστημα[11]. Η ίδια μελέτη αναφέρει μια πόλωση προς έναν αντιφλεγμονώδη φαινότυπο M2 στο κυτταρικό μοντέλο και περιγράφει μειώσεις στην έκφραση TNF-α με θεραπείες που περιλαμβάνουν υδρολύματα, καθώς και αυξήσεις σε έναν δείκτη M2 (Arg1) μετά από συγκεκριμένες συγκρίσεις θεραπείας στα αποτελέσματα που αναφέρονται στο σχήμα[11]. Μια μη αξιολογημένη από ομότιμους διαδικτυακή πηγή αναφέρει ότι η Edestin ερευνάται για πιθανές αντιφλεγμονώδεις και ανοσορρυθμιστικές ικανότητες, κάτι που είναι συνεπές με το ευρύτερο αντιφλεγμονώδες πλαίσιο αλλά δεν αποτελεί απόδειξη κλινικής αποτελεσματικότητας[33].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Αυτή η τεκμηρίωση είναι παραπλήσια μηχανιστικά με τη φλεβολογία επειδή η φλεβική νόσος περιλαμβάνει φλεγμονώδη ενεργοποίηση και ενδοθηλιακή δυσλειτουργία, και τα παρεχόμενα ευρήματα κυτταρικών μοντέλων δείχνουν προς την αντιφλεγμονώδη πόλωση και τη ρύθμιση της έκφρασης φλεγμονωδών γονιδίων σε συστήματα διεγερμένα από LPS[11]. Παρόλα αυτά, τα παρεχόμενα αποσπάσματα δεν παρουσιάζουν φλεβικά κλινικά τελικά σημεία για την Edestin/πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης σε αυτόν τον τομέα, επομένως η σύνδεση με τη φλεβολογία παραμένει σε επίπεδο δημιουργίας υποθέσεων παρά αποδεδειγμένης αποτελεσματικότητας[33].
Ενδοθηλιακή και αγγειακή λειτουργία
Στοιχεία αγγειακής φυσιολογίας σε ζώα σε παχύσαρκους επίμυες Zucker δείχνουν ότι οι σπόροι κάνναβης βελτίωσαν την ενδοθηλιοεξαρτώμενη χαλάρωση: η εξασθενημένη χαλαρωτική απόκριση που προκαλείται από την Acetylcholine βελτιώθηκε από τους σπόρους κάνναβης αλλά όχι από το έλαιο σπόρων κάνναβης, και η χαλάρωση που προκαλείται από την Acetylcholine ενισχύθηκε κατά 1.21 φορές από τους σπόρους κάνναβης (HS) αλλά όχι από το έλαιο κάνναβης (HO) στην αναφερόμενη ανάλυση[14, 21]. Το ίδιο πειραματικό πλαίσιο αναφέρει επίσης αλλαγές στην αγγειακή ανταπόκριση, συμπεριλαμβανομένης της αυξημένης συστολής που προκαλείται από τη Noradrenaline και στις δύο ομάδες HO και HS και μετατοπίσεις στις χαλαρωτικές αποκρίσεις σε ρυθμιστές διαύλων καλίου (η απόκριση στην pinacidil μετατοπίστηκε δεξιά· η απόκριση στην NS1619 αυξήθηκε σημαντικά τόσο με το HO όσο και με το HS)[14, 21]. Το μηχανιστικό πλαίσιο στις παρεχόμενες ανασκοπήσεις τονίζει ότι η Arginine είναι πρόδρομος του NO και ότι το NO χαλαρώνει και διαστέλλει τα αιμοφόρα αγγεία, υποστηρίζοντας μια σύνδεση σε επίπεδο μονοπατιού μεταξύ της διατροφικής σύνθεσης της κάνναβης και της ενδοθηλιακής λειτουργίας[7]. Σε μια μελέτη ανθρώπινης υπέρτασης, η κατανάλωση HSP+ αύξησε το NO στο πλάσμα σε σύγκριση με την Casein, και η HSP (έναντι της Casein) μείωσε τη δραστικότητα της ACE και τη συγκέντρωση ρενίνης στο πλάσμα και αύξησε τη συγκέντρωση NO στο πλάσμα, ευθυγραμμίζοντας τις αλλαγές των ενδοθηλιακών βιοδεικτών με τη ρύθμιση του RAAS[8].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Οι φλεβικές διαταραχές μοιράζονται παθοφυσιολογικά χαρακτηριστικά με την ευρύτερη ενδοθηλιακή δυσλειτουργία και την αλλοιωμένη αγγειοδραστική σηματοδότηση, και τα παρεχόμενα στοιχεία καταδεικνύουν αυξήσεις βιοδεικτών σχετιζόμενων με το NO και βελτιωμένη ενδοθηλιοεξαρτώμενη χαλάρωση σε ζωικά μοντέλα, κάτι που είναι μηχανιστικά σχετικό παρόλο που δεν μετρώνται φλεβικές εκβάσεις σε αυτά τα αποσπάσματα[8, 14, 21]. Πρόσθετο πλαίσιο ενδοθηλιακής ενεργοποίησης προέρχεται από μια ανασκόπηση που σημειώνει ότι η β-sitosterol μπορεί να μειώσει τα ενδοθηλιακά μόρια προσκόλλησης (VCAM-1 και ICAM-1) σε πειραματικά μοντέλα, κάτι που είναι σχετικό με τους μηχανισμούς ενδοθηλιακής φλεγμονής που πιθανώς μοιράζονται η αρτηριακή και η φλεβική νόσος[6].
Υπολιπιδαιμικοί και λιπιδορυθμιστικοί μηχανισμοί
Τα ισχυρότερα υπολιπιδαιμικά στοιχεία στο παρεχόμενο σετ είναι μηχανιστικά και βασίζονται σε κύτταρα. Πολλαπλές in vitro μελέτες αναφέρουν δοσοεξαρτώμενη αναστολή της δραστηριότητας της HMG-CoA reductase (HMGCoAR) από παρασκευάσματα πεπτιδίων προερχόμενων από κάνναβη, συμπεριλαμβανομένων ποσοτικών τιμών αναστολής σε διάφορες συγκεντρώσεις έως και 80.0% αναστολή στα 1.0 mg/mL σε μία μελέτη[12, 34]. Συμπληρωματικά μηχανιστικά ευρήματα αναφέρουν ανοδική ρύθμιση του SREBP2 (ώριμη μορφή), αυξημένη φωσφορυλίωση AMPK, αυξημένη πρόσληψη LDL και αυξημένα επίπεδα πρωτεΐνης LDLR μετά από θεραπεία με πεπτίδια κάνναβης σε μοντέλα ηπατοκυττάρων[13, 35]. Ένα συγκεκριμένο πεπτίδιο, το H3, αναφέρεται ότι αναστέλλει την HMGCoAR με IC50 και αυξάνει την ώριμη SREBP-2 και τις πρωτεΐνες LDLR που εντοπίζονται στη μεμβράνη, με αντίστοιχη αύξηση στη λειτουργική απορρόφηση LDL από κύτταρα HepG2[36]. Τα στοιχεία για τις εκβάσεις των λιπιδίων in vivo είναι μικτά σε ζωικές και ανθρώπινες μελέτες, συμπεριλαμβανομένων μειώσεων της ολικής χοληστερόλης και της HDL (χωρίς αλλαγή στα TG) σε μία σύγκριση σε επίμυες και μειώσεων της HDL και των TG με έλαιο κάνναβης σε μια άλλη, καθώς και μιας ανθρώπινης δοκιμής που δεν ανέφερε σημαντικές αλλαγές στα TC, HDL-C, LDL-C ή TG του πλάσματος μετά από παρέμβαση με σπόρους κάνναβης, αλλά μια αναφερόμενη μείωση της αναλογίας TC:HDL σε ένα άλλο πλαίσιο συμπληρωματικής χορήγησης ελαίου[14, 37].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Η ρύθμιση των λιπιδίων μπορεί να είναι σχετική με την ενδοθηλιακή ενεργοποίηση και τη φλεγμονή, και τα παρεχόμενα στοιχεία περιλαμβάνουν μια δήλωση ανασκόπησης ότι ενώσεις παρόμοιες με φυτοστερόλες μπορούν να ανταγωνιστούν τη χοληστερόλη για απορρόφηση και ότι η β-sitosterol μείωσε την έκφραση ενδοθηλιακών μορίων προσκόλλησης σε πειραματικά μοντέλα, προσφέροντας μια μηχανιστική γέφυρα μέσω των μονοπατιών ενδοθηλιακής φλεγμονής παρά μέσω φλεβικών τελικών σημείων[6, 7]. Ωστόσο, τα παρεχόμενα υπολιπιδαιμικά ευρήματα δεν μετρούν άμεσα φλεβικές κλινικές εκβάσεις ή τελικά σημεία φλεβικής θρόμβωσης, επομένως η συνάφεια με τη φλεβολογία παραμένει έμμεση σε αυτό το σύνολο δεδομένων[37].
Αντιθρομβωτικά και σχετιζόμενα με τα αιμοπετάλια ευρήματα
Τα στοιχεία που σχετίζονται με τα αιμοπετάλια και τη θρόμβωση στα παρεχόμενα αποσπάσματα είναι μικτά και φαίνονται να εξαρτώνται από το συγκεκριμένο συστατικό. Μια ανασκόπηση σημειώνει ασυνεπή ζωικά ευρήματα σχετικά με τις επιδράσεις των σπόρων κάνναβης στη συσσώρευση των αιμοπεταλίων και τη θρόμβωση[6]. Η ίδια ανασκόπηση το αντιπαραβάλλει αυτό με την Hemin (που περιγράφεται ως συστατικό του σπόρου κάνναβης) η οποία επάγει την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων και τη θρόμβωση, συμπεριλαμβανομένης της σηματοδότησης CLEC-2 στα αιμοπετάλια και με σχετικούς δείκτες ενεργοποίησης όπως η αυξημένη P-selectin, η ενεργοποίηση GPIIb/IIIa και η έκθεση φωσφατιδυλοσερίνης[6]. Σε διατροφικά μοντέλα, μία έκθεση περιγράφει ότι η συμπληρωματική χορήγηση σπόρων κάνναβης σε επίμυες αύξησε τα συνολικά PUFAs στο πλάσμα και ανέστειλε σημαντικά τη συσσώρευση αιμοπεταλίων με χαμηλότερο ρυθμό συσσώρευσης[37], ενώ ένα άλλο μοντέλο υπερχοληστερολαιμίας σε κουνέλια περιγράφεται ότι δείχνει ομαλοποίηση των τιμών συσσώρευσης αιμοπεταλίων με την προσθήκη 10% σπόρων κάνναβης και αποδίδει αυτό εν μέρει στην αύξηση του gamma-linolenic acid στο πλάσμα[37]. Αντίθετα, μια έκθεση σε υγιή ανθρώπινα υποκείμενα δεν διαπίστωσε καμία αλλαγή στη συσσώρευση αιμοπεταλίων που προκαλείται από κολλαγόνο ή θρομβίνη με τη συμπληρωματική χορήγηση ελαίου σπόρων κάνναβης[37].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Ο κίνδυνος φλεβικής θρόμβωσης είναι σχετικός με τη φλεβολογία, αλλά τα παρεχόμενα στοιχεία δεν καθιερώνουν μια σαφή καθαρή αντιθρομβωτική δράση για τις πρωτεΐνες σπόρων κάνναβης ή τα πεπτίδια που προέρχονται από την Edestin σε διάφορα πλαίσια, δεδομένης της αναφερόμενης ασυνέπειας και της παρουσίας προ-αιμοπεταλιακών μηχανισμών για την Hemin[6]. Τα ευρήματα διατροφικής αναστολής/ομαλοποίησης σε ζωικά μοντέλα υποδηλώνουν πιθανές αντιαιμοπεταλιακές επιδράσεις της κατανάλωσης σπόρων κάνναβης υπό ορισμένες συνθήκες, ενώ το μηδενικό εύρημα συσσώρευσης σε υγιείς ανθρώπους και ο προθρομβωτικός μηχανισμός της Hemin υπογραμμίζουν την αβεβαιότητα και τη σημασία του χαρακτηρισμού ανά συγκεκριμένο κλάσμα για οποιαδήποτε εφαρμογή σχετική με τη φλεβική θρόμβωση[37].
Φλεβικές και φλεβολογικές εκβάσεις
Η τεκμηρίωση των φλεβικών κλινικών εκβάσεων που παρέχεται ρητά στα αποσπάσματα αφορά το εκχύλισμα σπόρων ιπποκαστανιάς (HCSE) και όχι την Edestin ή την πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης. Τα αναφερόμενα στοιχεία αναφέρουν βελτίωση στα σημεία και συμπτώματα που σχετίζονται με τη CVI με το HCSE σε σύγκριση με το εικονικό φάρμακο[15], συμπεριλαμβανομένων αναφερόμενων σημαντικών μειώσεων στον πόνο των ποδιών και μειώσεων στο οίδημα σε πολλαπλές δοκιμές (συμπεριλαμβανομένων τεσσάρων δοκιμών που αναφέρουν στατιστικά σημαντικές μειώσεις οιδήματος), καθώς και μειώσεις στις περιφέρειες του αστραγάλου και της κνήμης σε αρκετές μελέτες[15]. Η ίδια πηγή περιγράφει τις ανεπιθύμητες ενέργειες ως συνήθως ήπιες και σπάνιες και καταλήγει στο συμπέρασμα ότι τα στοιχεία υποδηλώνουν ότι το HCSE είναι μια αποτελεσματική και ασφαλής βραχυπρόθεσμη θεραπεία για τη CVI[15].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Αυτά τα ευρήματα για το HCSE παρέχουν ένα παράδειγμα του πώς μοιάζουν τα άμεσα φλεβολογικά τελικά σημεία σε ελεγχόμενες δοκιμές (εκβάσεις πόνου, οιδήματος και περιφέρειας άκρων), αλλά δεν αποτελούν στοιχεία για την ίδια την Edestin[15]. Αντίθετα, η τεκμηρίωση για την Edestin/πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης στο παρεχόμενο σύνολο δίνει έμφαση σε μηχανισμούς παραπλήσιους των αγγείων (αναστολή ACE/ρενίνης, αλλαγές NO, αντιοξειδωτική και αντιφλεγμονώδη δράση) που θα μπορούσαν να παρακινήσουν τον έλεγχο υποθέσεων με επίκεντρο τις φλέβες, αντί να υποστηρίζουν την κλινική χρήση για τη φλεβική νόσο προς το παρόν[2, 8, 10, 11].
Άλλα ευρήματα σχετικά με την υγεία
Αρκετά πρόσθετα ευρήματα υποστηρίζουν την ευρεία καρδιομεταβολική αληθοφάνεια χωρίς να παρέχουν φλεβικά κλινικά τελικά σημεία. Τα ενζυματικά υδρολύματα σπόρων κάνναβης περιγράφονται ως αποτελεσματικοί αντιοξειδωτικοί και αντιυπερτασικοί παράγοντες σε in vitro και in vivo δοκιμές σε μια δήλωση ανασκόπησης[2]. Ο δομικός χαρακτηρισμός περιγράφει την Edestin ως ένα εξαμερές που αποτελείται από όξινες και βασικές υπομονάδες που συνδέονται με δισουλφιδικούς δεσμούς, και αναφέρει αναλογίες Arg/Lys για τις Edestins (5.27, 5.32 και 4.00) που είναι υψηλότερες από τη Soybean ή την Casein και προτείνεται ότι υποστηρίζουν συνθέσεις τροφίμων που προάγουν την καρδιαγγειακή υγεία[38]. Ένα εκχύλισμα πρωτεΐνης σπόρων κάνναβης που έχει υποστεί ζύμωση ανέστειλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων HCT116 με στατιστική σημαντικότητα, και οι συγγραφείς αποδίδουν αυτή την επίδραση στον σχηματισμό βιοδραστικών πεπτιδίων από την Edestin[39]. Η τεκμηρίωση περιέχει επίσης ρητή προειδοποίηση σχετικά με τη μεταφορά των αποτελεσμάτων: η εργασία στα πεπτίδια σημειώνει ότι ορισμένα πεπτίδια έχουν επιβεβαιωμένη βιοδιαθεσιμότητα σε ανθρώπους ή επίμυες, αλλά δηλώνει ότι απαιτούνται in vivo έρευνες για την κατανόηση της φυσιολογικής σημασίας[40].
Σύνδεση με τη φλεβολογία: Αυτά τα πρόσθετα ευρήματα συμβάλλουν στη μηχανιστική αληθοφάνεια κυρίως μέσω των καρδιαγγειακών μονοπατιών και των μονοπατιών οξειδωτικού στρες, παρά μέσω άμεσων φλεβικών τελικών σημείων, και επομένως λειτουργούν πρωτίστως ως σκεπτικό για στοχευμένη φλεβική έρευνα παρά ως κλινική καθοδήγηση στη φλεβολογία[2, 38, 40].
Φλεβολογική σύνθεση
Τα παρεχόμενα στοιχεία υποδεικνύουν ότι οι φλεβικές κλινικές εκβάσεις μπορούν να βελτιωθούν από ορισμένες παρεμβάσεις μη σχετιζόμενες με την Edestin (π.χ. το HCSE που βελτιώνει τα συμπτώματα CVI, συμπεριλαμβανομένου του πόνου στα πόδια και του οιδήματος, και υποστηρίζει ένα συμπέρασμα αποτελεσματικότητας και βραχυπρόθεσμης ασφάλειας σε μια ειδική φλεβική ένδειξη)[15]. Συγκριτικά, η τεκμηρίωση για την Edestin/πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης στα παρεχόμενα αποσπάσματα επικεντρώνεται σε μηχανιστικούς τομείς που θα μπορούσαν εύλογα να έχουν σημασία για τη φλεβική νόσο, ιδιαίτερα την αναστολή ACE/ρενίνης με αλλαγές στην αρτηριακή πίεση και τους βιοδείκτες, την ενδοθηλιακή σηματοδότηση που σχετίζεται με το NO και τη ρύθμιση του οξειδωτικού στρες και των φλεγμονωδών μονοπατιών σε κυτταρικά μοντέλα[2, 7, 8, 10, 11].
Για να γίνει σαφής η μηχανιστική γέφυρα, τα στοιχεία περιλαμβάνουν (i) αντιυπερτασικό σκεπτικό από την αναστολή ACE/ρενίνης και τις σχετικές επιδράσεις στην αρτηριακή πίεση σε μελέτες σε ζώα και ανθρώπους[2, 7, 8, 28], (ii) αυξήσεις NO που συνοδεύουν τις παρεμβάσεις πρωτεΐνης κάνναβης σε ανθρώπους και βελτιωμένη ενδοθηλιοεξαρτώμενη χαλάρωση σε αγγειακές μελέτες σε ζώα με σπόρους κάνναβης[8, 14, 21], και (iii) αντιοξειδωτικές και αντιφλεγμονώδεις κυτταρικές επιδράσεις που περιλαμβάνουν μειωμένα ROS, υπεροξείδωση λιπιδίων και ρύθμιση των Nrf-2/iNOS και των προτύπων φλεγμονώδους πόλωσης υπό διέγερση στρες[10, 11, 31]. Αυτοί οι συγκλίνοντες μηχανισμοί ευθυγραμμίζονται με κοινά μονοπάτια αγγειακής και ενδοθηλιακής δυσλειτουργίας που θα μπορούσαν, καταρχήν, να είναι σχετικά με τη φλεγμονή του φλεβικού τοιχώματος, τη φλεβική ενδοθηλιακή ενεργοποίηση και τον κίνδυνο θρόμβωσης, ενώ παραμένουν μη ελεγμένοι ως προς τη φλεβική κλινική αποτελεσματικότητα στα παρεχόμενα στοιχεία που επικεντρώνονται στην Edestin[6, 10].
Συζήτηση
Σε όλους τους μηχανιστικούς τομείς, τα πιο εσωτερικά συνεπή σήματα για τις πλούσιες σε Edestin πρωτεΐνες κάνναβης είναι ότι η πέψη και η ενζυματική υδρόλυση παράγουν πεπτίδια με μετρήσιμη βιοδραστικότητα και ότι αυτά τα πεπτίδια μπορούν να διατηρήσουν τη λειτουργία τους in vitro και (σε περιορισμένες περιπτώσεις) μετά από μοντελοποίηση μεταφοράς μέσω του εντερικού φραγμού[5, 18, 19, 29]. Η αναστολή της ACE υποστηρίζεται σε πολλαπλά επίπεδα, συμπεριλαμβανομένων πεπτιδικών αλληλουχιών προερχόμενων από την Edestin με ποσοτικοποιημένες τιμές, αναστολής σε επίπεδο κλάσματος και αλλαγών στους βιοδείκτες BP/RAAS in vivo και σε μια μικρή τυχαιοποιημένη διασταυρούμενη μελέτη υπέρτασης[8, 23, 26]. Τα αντιοξειδωτικά και αντιφλεγμονώδη σήματα υποστηρίζονται κυρίως από χημικές δοκιμασίες και κυτταρικά μοντέλα στα οποία τα κλάσματα πεπτιδίων μειώνουν τις ενδείξεις στρες που σχετίζονται με ROS/NO και ρυθμίζουν τους Nrf-2/iNOS και τους φλεγμονώδεις φαινοτύπους υπό συνθήκες διέγερσης[9–11, 31]. Τα στοιχεία ενδοθηλιακής λειτουργίας περιλαμβάνουν βελτιωμένη χαλάρωση με τη μεσολάβηση της Acetylcholine με σπόρους κάνναβης σε ζωικό μοντέλο και αυξήσεις NO σε παρεμβάσεις σε ανθρώπους, τα οποία μαζί υποδηλώνουν αγγειακή βιοδραστικότητα πέρα από τη μείωση της αρτηριακής πίεσης και μόνο[8, 14, 21].
Για τη φλεβολογία, ο βασικός ερμηνευτικός περιορισμός είναι ότι τα παρεχόμενα άμεσα φλεβικά κλινικά στοιχεία αφορούν το HCSE και όχι την Edestin, και τα δεδομένα της Edestin/πρωτεΐνης σπόρων κάνναβης που παρουσιάζονται είναι σε μεγάλο βαθμό μηχανιστικά ή καρδιομεταβολικά και όχι δοκιμές φλεβικών τελικών σημείων[2, 15]. Επομένως, οποιαδήποτε φλεβολογική εφαρμογή της Edestin θα πρέπει να πλαισιωθεί ως βασισμένη σε υποθέσεις: στοχεύοντας σε φλεβικά τελικά σημεία ανάλογα με εκείνα που χρησιμοποιούνται σε δοκιμές CVI (πόνος, οίδημα, περιφέρεια άκρων και άλλα αντικειμενικά μέτρα), αξιοποιώντας παράλληλα μηχανιστικούς βιοδείκτες που χρησιμοποιούνται ήδη στη βιβλιογραφία για την υπέρταση/ενδοθήλιο (ACE, ρενίνη και NO πλάσματος) και τελικά σημεία οξειδωτικού στρες σε σχετικούς αγγειακούς κυτταρικούς τύπους[8, 10, 15].
Περιορισμοί
Ένας κεντρικός περιορισμός των παρεχόμενων στοιχείων είναι ότι μεγάλο μέρος της εργασίας για τη βιοδραστικότητα είναι προκλινικό ή μηχανιστικό (χημικές δοκιμασίες, κυτταρικά μοντέλα, μελέτες κλασμάτωσης πεπτιδίων), γεγονός που περιορίζει την κλινική συναγωγή συμπερασμάτων για τη φλεβική νόσο[9, 10, 25]. Ακόμη και όπου υπάρχουν στοιχεία σε ανθρώπους, αυτά επικεντρώνονται στην υπέρταση και τους βιοδείκτες (24-hour BP, δραστηριότητα ACE/ρενίνης και NO) παρά σε φλεβικά τελικά σημεία, περιορίζοντας την άμεση μεταφραστική συνάφεια με τη φλεβολογία[8]. Το σύνολο δεδομένων υπογραμμίζει επίσης την αβεβαιότητα σχετικά με τη φυσιολογική σημασία και τη μεταφορά της βιοδραστικότητας των πεπτιδίων, με ρητές δηλώσεις ότι απαιτούνται in vivo έρευνες για την επικύρωση της υποτιθέμενης βιοδραστικότητας παρά ορισμένα στοιχεία βιοδιαθεσιμότητας σε ανθρώπους ή επίμυες[40]. Τέλος, τα στοιχεία που σχετίζονται με τα αιμοπετάλια/θρόμβωση είναι μικτά ως προς την κατεύθυνση και περιλαμβάνουν μηχανισμούς προθρόμβωσης ειδικούς για ορισμένα συστατικά (Hemin) παράλληλα με διατροφικά ευρήματα σε ζώα και ανθρώπους που κυμαίνονται από την ανασταλμένη συσσώρευση έως τη μη μεταβολή, γεγονός που περιπλέκει τη συναγωγή συμπερασμάτων για τον κίνδυνο φλεβικής θρόμβωσης χωρίς περισσότερες κλινικές δοκιμές ειδικές για κάθε κλάσμα[6, 37].
Συμπεράσματα και ερευνητικές προτεραιότητες
Τα παρεχόμενα στοιχεία υποστηρίζουν την πλούσια σε Edestin πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης ως μια εξαιρετικά εύπεπτη πηγή πρωτεΐνης που μπορεί να δημιουργήσει μείγματα πεπτιδίων ικανά να διαπεράσουν τον εντερικό φραγμό σε ένα σύστημα μοντέλου και με μετρήσιμες βιοδραστικότητες in vitro και in vivo, ιδιαίτερα αναστολή της ACE, αντιοξειδωτική δράση και ρύθμιση της φλεγμονής[1–3, 5, 11, 29]. Τα πιο κλινικά εγγύς στοιχεία που παρουσιάζονται σχετίζονται με τη μείωση της αρτηριακής πίεσης και τις αλλαγές των βιοδεικτών RAAS/NO σε ήπια υπέρταση παρά με φλεβικές εκβάσεις, ενώ η ρητή απόδειξη φλεβικής αποτελεσματικότητας στα παρεχόμενα αποσπάσματα καταδεικνύεται για το HCSE στη CVI και όχι για την Edestin[8, 15].
Μελλοντικές ερευνητικές κατευθύνσεις που παρακινούνται άμεσα από τα παρεχόμενα στοιχεία περιλαμβάνουν τα ακόλουθα, καθένα από τα οποία έχει σχεδιαστεί για να μετατρέψει τη μηχανιστική αληθοφάνεια σε στοιχεία σχετικά με τις φλέβες:
- Κλινικές δοκιμές φλεβικών τελικών σημείων στη CVI χρησιμοποιώντας εκβάσεις ανάλογες με τη βιβλιογραφία του HCSE (πόνος στα πόδια, οίδημα και περιφέρεια άκρων), αλλά δοκιμάζοντας πλούσια σε Edestin πρωτεΐνη σπόρων κάνναβης ή καθορισμένα παρασκευάσματα πεπτιδίων[15].
- Μοντέλα φλεβικών ενδοθηλιακών κυττάρων και κυττάρων φλεβικού τοιχώματος που αξιολογούν το οξειδωτικό στρες και τα τελικά σημεία φλεγμονώδους σηματοδότησης που έχει ήδη δειχθεί ότι ρυθμίζονται σε άλλα κυτταρικά συστήματα (π.χ. ROS, υπεροξείδωση λιπιδίων, ενδείξεις σχετιζόμενες με Nrf-2/iNOS και πρότυπα φλεγμονώδους πόλωσης υπό διέγερση στρες), χρησιμοποιώντας πεπτίδια με αποδεδειγμένη κυτταρική δράση όπως το H3 (IGFLIIWV)[10, 11, 31].
- Μελέτες φαρμακοκινητικής και βιοδιαθεσιμότητας που ποσοτικοποιούν ποια πεπτίδια προερχόμενα από την Edestin φτάνουν στην κυκλοφορία μετά την κατάποση, βασιζόμενες στα στοιχεία εντερικής μεταφοράς και τη ρητή έκκληση για in vivo επικύρωση της φυσιολογικής σημασίας[5, 40].
- Μελέτες μηχανιστικής φλεβικής αιμοδυναμικής που ενσωματώνουν πάνελ βιοδεικτών RAAS/NO (ACE, ρενίνη, NO πλάσματος) που χρησιμοποιούνται ήδη σε εργασίες για την υπέρταση για να ελεγχθεί εάν αυτά τα μονοπάτια αλλάζουν σε άτομα με φλεβική νόσο που λαμβάνουν παρασκευάσματα προερχόμενα από Edestin[8].
- Αξιολογήσεις με επίκεντρο την ασφάλεια σε πληθυσμούς που κινδυνεύουν από φλεβική θρόμβωση, λαμβάνοντας ρητά υπόψη τα μικτά στοιχεία για τα αιμοπετάλια και τους προθρομβωτικούς μηχανισμούς ειδικούς για ορισμένα συστατικά, όπως η ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων μέσω Hemin που περιγράφεται στη βιβλιογραφία ανασκόπησης[6].
