Эдестин является доминирующим резервным белком семян конопли и часто рассматривается как источник легкоусвояемого белка и биоактивных пептидов после ферментативного гидролиза или желудочно-кишечного переваривания[1–5]. В данном обзоре обобщены представленные данные в различных механистических областях, имеющих отношение к биологии сосудов, с акцентом на потенциальное (прямое или косвенное) применение в флебологии (заболевания вен). Включенная литература наиболее последовательно подтверждает антигипертензивную активность посредством модуляции ренин-ангиотензиновой системы (ингибирование ACE/ренина), антиоксидантные эффекты в химических и клеточных тестах, модуляцию противовоспалительных путей и сосудистые эффекты, связанные с эндотелием/NO, наряду с некоторыми механистическими гиполипидемическими действиями на моделях гепатоцитов[2, 4, 6–14]. Однако клинические исходы со стороны вен для эдестина или белка семян конопли в предоставленных экстрактах не продемонстрированы; представленные явные доказательства клинических испытаний на венах относятся к экстракту семян конского каштана (HCSE) при хронической венозной недостаточности (CVI), характеризующейся такими симптомами, как боль в ногах и отеки[15]. В целом, доказательная база подтверждает механистическую обоснованность значимости для вен (эндотелиальная функция, окислительный стресс, воспаление и гемостатические пути), но не устанавливает эдестин в качестве научно обоснованного вмешательства в флебологии в рамках представленного корпуса данных[1, 2, 5, 10, 15].
Обзор эдестина
Эдестин описывается как резервный белок семян конопли, преимущественно присутствующий во фракции 11S глобулина (легуминоподобного), и, согласно цитируемой обзорной литературе, составляет примерно 60–80% от общего количества белка семян конопли[1, 3]. Сообщается, что белок семян конопли богат эдестином и альбумином и характеризуется как «легкоусвояемый», обеспечивая при этом незаменимые аминокислоты, включая относительно высокое содержание аргинина и глутаминовой кислоты[2]. Оценки перевариваемости in vivo, обобщенные в представленных материалах, сообщают о перевариваемости белка 85% для цельных семян, 87% для конопляного шрота и 95% для очищенных семян конопли[3], а в дополнительном обзоре указывается перевариваемость белка in vitro, превышающая 88%[4].
Неоднократно показано, что переработка влияет на качество белка и его функциональные свойства. Обрушивание (удаление оболочки) описывается как процесс, снижающий или устраняющий антипитательные вещества, и связано с улучшением перевариваемости[1]. Процессы экстракции и растворимость белков конопли сильно зависят от pH: сообщается о повышенной экстрагируемости при pH до 12 и самой высокой растворимости при pH 11–12, в то время как самая низкая растворимость наблюдается вблизи изоэлектрической точки при pH 4.6 (также используемой для осаждения белка при подготовке изолята)[16]. В различных формах продукта значения перевариваемости могут существенно варьироваться (например, сообщается о 98.5% для изолята белка из ядер конопли против 87.8% для изолята из лузги конопли)[17].
Ферментативный гидролиз занимает центральное место в обосновании концепции «биоактивных пептидов» для эдестина и белков конопли. Условия гидролиза изменяют выход пептидов и степень гидролиза (например, выход панкреатического гидролизата 43% против 16% для пептического гидролизата, а значения степени гидролиза составляют 47.5% для панкреатического против 19.7% для пептического)[18]. Профили эксклюзионной хроматографии в представленных исследованиях гидролизатов относят многие пептиды к диапазону примерно 300–9,560 Da[19, 20]. Что важно для дальнейшей физиологической обоснованности, пептидные фракции, отфильтрованные ниже 3 kDa, использовались в экспериментах по кишечному транспорту, и авторы сообщают, что пептиды в гидролизатах конопли могут преодолевать желудочно-кишечный барьер и при этом сохранять антиоксидантную способность[5].
Методы
Данный обзор представляет собой структурированный нарративный синтез представленных выдержек из доказательств, охватывающих определение состава/перевариваемости, анализы биоактивности пептидов in vitro, клеточные модели окислительного стресса и воспаления, модели сосудистой функции на животных, модели гипертензии на животных и ограниченные результаты по артериальному давлению/биомаркерам у людей[1, 3, 7–11, 19, 21]. Механистические области рассматривались как отдельные кластеры доказательств с упором на конечные точки, предположительно значимые для венозной патологии (окислительный стресс, воспаление, эндотелиальная функция/сигнализация NO и тромбоцитарные/гемостатические процессы), в то время как явно венозные клинические исходы выявлялись при их наличии в представленном материале (например, HCSE при CVI)[10, 11, 15].
Доказательства по областям здоровья
Состав и перевариваемость
В обзорах и экспериментальных исследованиях эдестин последовательно описывается как основной резервный белок семян конопли, на который обычно приходится ~60–80% общего белка семян[1, 3]. Перевариваемость характеризуется как высокая для различных препаратов: перевариваемость in vivo составляет 85% (цельные семена), 87% (конопляный шрот) и 95% (очищенные семена конопли), а перевариваемость in vitro в одном обзоре превышает 88%[3, 4]. Переработка вносит существенный вклад: обрушивание описывается как метод снижения содержания антипитательных веществ и улучшения использования и перевариваемости белка[1], а растворимость/экстрагируемость белка демонстрирует сильную зависимость от pH, что важно для приготовления изолята (более высокая экстрагируемость и растворимость при щелочном pH, самая низкая растворимость вблизи изоэлектрической точки pH 4.6, используемой для осаждения)[16]. Характеристики, связанные с гидролизом, дополнительно указывают на то, что различные ферментные системы обеспечивают разный выход пептидов и степень гидролиза, а пептидные смеси в анализах SEC находятся в диапазоне ~300–9,560 Da[18–20]. Работа на транспортных моделях повышает биологическую обоснованность, сообщая, что пептиды в гидролизатах конопли (включая фракции <3 kDa) могут преодолевать желудочно-кишечный барьер и сохранять антиоксидантную способность[5].
Связь с флебологией: Прямая связь с флебологией является косвенной, но перевариваемость и способность пептидов преодолевать модель кишечного барьера являются необходимым условием для системных сосудистых эффектов, которые могли бы (в принципе) влиять на биологию эндотелия вен[5]. Отдельно в представленных обзорах подчеркивается роль аргинина как предшественника NO, который «расслабляет и расширяет кровеносные сосуды», что поддерживает теоретическую связь с сосудистым тонусом и эндотелиальной функцией, которая может быть актуальна для механизмов заболеваний вен[22].
Антигипертензивная активность и ингибирование ACE/ренина
В многочисленных обзорах описываются антигипертензивные эффекты гидролизованных белков семян конопли, приписываемые ингибированию ACE и ренина[2, 6], а в дополнительных программных заявлениях на уровне обзоров отмечается, что пептиды конопли ингибируют ACE для поддержания регуляции артериального давления и что в процессе пищеварения могут образовываться антигипертензивные биоактивные пептиды[1, 4]. Исследования пептидов и фракций in vitro предоставляют оценки активности для ACE-ингибирующих пептидов, полученных из эдестина: для пептидов GVLY, LGV и RVR сообщаются значения ACE IC50 0.44 ± 0.02 mg/mL, 0.28 ± 0.02 mg/mL и 0.23 ± 0.02 mg/mL соответственно, и эти пептиды описываются как продукты гидролиза эдестина; напротив, IEE описывается как почти неактивный (20.5% ингибирования при самой высокой протестированной концентрации)[23]. В дополнительных работах in vitro сообщается об ингибировании ACE смесями пептидов при фиксированной концентрации 1 mg/mL (57.5% для S, 15.7% для M и 32.4% для T)[24], а фракционирование/гидролиз побочных продуктов конопляного белка, как сообщается, повышает ACE-ингибирующую активность (например, гидролизат Alcalase с IC50 80 mg/L и ультрафильтрованные фракции около 72 mg/L в цитируемом исследовании)[25]. Сообщается, что фракционирование панкреатического гидролизата позволяет получить фракцию с ингибированием ACE 84.9% при 1.0 mg/mL и IC50 0.54 mg/mL, в то время как нефракционированный гидролизат достигал ингибирования ACE 44.8% при 1.1 mg/mL[26].
Доказательства in vivo включают результаты на спонтанно гипертензивных крысах, обобщенные в обзорах как снижение артериального давления и уменьшение активности ACE в плазме после введения гидролизата белка семян конопли[7], наряду с сообщаемым снижением концентрации ренина в плазме и активности ACE при кормлении белком семян конопли в цитируемых доклинических резюме[27]. Доказательства на людях в представленных выдержках включают описание двойного слепого рандомизированного перекрестного исследования с участием 35 взрослых с легкой гипертензией, оценивающего белки и пептиды семян конопли[28]; сообщаемые результаты показывают, что прием как белков, так и пептидов семян конопли снижал 24-часовое систолическое и диастолическое артериальное давление и уменьшал активность ACE в плазме, с дополнительными изменениями, включая биомаркеры, связанные с NO, в цитируемом отчете[8, 28].
Связь с флебологией: Связь с флебологией скорее механистически смежная, чем основанная на конечных точках вен, так как представленные доказательства подчеркивают модуляцию ACE/ренина и сопутствующие изменения NO, а не такие исходы, как симптомы CVI или венозная гемодинамика[2, 4, 7, 8]. В том же отчете о гипертензии у людей отмечается, что оба вида лечения снижали активность ACE и ренина и повышали уровень NO в плазме по сравнению с казеином, что имеет отношение к эндотелиальной функции и сосудистому тонусу, которые могли бы гипотетически влиять на патофизиологию вен[8].
Антиоксидантные эффекты
Антиоксидантная активность в представленных доказательствах подтверждается в первую очередь химическими анализами in vitro и клеточными моделями окислительного стресса. В одном исследовании сообщается о статистически значимой разнице, указывающей на то, что гидролизаты обладают более высокой антиоксидантной активностью, чем белки[29], а в другом отчете описывается «мощная, прямая антиоксидантная активность» гидролизатов конопли, оцененная с помощью тестов DPPH, TEAC, FRAP и ORAC[9]. Параметры гидролиза представляются важными: самая сильная антиоксидантная активность зарегистрирована для образцов с самой высокой степенью гидролиза (9%), а гидролизаты, полученные с помощью панкреатина, на основе сравнений характеризуются как более сильные антиоксиданты, чем гидролизаты, полученные с помощью Alcalase[30]. В моделях окислительного стресса HepG2 сообщается, что пептиды H2 и H3 снижают уровень ROS, перекисное окисление липидов и продукцию NO, а также модулируют пути Nrf-2 и iNOS при стимуляции[10], а специфический пептид H3 (IGFLIIWV) описывается как обеспечивающий антиоксидантную активность через модуляцию Nrf-2/iNOS со снижением уровня индуцированных H2O2 ROS, NO и перекисного окисления липидов[31]. Также сообщается об изменениях антиоксидантной защиты in vivo у спонтанно гипертензивных крыс, где включение в рацион препарата, родственного конопле (HMH), повышало уровни SOD и CAT в плазме и снижало уровни TPx[32]. Характеристики «структура-активность» обсуждаются в литературе по гидролизатам, включая утверждение о том, что C-концевой Tyr в малых пептидах (AY, VY, TY и LLY) имеет решающее значение для антиоксидантной активности[25].
Связь с флебологией: Значимость для флебологии является косвенной, но биологически обоснованной, так как венозные расстройства включают эндотелиальную дисфункцию и окислительный стресс, а некоторые пептиды, полученные из конопли, снижают уровни ROS и перекисное окисление липидов, модулируя пути Nrf-2/iNOS в моделях клеточного стресса[10, 31]. Дополнительный механистический контекст приводится в обзорном заявлении о том, что индукция HO-1, как было показано, защищает от эндотелиальной дисфункции и окислительного стресса, что позиционирует антиоксидантные пути как релевантные для сосудов, даже если венозные конечные точки в данных выдержках не измерялись[22].
Противовоспалительные и иммуномодулирующие эффекты
Доказательства противовоспалительного действия в представленных выдержках в основном получены в ходе работ на клеточных моделях и описаний биоактивности конопляного белка на уровне обзоров. В одном из обзоров отмечается, что белок конопли содержит биоактивные пептиды, высвобождаемые при гидролизе, которые проявляют противовоспалительную активность наряду с антиоксидантной и антигипертензивной активностью[4], а в другом обзоре указывается на противовоспалительные свойства пептидов конопли посредством модуляции ключевых клеточных путей[4]. В модели клеток BV-2, стимулированных LPS, воздействие LPS повышало экспрессию мРНК, связанной с инфламмасомой (Asc), по сравнению с необработанным контролем, что указывает на воспалительную активацию в этой системе[11]. В том же исследовании сообщается о поляризации в сторону противовоспалительного фенотипа M2 в клеточной модели и описывается снижение экспрессии IL-6 и TNF-α при лечении, включающем гидролизаты, а также повышение маркера M2 (Arg1) после специфических сравнений в результатах, приведенных на рисунках[11]. В нерецензируемом веб-источнике утверждается, что эдестин исследуется на предмет потенциальных противовоспалительных и иммуномодулирующих способностей, что согласуется с более широким противовоспалительным контекстом, но не является доказательством клинической эффективности[33].
Связь с флебологией
Эти данные механистически близки к флебологии, поскольку заболевания вен включают воспалительную активацию и эндотелиальную дисфункцию, а представленные результаты на клеточных моделях указывают на противовоспалительную поляризацию и модуляцию экспрессии воспалительных генов в системах, стимулированных LPS[11]. Тем не менее, в предоставленных выдержках не представлены венозные клинические конечные точки для эдестина/белка семян конопли в этой области, поэтому связь с флебологией остается на уровне формирования гипотез, а не продемонстрированной эффективности[33].
Эндотелиальная и сосудистая функция
Данные по физиологии сосудов у животных (крысы Цукер с ожирением) указывают на то, что семена конопли улучшали эндотелий-зависимую релаксацию: ослабленный релаксантный ответ, индуцированный ацетилхолином, улучшался под действием семян конопли, но не конопляного масла, а ацетилхолин-индуцированная релаксация усиливалась в 1.21 раза при использовании семян конопли (HS), но не конопляного масла (HO), согласно цитируемому анализу[14, 21]. Та же экспериментальная схема также сообщает об изменениях в сосудистой реактивности, включая усиление сокращения, индуцированного норадреналином, в группах HO и HS, а также сдвиги в релаксантных ответах на модуляторы калиевых каналов (ответ на пинацидил сдвинулся вправо; ответ на NS1619 заметно усилился как при HO, так и при HS)[14, 21]. Механистический контекст в представленных обзорах подчеркивает, что аргинин является предшественником NO и что NO расслабляет и расширяет кровеносные сосуды, поддерживая связь на уровне путей между нутритивным составом конопли и эндотелиальной функцией[7]. В исследовании гипертензии у людей потребление HSP+ приводило к повышению уровня NO в плазме по сравнению с казеином, а HSP (по сравнению с казеином) снижал активность ACE и концентрацию ренина в плазме и повышал концентрацию NO в плазме, что согласует изменения эндотелиальных биомаркеров с модуляцией RAAS[8].
Связь с флебологией: Венозные расстройства имеют общие патофизиологические черты с более широкой эндотелиальной дисфункцией и измененной вазоактивной сигнализацией, и представленные данные демонстрируют повышение уровня биомаркеров, связанных с NO, и улучшение эндотелий-зависимой релаксации на моделях животных, что механистически значимо, даже несмотря на то, что специфические для вен исходы в этих выдержках не измерялись[8, 14, 21]. Дополнительный контекст активации эндотелия получен из обзора, в котором отмечается, что β-ситостерол может снижать уровень молекул эндотелиальной адгезии (VCAM-1 и ICAM-1) в экспериментальных моделях, что актуально для механизмов воспаления эндотелия, потенциально общих для артериальных и венозных заболеваний[6].
Гиполипидемические и липид-регулирующие механизмы
Наиболее убедительные гиполипидемические доказательства в представленном наборе являются механистическими и полученными на клеточном уровне. Многочисленные исследования in vitro сообщают о дозозависимом ингибировании активности ГМГ-КоА-редуктазы (HMGCoAR) препаратами пептидов, полученных из конопли, включая количественные значения ингибирования в различных концентрациях до 80.0% ингибирования при 1.0 mg/mL в одном исследовании[12, 34]. Дополнительные механистические данные сообщают о повышении экспрессии SREBP2 (зрелой формы), усилении фосфорилирования AMPK, увеличении поглощения LDL и повышении уровней белка LDLR после обработки пептидами конопли в моделях гепатоцитов[13, 35]. Сообщается, что специфический пептид H3 ингибирует HMGCoAR с IC50 56.5 ± 0.9 μM и повышает уровни зрелого SREBP-2 и мембранно-локализованных белков LDLR с соответствующим увеличением функциональной абсорбции LDL клетками HepG2[36]. Данные о липидных исходах in vivo неоднозначны в исследованиях на животных и людях, включая снижение общего холестерина и HDL (без изменения TG) в одном сравнении на крысах и снижение HDL и TG при использовании конопляного масла в другом, а также клиническое испытание на людях, в котором не было обнаружено значимых изменений TC, HDL-C, LDL-C или TG в плазме после вмешательства с семенами конопли, но сообщалось о снижении отношения TC:HDL в другом контексте при добавлении масла[14, 37].
Связь с флебологией: Регуляция липидов может иметь значение для активации эндотелия и воспаления, и представленные данные включают обзорное утверждение о том, что фитостеролоподобные соединения могут конкурировать с холестерином за абсорбцию и что β-ситостерол снижал экспрессию молекул эндотелиальной адгезии в экспериментальных моделях, предлагая механистический мост через пути воспаления эндотелия, а не через венозные конечные точки[6, 7]. Однако представленные гиполипидемические результаты не измеряют напрямую венозные клинические исходы или конечные точки венозного тромбоза, поэтому значимость для флебологии в данном наборе данных остается косвенной[37].
Антитромботические эффекты и данные, связанные с тромбоцитами
Доказательства, связанные с тромбоцитами и тромбозом, в представленных выдержках неоднозначны и, по-видимому, зависят от конкретных компонентов. В одном из обзоров отмечаются противоречивые результаты исследований на животных в отношении влияния семян конопли на агрегацию тромбоцитов и тромбоз[6]. Тот же обзор противопоставляет этому гемин (описанный как компонент семян конопли), индуцирующий активацию тромбоцитов и тромбоз, в том числе через сигнализацию CLEC-2 в тромбоцитах и с сопутствующими маркерами активации, такими как повышение уровня P-селектина, активация GPIIb/IIIa и экспозиция фосфатидилсерина[6]. В диетических моделях в одном отчете описывается, что добавление семян конопли в рацион крыс повышало общее содержание ПНЖК (PUFAs) в плазме и значительно ингибировало агрегацию тромбоцитов с более низкой скоростью агрегации[37], в то время как другая модель гиперхолестеринемии у кроликов, как описывается, демонстрирует нормализацию значений агрегации тромбоцитов при добавлении 10% семян конопли, что частично приписывается повышению уровня гамма-линоленовой кислоты в плазме[37]. Напротив, в отчете об исследовании на здоровых людях не было обнаружено изменений в агрегации тромбоцитов, стимулированной коллагеном или тромбином, при приеме масла семян конопли[37].
Связь с флебологией: Риск венозного тромбоза актуален для флебологии, но представленные данные не устанавливают четкого суммарного антитромботического эффекта белков семян конопли или пептидов, производных эдестина, в различных контекстах, учитывая сообщаемую противоречивость и наличие протромбоцитарных механизмов для гемина[6]. Результаты диетического ингибирования/нормализации в моделях на животных предполагают возможные антиагрегантные эффекты потребления семян конопли при определенных условиях, в то время как отсутствие эффекта на агрегацию у здоровых людей и протромботический механизм гемина подчеркивают неопределенность и важность фракционно-специфической характеристики для любого применения, связанного с венозным тромбозом[37].
Венозные и флебологические исходы
Доказательства венозных клинических исходов, явно представленные в выдержках, относятся к экстракту семян конского каштана (HCSE), а не к эдестину или белку семян конопли. Цитируемые данные сообщают об улучшении признаков и симптомов, связанных с CVI, при использовании HCSE по сравнению с плацебо[15], включая сообщаемое значительное уменьшение боли в ногах и уменьшение отеков в многочисленных испытаниях (в том числе в четырех испытаниях со статистически значимым уменьшением отека), а также уменьшение окружности щиколотки и икры в нескольких исследованиях[15]. Тот же источник описывает нежелательные явления как обычно легкие и редкие и делает вывод, что имеющиеся данные свидетельствуют о том, что HCSE является эффективным и безопасным средством краткосрочного лечения CVI[15].
Связь с флебологией: Эти результаты по HCSE служат примером того, как выглядят прямые флебологические конечные точки в контролируемых испытаниях (исходы по боли, отекам и окружности конечностей), но не являются доказательством эффективности самого эдестина[15]. Напротив, доказательства по эдестину/белку семян конопли в представленном наборе подчеркивают механизмы, смежные с сосудистыми (ингибирование ACE/ренина, изменения NO, антиоксидантная и противовоспалительная активность), которые могут мотивировать проведение гипотетических тестов с фокусом на вены, а не поддерживать клиническое использование при заболеваниях вен в настоящее время[2, 8, 10, 11].
Другие результаты, значимые для здоровья
Несколько дополнительных результатов подтверждают широкую кардиометаболическую обоснованность без предоставления венозных клинических конечных точек. Ферментативные гидролизаты семян конопли описываются в обзорном заявлении как эффективные антиоксидантные и антигипертензивные средства в тестах in vitro и in vivo[2]. Структурная характеристика описывает эдестин как гексамер, состоящий из кислых и основных субъединиц, связанных дисульфидными связями, и сообщает об отношениях Arg/Lys для эдестинов (5.27, 5.32 и 4.00), которые выше, чем у сои или казеина, и, как предполагается, поддерживают создание пищевых формул, способствующих здоровью сердечно-сосудистой системы[38]. Ферментированный экстракт белка семян конопли ингибировал пролиферацию клеток HCT116 со статистической значимостью, и авторы приписывают этот эффект образованию биоактивных пептидов из эдестина[39]. Доказательства также содержат явное предостережение о переносе данных: в работах по пептидам отмечается, что биодоступность некоторых пептидов подтверждена у людей или крыс, но указывается, что для понимания физиологической значимости требуются исследования in vivo[40].
Связь с флебологией: Эти дополнительные результаты вносят вклад в механистическую обоснованность главным образом через сердечно-сосудистые пути и пути окислительного стресса, а не через прямые венозные конечные точки, и поэтому служат прежде всего обоснованием для целевых исследований вен, а не клиническим руководством в флебологии[2, 38, 40].
Флебологический синтез
Представленные доказательства указывают на то, что венозные клинические исходы могут быть улучшены с помощью некоторых вмешательств, не связанных с эдестином (например, HCSE, улучшающий симптомы CVI, включая боль в ногах и отеки, и поддерживающий вывод об эффективности и краткосрочной безопасности при специализированном венозном показании)[15]. Для сравнения, доказательства по эдестину/белку семян конопли в представленных выдержках сосредоточены на механистических областях, которые гипотетически могут иметь значение при заболеваниях вен, в частности, на ингибировании ACE/ренина с изменениями артериального давления и биомаркеров, эндотелиальной сигнализации, связанной с NO, а также на модуляции окислительного стресса и путей воспаления в клеточных моделях[2, 7, 8, 10, 11].
Чтобы сделать механистическую связь явной, доказательства включают: (i) антигипертензивное обоснование на основе ингибирования ACE/ренина и связанных с ним эффектов на АД в исследованиях на животных и людях[2, 7, 8, 28], (ii) повышение уровня NO, сопровождающее вмешательства с конопляным белком у людей, и улучшение эндотелий-зависимой релаксации в сосудистых исследованиях на животных с семенами конопли[8, 14, 21], и (iii) антиоксидантные и противовоспалительные клеточные эффекты, включая снижение уровня ROS, перекисного окисления липидов и модуляцию путей Nrf-2/iNOS и паттернов воспалительной поляризации при стрессовой стимуляции[10, 11, 31]. Эти конвергентные механизмы согласуются с общими путями сосудистой и эндотелиальной дисфункции, которые могли бы, в принципе, иметь отношение к воспалению венозной стенки, активации венозного эндотелия и риску тромбоза, оставаясь при этом непроверенными с точки зрения венозной клинической эффективности в представленных доказательствах, ориентированных на эдестин[6, 10].
Обсуждение
В различных механистических областях наиболее внутренне согласованными сигналами для богатых эдестином белков конопли является то, что переваривание и ферментативный гидролиз порождают пептиды с измеримой биоактивностью и что эти пептиды могут сохранять функцию in vitro и (в ограниченных случаях) после моделирования транспорта через кишечный барьер[5, 18, 19, 29]. Ингибирование ACE подтверждается на нескольких уровнях, включая пептидные последовательности, производные эдестина, с количественными значениями, ингибирование на уровне фракций и изменения биомаркеров артериального давления/RAAS in vivo и в небольшом рандомизированном перекрестном исследовании гипертензии[8, 23, 26]. Антиоксидантные и противовоспалительные сигналы подтверждаются в основном химическими анализами и клеточными моделями, в которых пептидные фракции снижают показатели стресса, связанные с ROS/NO, и модулируют Nrf-2/iNOS и воспалительные фенотипы в условиях стимуляции[9–11, 31]. Данные по эндотелиальной функции включают улучшение ацетилхолин-опосредованной релаксации при использовании семян конопли на модели животных и повышение уровня NO при вмешательствах у людей, что в совокупности предполагает сосудистую биоактивность, выходящую за рамки только снижения АД[8, 14, 21].
Для флебологии ключевым интерпретационным ограничением является то, что представленные прямые венозные клинические данные относятся к HCSE, а не к эдестину, а представленные данные по эдестину/белку семян конопли носят в основном механистический или кардиометаболический характер, а не являются испытаниями с венозными конечными точками[2, 15]. Таким образом, любое применение эдестина во флебологии должно рассматриваться как основанное на гипотезах: нацеленное на венозные конечные точки, аналогичные тем, которые используются в испытаниях при CVI (боль, отек, окружность конечностей и другие объективные показатели), при одновременном использовании механистических биомаркеров, уже применяемых в литературе по гипертензии/эндотелию (ACE, ренин и NO в плазме), и конечных точек окислительного стресса в соответствующих типах сосудистых клеток[8, 10, 15].
Ограничения
Основным ограничением представленных доказательств является то, что большая часть работ по биоактивности является доклинической или механистической (химические анализы, клеточные модели, исследования фракционирования пептидов), что ограничивает клиническую экстраполяцию на заболевания вен[9, 10, 25]. Даже там, где существуют доказательства на людях, они сосредоточены на гипертензии и биомаркерах (24-часовое АД, активность ACE/ренина и NO), а не на венозных конечных точках, что ограничивает прямую трансляционную значимость для флебологии[8]. Набор данных также подчеркивает неопределенность в отношении физиологической значимости и переноса биоактивности пептидов, с явными утверждениями о том, что для подтверждения предполагаемой биоактивности требуются исследования in vivo, несмотря на некоторые доказательства биодоступности у людей или крыс[40]. Наконец, данные, связанные с тромбоцитами/тромбозом, разнонаправленны и включают специфические для компонентов протромботические механизмы (гемин) наряду с результатами диетических исследований на животных и людях, которые варьируются от ингибированной агрегации до отсутствия изменений, что затрудняет вывод о риске венозного тромбоза без более специфичных для фракций клинических испытаний[6, 37].
Выводы и приоритеты исследований
Представленные доказательства подтверждают, что богатый эдестином белок семян конопли является высокоусвояемым источником белка, способным генерировать пептидные смеси, способные проходить через кишечный барьер в модельной системе и обладающие измеримой биоактивностью in vitro и in vivo, в частности ингибированием ACE, антиоксидантной активностью и модуляцией воспаления[1–3, 5, 11, 29]. Наиболее клинически близкие представленные доказательства относятся к снижению артериального давления и изменениям биомаркеров RAAS/NO при легкой гипертензии, а не к венозным исходам, в то время как явные доказательства венозной эффективности в предоставленных выдержках продемонстрированы для HCSE при CVI, а не для эдестина[8, 15].
Будущие направления исследований, непосредственно мотивированные представленными доказательствами, включают следующее, каждое из которых призвано преобразовать механистическую обоснованность в венозно-релевантные доказательства:
- Клинические испытания с венозными конечными точками при CVI с использованием результатов, аналогичных литературе по HCSE (боль в ногах, отек и окружность конечностей), но с тестированием богатого эдестином белка семян конопли или определенных пептидных препаратов[15].
- Модели клеток венозного эндотелия и венозной стенки, оценивающие конечные точки окислительного стресса и воспалительной сигнализации, модуляция которых уже была показана в других клеточных системах (например, ROS, перекисное окисление липидов, показатели, связанные с Nrf-2/iNOS, и паттерны воспалительной поляризации при стрессовой стимуляции), с использованием пептидов с продемонстрированной клеточной активностью, таких как H3 (IGFLIIWV)[10, 11, 31].
- Фармакокинетические исследования и исследования биодоступности, количественно определяющие, какие пептиды, производные эдестина, достигают кровотока после приема внутрь, на основе данных о кишечном транспорте и прямого призыва к валидации физиологической значимости in vivo[5, 40].
- Механистические исследования венозной гемодинамики с интеграцией панелей биомаркеров RAAS/NO (ACE, ренин, NO в плазме), уже используемых в работах по гипертензии, чтобы проверить, изменяются ли эти пути у людей с заболеваниями вен, получающих препараты на основе эдестина[8].
- Оценки, ориентированные на безопасность, в популяциях с риском венозного тромбоза, с явным учетом неоднозначных данных по тромбоцитам и специфических для компонентов протромботических механизмов, таких как активация тромбоцитов, опосредованная гемином, описанная в обзорной литературе[6].
