Επιτελική σύνοψη
Στο σύνολο της παρεχόμενης βιβλιογραφίας, η fisetin και η quercetin εμφανίζονται επανειλημμένα ως βιοενεργά φλαβονοειδή των οποίων η αποτελεσματικότητα σε πραγματικές συνθήκες περιορίζεται από την περιορισμένη λόγω της μορφοποίησης έκθεση, με πολλαπλές πηγές να περιγράφουν ρητά τη χαμηλή υδατοδιαλυτότητα και τη χαμηλή μετρήσιμη βιοδιαθεσιμότητα για συμβατικά σκευάσματα ή διαλύματα/εναιωρήματα.[1–4] Πολλαπλές προσεγγίσεις βασισμένες σε νανο- και λιπιδικά συστήματα (λιποσώματα, νανολιποσώματα, πολυμερή μικκύλια, νανοεναιωρήματα, νανογαλακτώματα, nanocochleates, SNEDDS) παρουσιάζονται ως πρακτικές στρατηγικές για τη βελτίωση της συστηματικής έκθεσης ή/και της κινητικής απορρόφησης, συχνά με σημαντικά ποσοτικά οφέλη στο AUC ή τη σχετική βιοδιαθεσιμότητα.[3–9] Το ισχυρότερο φαρμακοκινητικό σήμα σε ανθρώπους στο σύνολο δεδομένων είναι ένα υβριδικό σύστημα fisetin μικκυλίων σε υδρογέλη (FF-20), το οποίο αύξησε το AUC0–12h της fisetin 26.9-πλάσια και τη Cmax από 9.97 ng/mL σε 238.2 ng/mL σε σύγκριση με έναν μη μορφοποιημένο συγκριτικό παράγοντα, ενώ παράλληλα διεύρυνε το χρονικό παράθυρο κατά το οποίο η fisetin ήταν ανιχνεύσιμη στο πλάσμα.[4]
Σενολυτικό σκεπτικό
Στο πλαίσιο αυτού του σύνολου δεδομένων, η fisetin παρουσιάζεται ρητά ως σενοθεραπευτικό ή σενολυτικό φλαβονοειδές σε πολλαπλές πηγές, συμπεριλαμβανομένης μιας μελέτης που επέλεξε τη fisetin ειδικά ως ένα «καλά μελετημένο σενοθεραπευτικό φάρμακο» για δοκιμή σε λιποσώματα και μιας αναφοράς ανασκόπησης ότι η fisetin έχει «σενολυτική δράση».[10, 11] Προκλινικά in vivo στοιχεία που αναφέρονται στα παρεχόμενα αποσπάσματα δηλώνουν ότι, μεταξύ δέκα φυσικών φλαβονοειδών που δοκιμάστηκαν in vivo, η fisetin αναφέρθηκε ως «η πιο ισχυρή σενολυτική ένωση», μειώνοντας τους δείκτες γήρανσης σε προγηροειδή και γηρασμένα ποντίκια.[12] Ωστόσο, το μοναδικό πείραμα άμεσου μοντέλου κυτταρικής γήρανσης που περιλαμβάνεται στο σύνολο δεδομένων (κυτταρική γήρανση επαγόμενη από doxorubicin σε κύτταρα A549 και WI38) δεν διαπίστωσε επιλεκτική σενόλυση για την ελεύθερη fisetin ή τα φορτωμένα με fisetin λιποσώματα σε αναλύσεις βιωσιμότητας, αν και παρατηρήθηκε σενομορφική τροποποίηση των SASP κυτοκινών IL-6 και IL-8 μέσω ELISA.[10]
Στρατηγικές λιποσωμικής ενθυλάκωσης
Η λιποσωμική fisetin αντιπροσωπεύεται από πολλαπλές προσεγγίσεις παρασκευής και χαρακτηρισμού, συμπεριλαμβανομένης μιας μεθόδου λεπτής στοιβάδας / λεπτής μεμβράνης με χρήση καθορισμένων φωσφολιπιδίων και χοληστερόλης, καθώς και μιας πλατφόρμας νανολιποσωμάτων εξάτμισης λεπτής μεμβράνης με προαιρετική επικάλυψη υαλουρονικού οξέος για σταθερότητα και αποτελέσματα μικκυλιοποίησης στη φάση της πέψης.[10, 13] Σε μία in vitro μελέτη κυτταρικής γήρανσης, τα λιποσώματα παρασκευάστηκαν με ανάμειξη DOPC, DSPE και χοληστερόλης σε οργανικό διαλύτη, σχηματίζοντας λιπιδική μεμβράνη, επανυδατώνοντας σε ρυθμιστικό διάλυμα HEPES και εξωθώντας μέσω μεμβρανών πολυανθρακικού έως τα 100 nm για τη λήψη ομοιόμορφων λιποσωμάτων.[10] Αυτά τα λιποσώματα εμφάνισαν μέση τιμή Z-average 115.9 ± 0.9 nm (PDI 0.155 ± 0.004) και ζ-potential −20.3 ± 0.6 mV όταν ήταν κενά, ενώ η ενθυλάκωση της fisetin μείωσε το μέγεθος στα 95.1 ± 1.0 nm (PDI 0.178 ± 0.008) και μετέβαλε το ζ-potential στα −11.6 ± 1.2 mV, με αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης 13.68%.[10]
Ένα ξεχωριστό σύστημα νανολιποσωμάτων χρησιμοποίησε λεκιθίνη και fisetin σε αναλογία μάζας 25:1 με συγκέντρωση fisetin 0.8 mg/mL, το οποίο παρήχθη με εξάτμιση λεπτής μεμβράνης και υπερήχους (2 min στα 40 W/cm²), αποδίδοντας ορθογώνια νανολιποσώματα μεγέθους ~80 nm με PDI περίπου 0.3.[13] Η επικάλυψη υαλουρονικού οξέος (HA) παρασκευάστηκε με διάλυση του HA σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών και ανάμειξη με νανολιποσώματα σε αναλογία όγκου 1:10 με ανάδευση κατά τη διάρκεια της νύχτας, και το μοριακό βάρος του HA επηρέασε την αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης (90–95% στα 3/35/90–100 kDa, μειούμενη σε 79% στα 150–250 kDa και 74% στα 1000–1500 kDa).[13]
Πολυμερή και αυτοσυναρμολογούμενα μικκύλια
Τα πολυμερή μικκύλια περιγράφονται ρητά στο σύνολο δεδομένων ως δομές πυρήνα/κελύφους νανοκλίμακας που σχηματίζονται από αμφίφιλα συμπολυμερή κατά συστάδες, και πολλαπλά συστήματα μικκυλίων quercetin παρέχουν ποσοτικές βελτιώσεις στο από του στόματος PK.[2, 5, 7] Σε επίμυες, ένα μικκύλιο quercetin από MPEG-b-PLLA (παρασκευασμένο με ενυδάτωση λεπτής μεμβράνης) είχε μέγεθος σωματιδίων 88.5 ± 2.6 nm με PDI 0.13 ± 0.04, αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης 82.5 ± 2.1% και zeta potential −8.72 ± 1.03 mV.[7] Αυτό το μικκύλιο αύξησε το AUC0–∞ από 4633.71 ± 557.67 h·ng/mL (υδατικό εναιώρημα) σε 41677.10 ± 4573.95 h·ng/mL και αναφέρθηκε ρητά ως 9-πλάσια αύξηση στη σχετική από του στόματος βιοδιαθεσιμότητα, με υψηλότερη Cmax (1920.83 ± 250.14 ng/mL έναντι 628.67 ± 64.66 ng/mL) και καθυστερημένη Tmax (7.3 ± 1.6 h έναντι 3.0 ± 1.1 h).[7]
Μια δεύτερη προσέγγιση μικκυλίων quercetin χρησιμοποίησε μικκύλια Soluplus παρασκευασμένα με τροποποιημένη διασπορά μεμβράνης (soluplus plus F127), στην οποία μια θεωρητική φόρτιση φαρμάκου 7% παρήγαγε μέγεθος σωματιδίων 79.00 ± 2.24 nm με PDI 0.154 ± 0.044, αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης 95.91% ± 4.05% και zeta potential −17.10 ± 2.30 mV.[2] Σε σκύλους beagle, αυτά τα μικκύλια παρέτειναν την ανιχνευσιμότητα της quercetin από τις 24 h (ελεύθερο φάρμακο) στις 48 h (μικκύλιο) και αύξησαν τη Cmax από 5.24 μγ·mL−1 σε 7.56 μγ·mL−1, ενώ ανέφεραν χρόνο ημιζωής 2.19-πλάσιο σε σύγκριση με την καθαρή quercetin.[2]
Πλατφόρμες στερεών λιπιδίων και νανοσωματιδίων
Πέρα από τα μικκύλια και τα λιποσώματα, το σύνολο δεδομένων περιλαμβάνει πολλαπλές πλατφόρμες νανοσωματιδίων που εκτείνονται σε πολυμερή νανοσωματίδια (PLGA), πρωτεϊνικά νανοσωματίδια (βασισμένα σε BSA), νανοσωματίδια ιοντικής πηκτωματοποίησης χιτοζάνης και νανοεναιωρήματα/νανοκρυστάλλους, το καθένα με λεπτομερή στοιχεία μεγέθους και ενθυλάκωσης.[1, 14–16] Νανοσωματίδια PLGA για τη fisetin αναπτύχθηκαν για αξιολόγηση με προσανατολισμό στην ενδοφλέβια χορήγηση, με μια ενδεικτική φόρμουλα (NP4) να αναφέρεται με μέσο μέγεθος σωματιδίων ~330 nm, ζ-potential −7.2 mV, PDI 0.25, αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης 83.58% και φόρτιση φαρμάκου 13.93%.[17] Ένα δεύτερο σύστημα νανοσωματιδίων PLGA για τη fisetin (FST-NP) ανέφερε μέσο μέγεθος 187.9 nm, PDI 0.121, ζ-potential −29.2 mV και αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης 79.3%, και παρήγαγε 4.9×, 3.2× και 2.3× υψηλότερη διαπερατότητα από το εναιώρημα σε ένα μοντέλο αναστραμμένου εντερικού σάκου σε δωδεκαδάκτυλο/νήστιδα/ειλεό.[15]
Τα στοχευμένα σε φυλλικό οξύ νανοσωματίδια fisetin (FFANPs) αναφέρθηκαν ως μονοδιασπαρμένα σφαιρικά σωματίδια 150 nm με PDI 0.117 και υψηλή αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης (92.36% ± 3.84) με χωρητικότητα φόρτισης 8.39% ± 3.04, υποστηρίζοντας ένα πρότυπο στόχευσης υποδοχέων αντί για ένα πρότυπο από του στόματος έκθεσης στο πλαίσιο του παρεχόμενου αποσπάσματος.[14] Τα νανοσωματίδια fisetin ιοντικής πηκτωματοποίησης χιτοζάνης/TPP (FNPs) είχαν μέσο μέγεθος 363.1 ± 17.2 nm και ζ-potential +17.7 ± 0.1 mV, με αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης 78.79 ± 7.7% και χωρητικότητα φόρτισης 37.46 ± 6.6%.[1]
Αυτογαλακτωματοποιούμενα συστήματα και συστήματα νανογαλακτωμάτων
Το σύνολο δεδομένων περιγράφει τόσο τις έννοιες SNEDDS σε επίπεδο ορισμού όσο και συγκεκριμένα συστήματα νανογαλακτωμάτων με in vivo αποτελέσματα PK για τη fisetin, δίνοντας έμφαση στην κινητική απορρόφησης που καθοδηγείται από τη φόρμουλα και στην αποτελεσματικότητα της δόσης σε μοντέλα νόσου.[5, 6] Για τη fisetin, μια βελτιστοποιημένη φόρμουλα νανογαλακτώματος (nanoemulsion 9) αποτελούνταν από Miglyol 812 N (10%), Labrasol (10%), Tween 80 (2.5%), Lipoid E80 (1.2%), γλυκερόλη (2.25%), NaOH (0.1N) έως pH 7 και νερό έως 100%, με διάμετρο νανοσωματιδίων 146 ± 3 nm και πολύ χαμηλό PDI 0.015 που αναφέρθηκε για το σκεύασμα που περιείχε Miglyol.[6] Η ίδια οικογένεια νανογαλακτωμάτων χαρακτηρίστηκε επίσης ότι έχει διάμετρο σταγονιδίων 153 ± 2 nm, αρνητικό ζ-potential −28.4 ± 0.6 mV και PDI 0.129, και το νανογαλάκτωμα αναφέρθηκε ως σταθερό στους 4 °C για 30 ημέρες με διαχωρισμό φάσεων στους 20 °C.[6]
Φαρμακοκινητικά, η ενδοφλέβια χορήγηση αυτού του νανογαλακτώματος fisetin στα 13 mg/kg αναφέρθηκε ότι δεν παρουσίασε σημαντική διαφορά στη συστηματική έκθεση σε σύγκριση με την ελεύθερη fisetin, ενώ η ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση παρήγαγε 24-πλάσια αύξηση στη σχετική βιοδιαθεσιμότητα σε σύγκριση με την ελεύθερη fisetin, η οποία αποδίδεται στην ταχύτερη απορρόφηση, όπως αντανακλάται από τον μικρότερο μέσο χρόνο απορρόφησης (MAT 1.97 h έναντι 5.98 h).[6]
Για την quercetin, μια μελέτη SNEDDS περιέγραψε μια βελτιστοποιημένη φόρμουλα αυτονανογαλακτωματοποίησης χρησιμοποιώντας τριακετίνη ως ελαιώδη φάση, Tween 20 ως επιφανειοδραστικό και αιθανόλη ως συν-επιφανειοδραστικό, με μέγεθος σωματιδίων NE4 11.96 nm και αναφερόμενη υψηλή περιεκτικότητα σε φάρμακο (~97.98% έως 100.88%).[18]
Ποσοτικά οφέλη βιοδιαθεσιμότητας
Η βιβλιογραφία που παρατίθεται εδώ υποστηρίζει ένα σταθερό μοτίβο: τα συστήματα χορήγησης νανο-/λιπιδίων μπορούν να μεταβάλουν την έκθεση κατά πολλαπλάσια επίπεδα σε σύγκριση με τα συμβατικά διαλύματα, εναιωρήματα ή μη μορφοποιημένους συγκριτικούς παράγοντες, με τις σχετικές αυξήσεις να αναφέρονται απευθείας σε πολλαπλές ανεξάρτητες μελέτες και ανασκοπήσεις.[3–5, 7–9] Ο παρακάτω πίνακας ενοποιεί τα αναφερόμενα πολλαπλάσια οφέλη και τα βασικά καταληκτικά σημεία PK ακριβώς όπως αναφέρονται στις πηγές, χρησιμοποιώντας τη σχετική βιοδιαθεσιμότητα βάσει AUC όπου είναι διαθέσιμη.
| Φλαβονοειδές | Σύστημα | Μοντέλο | Κύριο ποσοτικό όφελος | Αναφερόμενες λεπτομέρειες PK |
|---|---|---|---|---|
| Fisetin | Υβριδικό σύστημα FENUMAT μικκυλίων σε υδρογέλη (FF-20) | Υγιείς εθελοντές (εφάπαξ δόση) | AUC0–12h 26.9-πλάσια υψηλότερο έναντι UF[4] | Cmax 238.2 ng/mL (FF-20) έναντι 9.97 ng/mL (UF); Tmax 1.24 h έναντι 0.88 h; t1/2 1.51 h έναντι 1.14 h; fisetin ανιχνεύσιμη έως και 8 h έναντι 2 h[4] |
| Fisetin | Νανογαλάκτωμα | Ποντίκια (ενδοπεριτοναϊκή) | 24-πλάσια υψηλότερη σχετική βιοδιαθεσιμότητα έναντι ελεύθερης fisetin[6] | Ταχύτερη απορρόφηση (MAT 1.97 h έναντι 5.98 h); παρόμοια έκθεση έναντι της ελεύθερης μορφής για i.v. χορήγηση (συμπίπτουσες καμπύλες, παρόμοια Cmax/AUC/t1/2)[6] |
| Fisetin | Nanocochleates (σύνοψη ανασκόπησης) | In vivo (η οδός προσδιορίζεται σε πλαίσιο παρατεταμένης αποδέσμευσης) | Βιοδιαθεσιμότητα βελτιωμένη έως και 141 φορές[5] | Αναφέρεται ως παρατεταμένη αποδέσμευση από το παρασκευασμένο σύμπλοκο[5] |
| Fisetin | Λιποσωμικό σύστημα (σύνοψη ανασκόπησης) | In vivo (ενδοπεριτοναϊκή) | Βιοδιαθεσιμότητα βελτιωμένη 47 φορές[5] | Η οδός προσδιορίζεται ως ενδοπεριτοναϊκή έγχυση[5] |
| Quercetin | Μικκύλιο MPEG-b-PLLA | SD επίμυες (από του στόματος) | Σχετική από του στόματος βιοδιαθεσιμότητα 9-πλάσια έναντι υδατικού εναιωρήματος (βάσει AUC)[7] | AUC0–∞ 41677.10 ± 4573.95 έναντι 4633.71 ± 557.67 h·ng/mL; Cmax 1920.83 ± 250.14 έναντι 628.67 ± 64.66 ng/mL; Tmax 7.3 ± 1.6 έναντι 3.0 ± 1.1 h[7] |
| Quercetin | Υγρή μήτρα μικκυλίων LipoMicel | Υγιείς εθελοντές (διασταυρούμενη) | 8-πλάσια αύξηση AUC και 9-πλάσια αύξηση Cmax έναντι ελεύθερης quercetin[8] | Cmax 182.85 ng/mL σε Tmax 0.5 h; AUC για το φυτόσωμα ελαφρώς υψηλότερο από το LipoMicel στην ίδια έκθεση μελέτης[8] |
| Quercetin | Νανοσωματίδια καζεΐνης με HP-β-CD | Wistar επίμυες (από του στόματος) | Σχετική από του στόματος βιοδιαθεσιμότητα κοντά στο 37% (εννέα φορές υψηλότερη από το διάλυμα ελέγχου); διάλυμα ελέγχου από του στόματος περίπου 4% βιοδιαθεσιμότητα[3] | Επίπεδα στο πλάσμα παρατηρήθηκαν έως και 72 h για το Q-HPCD-NP; AUC 61 μg·h/mL ~10-πλάσια υψηλότερο από το διάλυμα από του στόματος[3] |
| Quercetin | Νανοεναιωρήματα με σταθεροποιητές και μεταβολικούς αναστολείς | SD επίμυες (από του στόματος) | Απόλυτη βιοδιαθεσιμότητα αυξημένη έως και 23.58% έναντι 3.61% για το υδατικό εναιώρημα (υψηλότερη ομάδα SPC-Pip-Que-NSps)[9] | Οι αυξήσεις του AUC0–∞ αναφέρονται ως 6.5× (SPC-Pip) και 4.3× (TPGS) έναντι του εναιωρήματος στο κείμενο με τις παρεχόμενες τιμές AUC[9] |
| Quercetin | Αυτοσταθεροποιούμενο γαλάκτωμα Pickering νανοκρυστάλλων | SD επίμυες (από του στόματος) | AUC0–t αυξημένο κατά 2.76× έναντι χονδρόκοκκης σκόνης και κατά 1.38× έναντι νανοκρυστάλλων[19] | Tmax συντομευμένος σε 1.75 ± 1.26 h έναντι 3.33 ± 1.63 h (χονδρόκοκκη) και 2.96 ± 0.17 h (NC); Cmax 6.06 μg·mL−1 (NSSPE) έναντι χονδρόκοκκης σκόνης (αναφέρεται σχέση 2.41×)[19] |
Περιορισμοί πρώτης διόδου και απορρόφησης
Αν και το σύνολο δεδομένων δεν ποσοτικοποιεί άμεσα τις οδούς ηπατικού μεταβολισμού, αρκετές μελέτες καταδεικνύουν λειτουργικά ότι η φόρμουλα μπορεί να ελέγξει τη διαδικασία και τη χρονική πορεία της απορρόφησης, συμπεριλαμβανομένης της ταχύτερης απορρόφησης (μικρότερος MAT) για το ενδοπεριτοναϊκά χορηγούμενο νανογαλάκτωμα fisetin και της παρατεταμένης ανιχνευσιμότητας για το ανθρώπινο FF-20 σε σύγκριση με έναν μη μορφοποιημένο συγκριτικό παράγοντα.[4, 6] Για την quercetin, πολλαπλοί από του στόματος νανοφορείς παρατείνουν τη συστηματική παραμονή, συμπεριλαμβανομένων των νανοσωματιδίων καζεΐνης που διατήρησαν μετρήσιμα επίπεδα στο πλάσμα έως και 72 h (έναντι 24 h για την κατάσταση νανοσωματιδίων χωρίς κυκλοδεξτρίνη) και των μικκυλίων Soluplus που επέκτειναν την ανίχνευση στις 48 h σε σύγκριση με 24 h για το ελεύθερο φάρμακο σε σκύλους.[2, 3] Τα δεδομένα δείχνουν επίσης ότι οι νανοφορείς μπορούν να μεταβάλουν τον Tmax προς οποιαδήποτε κατεύθυνση ανάλογα με τη δομή του συστήματος, όπως καθυστερημένο Tmax σε μικκύλια quercetin από MPEG-b-PLLA (7.3 h έναντι 3.0 h) και συντομευμένο Tmax στο Pickering γαλάκτωμα quercetin (1.75 h έναντι 3.33 h).[7, 19]
Αναλυτική επικύρωση
Το σύνολο δεδομένων παρέχει εκτεταμένα στοιχεία ότι η ποσοτική αξιολόγηση των νανοσκευασμάτων φλαβονοειδών βασίζεται σε μεγάλο βαθμό στην υγρή χρωματογραφία (HPLC/UPLC) και στο LC-MS/MS, με πρόσθετη χρήση μεθόδων απορρόφησης UV-Vis και φθορισμού για τον χαρακτηρισμό της φόρμουλας και τις δοκιμασίες προσδιορισμού περιεχομένου.[1, 4, 7, 9, 10, 13] Στη φαρμακοκινητική της fisetin σε ανθρώπους για το FF-20, η fisetin και ο μεταβολίτης της geraldol ποσοτικοποιήθηκαν με χρήση UPLC-ESI-MS/MS (QTRAP) σε λειτουργία MRM αρνητικών ιόντων μετά από εκχύλιση με ακετονιτρίλιο και διήθηση, και η περιεκτικότητα σε fisetin μετρήθηκε επίσης με επικυρωμένη ανάλυση HPLC.[4] Στη φαρμακοκινητική των μικκυλίων quercetin σε επίμυες, μια μέθοδος LC-MS/MS τριπλού τετραπόλου ποσοτικοποίησε την quercetin μέσω της MRM μετάπτωσης m/z 301.1 → 151.0 με χρωματογραφικό διαχωρισμό σε στήλη Agilent Eclipse-C18 υπό ισοκρατική κινητή φάση νερού/μεθανόλης.[7]
Αρκετές εργασίες μορφοποίησης χρησιμοποίησαν HPLC-UV ή HPLC-DAD για δοκιμασίες περιεχομένου και αποδέσμευσης/διαπερατότητας, συμπεριλαμβανομένης της ποσοτικοποίησης του νανογαλακτώματος fisetin με HPLC αντίστροφης φάσης με ανίχνευση UV στα 360 nm και της ποσοτικοποίησης νανοσωματιδίων καζεΐνης φορτωμένων με quercetin με HPLC-UV με DAD στα 370 nm.[3, 6] Ορισμένα συστήματα χρησιμοποίησαν φασματοφωτομετρία UV-Vis για την εκτίμηση της συγκέντρωσης fisetin ή quercetin (π.χ. fisetin στα 364 nm για νανοσωματίδια χιτοζάνης, quercetin στα 374 nm για διάλυση/περιεκτικότητα φαρμάκου σε SNEDDS), και μια μελέτη λιποσωμικής fisetin ποσοτικοποίησε τη συγκέντρωση fisetin με φασματοφθορισμομετρία με διέγερση/εκπομπή στα 418/486 nm.[1, 10, 18]
Αποτελέσματα κυτταρικής γήρανσης και αποτελεσματικότητας
Τα άμεσα αποτελέσματα σε μοντέλα κυτταρικής γήρανσης στο σύνολο δεδομένων κυριαρχούνται επί του παρόντος από μία in vitro μελέτη που δοκίμασε τη fisetin και τα φορτωμένα με fisetin λιποσώματα σε μοντέλα γήρανσης επαγόμενης από doxorubicin, στην οποία ούτε η ελεύθερη fisetin ούτε τα φορτωμένα με fisetin λιποσώματα προκάλεσαν επιλεκτική απόπτωση των γηρασμένων έναντι των μη γηρασμένων κυττάρων σε αναλύσεις βιωσιμότητας.[10] Η ίδια μελέτη εντούτοις ανέφερε σενομορφική δραστηριότητα, η οποία τεκμηριώνεται από μειωμένη έκκριση IL-6 και IL-8 στα γηρασμένα κύτταρα, και παρουσίασε τόσο την ελεύθερη όσο και τη λιποσωμική fisetin ως ρυθμιστές του SASP μέσω ανάλυσης ELISA.[10] Συμπληρώνοντας αυτά τα ευρήματα, ένας εξωτερικός in vivo σενολυτικός ισχυρισμός που περιλαμβάνεται στα αποσπάσματα αναφέρει ότι η fisetin περιγράφηκε ως το πιο ισχυρό σενολυτικό μεταξύ δέκα φλαβονοειδών που δοκιμάστηκαν in vivo, μειώνοντας τους δείκτες γήρανσης σε προγηροειδή και γηρασμένα ποντίκια, αλλά χωρίς λεπτομέρειες σχετικά με τη φόρμουλα στο παρεχόμενο σύνολο αποσπασμάτων.[12]
Εκτός των καταληκτικών σημείων γήρανσης, πολλαπλά νανοσκευάσματα επιδεικνύουν αποτελεσματικότητα σε μοντέλα νόσου συμβατή με τις βελτιώσεις στην έκθεση, συμπεριλαμβανομένου του νανογαλακτώματος fisetin που πέτυχε 53% μείωση του όγκου του όγκου στα 36.6 mg/kg έναντι μιας ~6-πλάσια υψηλότερης δόσης ελεύθερης fisetin (223 mg/kg) για παρόμοια αναστολή της ανάπτυξης όγκου σε ποντίκια με καρκίνωμα πνεύμονα Lewis.[6] Άλλα παραδείγματα αποτελεσματικότητας εκτός γήρανσης περιλαμβάνουν το νανοεναιώρημα fisetin που βελτιώνει τη μνήμη και τη μάθηση και μειώνει τα επίπεδα MAO-A σε ποντίκια με άνοια επαγόμενη από Aβ(25–35), και τα νανοσωματίδια χιτοζάνης fisetin που μειώνουν το mRNA των φλεγμονωδών κυτοκινών (TNF-α και IL-6) και αυξάνουν την IL-10 σε χονδροκύτταρα προκατεργασμένα με IL-1β, ενώ προλαμβάνουν τη μείωση των μεταγράφων που σχετίζονται με τον χόνδρο (Sox-9 και COL2).[1, 16]
Μεταφραστική εφαρμογή
Το σύνολο δεδομένων περιλαμβάνει πολλαπλές μελέτες βιοδιαθεσιμότητας σε υγιείς εθελοντές για φόρμουλες τόσο fisetin όσο και quercetin, παρέχοντας άμεση μεταφραστική συσχέτιση για τους ισχυρισμούς βελτίωσης της έκθεσης.[4, 8] Για τη fisetin, ένας τυχαιοποιημένος, διπλά τυφλός, διασταυρούμενος σχεδιασμός σε 15 υγιείς εθελοντές συνέκρινε μια δόση 1000 mg UF με 1000 mg FF-20 (που παρείχε 192 mg fisetin) με περίοδο έκπλυσης 10 ημερών, επιτρέποντας την άμεση ενδο-ατομική σύγκριση PK που έδειξε σημαντικά υψηλότερα AUC και Cmax για το FF-20 και μεγαλύτερη διάρκεια ανιχνευσιμότητας για τη fisetin στο πλάσμα.[4] Για την quercetin, μια μη τυφλή διασταυρούμενη μελέτη σε 12 υγιείς ενήλικες εθελοντές αξιολόγησε τρία προϊόντα quercetin και ανέφερε ότι η υγρή μήτρα μικκυλίων LipoMicel πέτυχε 8-πλάσια αύξηση AUC και 9-πλάσια αύξηση Cmax σε σύγκριση με την ελεύθερη quercetin, με Cmax 182.85 ng/mL σε Tmax 0.5 h.[8]
Κενά και μελλοντικές κατευθύνσεις
Εντός των ορίων των παρεχόμενων στοιχείων, ένα βασικό κενό είναι η περιορισμένη σύνδεση των βελτιώσεων της από του στόματος βιοδιαθεσιμότητας με άμεσα καταληκτικά σημεία κάθαρσης της γήρανσης (π.χ. επιλεκτική εξάλειψη των γηρασμένων κυττάρων), καθώς το μοναδικό ρητό πείραμα σε μοντέλο κυτταρικής γήρανσης εδώ έδειξε σενομορφική μείωση του SASP χωρίς σενολυτική επιλεκτικότητα τόσο για την ελεύθερη fisetin όσο και για τα φορτωμένα με fisetin λιποσώματα.[10] Ένα άλλο κενό είναι ότι ορισμένες πλατφόρμες αναφέρουν σημαντικές βελτιώσεις στη βιοπροσβασιμότητα ή τη διαπερατότητα (π.χ. τα νανολιποσώματα fisetin αυξάνουν τη βιοπροσβασιμότητα σε 88.9–92.5% έναντι 7.2% στο χύδην έλαιο, και τα νανοσωματίδια PLGA fisetin αυξάνουν την εντερική διαπερατότητα έως και 4.9× σε μοντέλο αναστραμμένου εντερικού σάκου) χωρίς παράλληλη in vivo συστηματική επιβεβαίωση PK στα αποσπάσματα που παρέχονται εδώ.[13, 15]
Μια πρακτική μελλοντική κατεύθυνση που υποδεικνύεται από τα στοιχεία είναι η στενότερη ενοποίηση του χαρακτηρισμού της φόρμουλας με επικυρωμένες βιοαναλυτικές μετρήσεις, καθώς το σύνολο δεδομένων δείχνει ένα ευρύ μεθοδολογικό φάσμα — από LC-MS/MS και UHPLC-HRMS στην κλινική PK έως δοκιμασίες UV-Vis για ενθυλάκωση ή διάλυση κατά τον προσδιορισμό καταλληλότητας της φόρμουλας — υποδηλώνοντας ότι οι εναρμονισμένες στρατηγικές ποσοτικοποίησης θα μπορούσαν να βελτιώσουν τη συγκρισιμότητα μεταξύ διαφορετικών μελετών.[1, 4, 8, 18] Μια δεύτερη μελλοντική κατεύθυνση είναι η επιλογή φόρμουλας προσαρμοσμένης στα επιθυμητά προφίλ απορρόφησης, επειδή οι μελέτες δείχνουν τόσο καθυστερημένο όσο και επιταχυνόμενο Tmax ανάλογα με τον τύπο του φορέα (π.χ. τα μικκύλια MPEG-b-PLLA καθυστερούν τον Tmax έναντι των γαλακτωμάτων Pickering που τον συντομεύουν), υποδηλώνοντας ότι η «βέλτιστη» φόρμουλα μπορεί να διαφέρει ανάλογα με τον θεραπευτικό στόχο και το παράθυρο δοσολογίας.[7, 19]
