Tiivistelmä
TOTOX 26 omega-3-ravintolisissä: raja-arvon alkuperä, hapettumiskinetiikka, säilytysolosuhteet, toksikologia ja kliiniset tiedot
TOTOX (toisinaan kirjoitettuna ToTox) on omega-3-öljyjen hapettumisindeksi, joka lasketaan kaavalla (tai ), jossa PV kuvaa pääasiassa peroksideja/hydroperoksideja (primäärituotteet) ja AV/p-AV sekundäärisiä hapettumistuotteita (pääasiassa aldehydejä). Sen on tarkoitus toimia synteettisenä mittarina "kokonaishapettumiselle"[1–3].
Luku "26" toimii ensisijaisesti laatuna/spesifikaationa teollisuusstandardeissa ja monografioissa (GOED, Codex CXS 329-2017, USP) pikemminkin kuin toksikologisesti määritettynä turvallisuusrajana; on erikseen korostettu, ettei kalaöljyn hapettumiselle ole asetettu turvallisuuteen perustuvia raja-arvoja[1, 4–6]. Käytännössä hapettuminen voi edetä nopeasti suotuisissa olosuhteissa (happi, valo, lämpötila), eikä "absoluuttista" stabiiliutta ole mahdollista saavuttaa reaalimaailmassa — sitä voidaan vain hidastaa merkittävästi hallitsemalla happi- ja valoaltistusta, lämpötilaa sekä antioksidantteja[7–9].
Toksikologiset ja kliiniset tiedot ovat ristiriitaisia, eivätkä ne tällä hetkellä salli tietyn TOTOX-tason määrittämistä, jossa "omega-3 muuttuu proinflammatoriseksi" ihmisillä; samalla on olemassa mekanistisia perusteita epäillä, että hapettumistuotteet voivat aktivoida tulehdusreittejä oksidatiivisen stressin ja NF-κB:n kautta, ja pitkäaikaista altistumista hapettumistuotteille ravintolisäannoksina pidetään toisinaan mahdolliset haitallisena[10, 11]. Toisaalta viitatussa RCT-tutkimuksessa, jossa käytettiin öljyjä, joiden TOTOX oli noin 45 vs. 11, ei havaittu merkittäviä eroja lipidien peroksidaation, tulehduksen ja oksidatiivisen stressin markkereissa useiden viikkojen aikana[12].
TOTOX 26 -standardin alkuperä
TOTOX-indeksi määritellään PV:n ja AV/p-AV:n painotettuna summana, useimmiten muodossa tai , mikä johtuu suoraan USP-monografiasta ja TOTOX-raportointimenetelmien kuvauksista ravintolisien laatututkimuksissa[1, 2, 13]. Mittauskäytäntöjä kuvaileva katsauskirjallisuus korostaa, että TOTOX on "kokonaishapettumisen" mittari, jota käytetään eltaantumisen osoittamiseen, ja sitä kutsutaan toisinaan "mielivaltaiseksi" siinä mielessä, että se on konstruktio, joka yhdistää kaksi testiä yhdeksi luvuksi[3].
Toimitetuissa lähteissä raja-arvo on vahvasti juurtunut laatustandardeihin, jotka syntyivät vastauksena yhtenäisen standardin puuttumiseen nopeasti kasvavilla kalaöljymarkkinoilla. GOED (Global Organization for EPA and DHA Omega-3s) kuvailee jäsenilleen asetettuja vaatimuksia valmistaa runsasomega-3-rasvahappoisia öljyjä, jotka täyttävät seuraavat rajat: PV < 5 meq O_2/kg, p-AV < 20 ja TOTOX < 26[4]. Lisäksi historialliset aineistot osoittavat, että monografia (joka on peräisin Council for Responsible Nutrition -järjestön, GOED:n edeltäjän, työryhmän työstä) toimii "laadun teollisuusmääritelmänä vuodesta 2002", mikä selittää rajojen teollisen alkuperän ja niiden standardointitarkoituksen[14].
Rinnakkaisesti ToTox/TOTOX = 26 -raja-arvo esiintyy kalaöljyjen Codex Alimentarius -standardissa (CXS 329-2017), jossa todetaan, että ToTox-parametri ("öljyn kokonaishapettuminen") luotiin sellaisten tilanteiden välttämiseksi, joissa primäärisiä ja sekundäärisiä hapettumistuotteita on samanaikaisesti läsnä enimmäismäärinä, ja se asettaa seuraavat rajat: PV ≤ 5, AV ≤ 20 ja ToTox ≤ 26[5]. Vastaavasti USP-monografia tuotteelle "Fish Oil containing Omega-3 Acids" ilmoittaa nimenomaisesti: TOTOX "enintään 26" ja esittää kaavan[1].
Sääntely- ja katsausaineistot korostavat samanaikaisesti, että tietoa kulutukseen tarkoitettujen kalaöljyjen hapettumisparametreista on rajoitetusti, ja EFSA totesi vuoden 2010 lausunnossaan, että tietoa hapettumisasteista (PV ja anisidiiniarvo) ja niihin liittyvistä toksikologisista vaikutuksista ihmisillä puuttuu[8, 15]. Tässä mielessä "26" on ensisijaisesti laadun sekä prosessin/tuoreuden valvonnan spesifikaatio, ei kliinisementitety turvallisuusraja[6, 8].
Alla oleva taulukko kokoaa yhteen merkittävimmät raja-arvot ja niiden asiayhteyden viitatuista lähteistä.
Kuinka nopeasti hapettuminen etenee
Omega-3-happojen hapettuminen on monimutkainen ja monitekijäinen prosessi, joka riippuu sellaisista tekijöistä kuin rasvahappokoostumus, happi- ja valoaltistus, lämpötila, antioksidanttipitoisuus sekä veden ja raskasmetallien läsnäolo (katalyysi)[8]. Lisäksi sitä kuvataan kiihtyvänä ketjureaktiona, jossa pienetkin määrät peroksideja lähtööljyssä tai altistuminen hapettaville olosuhteille voivat vaikuttaa "dramaattisesti" n-3 PUFA-rasvahappojen hapettumisnopeuteen[7].
Karkeana nyrkkisääntönä kemiallisten reaktioiden nopeus kaksinkertaistuu lämpötilan noustessa 10°C, mihin viitataan myös lipidien hapettumisen yhteydessä[17, 18]. Tämä nyrkkisääntö ei korvaa kokeellista dataa, mutta se selittää, miksi kuljetus ja varastointi korkeammissa lämpötiloissa voivat merkittävästi nopeuttaa PV/p-AV/TOTOX-arvojen nousua[17, 19].
Vahva kvantitatiivinen data on peräisin nopeutetuista hapettumiskokeista, joissa vertailtiin erilaisia "hapettumisolosuhteita" ja eri öljyjä. Jatkuvassa happikuplatuksessa (99.5% O_2) 30 päivän ajan tavanomaisessa loisteputkivalaistuksessa ja huoneenlämmössä PV nousi noin 7 meq O_2/kg jo 1 päivän jälkeen ja saavutti arvon 126 meq O_2/kg 30 päivän jälkeen (hoki-kalaöljyllä), minkä ohella TOTOX nousi erittäin korkeaksi (295.7) 30 päivän jälkeen[20]. "Termisessä hapettumisessa" 50°C:ssa pimeässä (ilman säteilyä) mutta ilmakontaktissa, 30 päivän jälkeen PV oli 36.3 ± 1.6 meq O_2/kg (hoki) ja 43.2 ± 2.7 meq O_2/kg (sardelli), ja hokin TOTOX-arvo oli 117.4 (merkittävästi alhaisempi kuin olosuhteissa, joissa oli O_2 + valo)[20].
Samoissa kokeissa raportoitiin "induktioajan" (aika, joka kuluu hapettumiseneston murtumiseen) lyheneminen hapettumisen edetessä: hokiöljyllä se oli alussa noin 3 tuntia, ja 30 päivän jälkeen se laski tasolle < 1 tunti, mikä osoittaa, että hapettumisella on taipumus edetä itsestään, kun antioksidanttien muodostama "puskuri" kuluu loppuun ja reaktiotuotteet kertyvät[21].
Ravintolisissä myös tuotemuodolla ja vuorovaikutuksella kuluttajakäyttäytymisen kanssa on merkitystä. Tutkimuksessa, jossa vertailtiin kapseleita, pureskeltavia muotoja ja siirappeja (säilytettynä huoneenlämmössä ja pimeässä), enimmäisarvot säilytysjakson lopussa olivat merkittävästi korkeammat siirapeissa (PV jopa 44.6 meq/kg öljyä; TOTOX jopa 96.94) kuin kapseleissa (PV jopa 7.62; TOTOX jopa 30.44), ja pureskeltavilla muodoilla oli välitason arvoja (PV jopa 26.14; TOTOX jopa 65.76)[20]. Tästä huolimatta katsaukset korostavat, että pullon toistuva avaaminen, öljyn suurempi kosketupuoli-ala ilman kanssa ja epäasianmukaiset olosuhteet (huoneenlämpö, valo) nopeuttavat PV- ja p-AV-arvojen ja siten TOTOX-arvon nousua[19].
Tätä täydentävät tiedot "tuotteen elinkaaresta": kun viittä tuotetta, joiden viimeiseen käyttöpäivään oli alle vuosi, testattiin uudelleen vuotta myöhemmin, EPA- ja DHA-pitoisuudet eivät muuttuneet merkittävästi, mutta PV, p-AV ja TOTOX nousivat, ja PV ja TOTOX lähestyivät raja-arvoja 5 meq O_2/kg ja 26[9]. Tämä tukee päätelmää, että silloinkin kun EPA/DHA-pitoisuus säilyy vakaana, hapettumislaatu voi heikentyä varastoinnin aikana[9].
Markkinatasolla tehdyissä ravintolisien laatututkimuksissa raportoitiin, että huomattava osa tuotteista ylitti GOED-rajat: 38% ylitti PV = 5 meq O_2/kg -rajan, ja makeuttamattomista ravintolisistä 33% ylitti TOTOX = 26 -rajan[22]. Samanaikaisesti toisessa markkinatutkimuksessa (jossa sovellettiin eri raja-arvoja) raportoitiin, että 96% oli vähemmän rajoittavan TOTOX = 50 -rajan sisällä, mikä osoittaa "vaatimustenvastaisuuden" prosenttiosuuksien riippuvan vahvasti valitusta spesifikaatiosta[23].
Mitä vaadittaisiin, jotta TOTOX-arvo ei nousisi
Käytännössä TOTOX-arvon nousun "pysäyttämistä" (hapettumisen kertymisen estämistä kokonaan) pidetään reaalimaailman olosuhteissa mahdottomana saavuttaa absoluuttisesti; prosessia voidaan kuitenkin hidastaa merkittävästi vähentämällä altistumista hapettumista käynnistäville ja ylläpitäville tekijöille[9]. Koska hapettumisen nopeus ja laajuus riippuvat hapesta, valosta, lämpötilasta, antioksidanteista sekä vedestä ja raskasmetalleista, tehokas strategia edellyttää vaikuttamista useisiin "vipuihin" samanaikaisesti[8, 24].
Ensinnäkin hapen pääsyn minimoiminen on ratkaisevan tärkeää. Teknologiset suositukset ehdottavat öljyjen säilyttämistä ilmattomasti ja pakkauksen/kapselin suojakaasutilan täyttämistä typellä tai argonilla, mikä vähentää O_2:n pääsyä lipidifaasiin[17]. Analyyttisissä menetelmissä, joissa minimoitiin jatkohapettuminen, menetelmiin kuului säilytys "N_2-suojakaasussa" ja nopea analyysi (30 minuutin kuluessa uuttamisesta), mikä osoittaa, että lyhytkin happialtistus voi vaikuttaa tuloksiin ja todellisiin muutoksiin[7].
Toiseksi valon rajoittamisella ja lämpötilan laskemisella on mitattava merkitys. Omega-3-ravintolisät suositellaan säilytettäväksi viileässä ja pimeässä paikassa, ja nestemäiset öljyt mieluiten jääkaapissa, mikä on linjassa lämpötilan nousun aiheuttaman reaktion kiihtymissäännön ja valon hapettumista käynnistävän roolin kanssa[17, 19]. Lisäksi osoitetaan, että lasi- ja muovipakkaukset estävät UV-säteilyä, ja muut materiaalit voivat parantaa suojaa säteilyä vastaan[17].
Kolmanneksi antioksidantit toimivat parhaiten, jos ne lisätään ennen hapettumisen alkamista ja perosyyliradikaalien muodostumista; antioksidanttien lisääminen jo hapettuneisiin öljyihin tarjoaa kuitenkin rajallista hyötyä, kun ketjureaktio on jo käynnissä[17]. Tokoferolit mainitaan tärkeimpinä antioksidantteina, ja myös uutteita (esim. rosmariini), askorbaatteja ja sitruunahappoa käytetään; viimeksi mainittu voi kelatoida hapettumista katalysoivia metalli-ioneja ja viivästyttää tehokkaasti hapettumislaadun heikkenemistä[17].
Neljänneksi annostelumuodolla on merkitystä öljyn happi- ja valokontaktin kannalta. Katsaukset korostavat, että liivatekapselit rajoittavat öljyn ilmatiiviin "sulkemisen" ansiosta lipidien suoraa kosketusta ilmakehän hapen kanssa ja vähentävät valoaltistusta, ja monet tutkimukset osoittavat alhaisempia PV/p-AV/TOTOX-arvoja kapseloiduissa tuotteissa kuin nestemäisissä muodoissa — erityisesti pidemmän varastoinnin jälkeen[19]. Toisaalta jopa kontrolloiduissa "pimeä + huoneenlämpö" -olosuhteissa siirapit osoittivat korkeimpia PV- ja TOTOX-arvoja varastoinnin lopussa, mikä osoittaa, että pakkaus ja käyttö (avaaminen, suojakaasutila, aika) vaikuttavat merkittävästi hapettumisreittiin[20].
Hapettumistuotteiden toksikologia
Omega-3-öljyjen hapettuminen johtaa primääristen ja sekundääristen tuotteiden seoksen muodostumiseen. Viitatuissa lähteissä kuvaillaan, että hapettumisen edetessä hapettumattomien rasvahappojen määrä vähenee ja esiin tulee monimutkainen seos sekundäärisiä tuotteita (mukaan lukien aldehydit ja ketonit) sekä peroksideja ("nestemäiset peroksidit")[24]. Lisäksi korostetaan, että primääriset hydroperoksidit voivat hajota sekundäärisiksi tuotteiksi, mukaan lukien erittäin reaktiiviset ja sytotoksiset 4-hydroxy-2-alkenals, ja lipidiperoksidit voivat hajota aldehydeiksi, kuten 4-hydroxyhexenal (HHE) ja malondialdehyde (MDA)[10, 25].
Toksikologisesti α,β-unsaturated aldehydes (esim. HNE/HOE) ja muut pienimolekyyliset aldehydit ovat erityisen tärkeitä, sillä katsaus osoitti, että HNE ja HOE ovat tämän yhdisteluokan myrkyllisimpiä ja HHE vähiten myrkyllisiä[15]. HNE:lle viitattiin genotoksisuusrajoihin > 0.1 μM ja osittaiseen DNA:n ja proteiinisynteesin estoon alueella 1–20 μM, ja acrolein-yhdisteelle annettiin LD50 nisäkässoluja vastaan = 20 μM sekä merkittävä pesäkkeenmuodostuskyvyn lasku noin 1 μM kohdalla[15]. Nämä arvot osoittavat, että valitut hapettumistuotteet voivat olla biologisesti aktiivisia alhaisina pitoisuuksina solumalleissa, vaikka ne eivät automaattisesti siirry ruokavalion annoksiin ja todelliseen altistukseen[15].
Eläinmallit viittaavat siihen, että hapettuneiden PUFA-rasvahappojen syöttäminen voi aiheuttaa haitallisia vaikutuksia, kuten kasvun estymistä, suolistoärsytystä, maksan ja munuaisten suurenemista, hemolyyttistä anemiaa, E-vitamiinin vähenemistä, lipidiperoksidien lisääntymistä, tulehduksellisia muutoksia maksassa ja kardiomyopatiaa[17]. Samanaikaisesti toksikologiset katsaukset korostivat, että "yleinen makroskooppisten patologisten vaikutusten puuttuminen" erittäin tai lievästi hapettuneiden öljyjen kulutuksen jälkeen voi johtua di- ja polymeerien rajoitetusta imeytymisestä ja peroksidien detoksifikaatiosta glutationista riippuvaisten entsyymien avulla, kun taas pienimolekyyliset aldehydit imeytyvät helpommin ja voivat aiheuttaa patologisia vaikutuksia eläinmalleissa, vaikka on "epätodennäköistä, että ihmiset nauttivat vastaavia määriä" kuin eläinkokeissa näitä vaikutuksia aiheuttaneet annokset ovat[15].
Sääntely- ja katsausaineistot korostavat samanaikaisesti, että tietoa kulutukseen tarkoitettujen kalaöljyjen hapettumisparametreista on rajoitetusti, ja EFSA (2010) totesi nimenomaisesti, että tietoa PV:llä ja anisidiiniarvolla mitatuista kalaöljyn hapettumistasoista sekä niihin liittyvistä toksikologisista vaikutuksista ihmisillä puuttuu[8]. Tässä yhteydessä viitataan myös päätelmään, jonka mukaan "suun kautta annetut voimakkaasti hapettuneet öljyt eivät ole akuutisti myrkyllisiä ihmisille" (Esterbauer 1993), mikä noudattaa yleistä kuvaa: hyvää dataa TOTOX-arvoon perustuvan turvallisuusrajan määrittämiseksi puuttuu, vaikka biologisesti reaktiivisia hapettumistuotteita ja mahdollisia pitkäaikaisvaikutuksia on olemassa[8, 15].
Onko hapettunut omega-3 proinflammatorista vai onko sillä muita haitallisia ominaisuuksia
Mekanistisesti lipidien hapettumistuotteet voivat edistää tulehdusta oksidatiivisen stressin kautta, mikä aktivoi NF-κB-reitin ja lisää proinflammatoristen sytokiinien tuotantoa, ja kalvojen peroksidaatio voi muuttaa kalvojen juoksevuutta, kuljetusprosesseja ja solusignalointia, mitä kuvataan usein merkittäväksi patogeeniseksi mekanismiksi[17, 26]. Tämän mukaisesti eläinmalleissa hapettuneiden PUFA-rasvahappojen syöttämiseen liittyivät tulehdukselliset muutokset maksassa, lipidiperoksidien lisääntyminen sekä useat muut patologiset muutokset[17].
Samanaikaisesti hapettuneen omega-3:n "proinflammatoristen" ominaisuuksien arviointi suoraan kliinisten tutkimusten perusteella on rajoitettua. Toisaalta katsauksissa viitataan hypoteesiin, jonka mukaan hapettumistasojen nousu saattaa rajoittaa n-3-tuotteiden triglyseridejä ja kolesterolia alentavaa vaikutusta ja että pitkäaikainen altistuminen hapettuneille lipideille voi lisätä tulehdusta tai jopa syöpäriskiä, ja myös siihen, että ravintolisissä esiintyvillä annoksilla pitkäaikaisella altistumisella hapettumistuotteille on "todennäköisesti haitallisia vaikutuksia tulehdukseen, oksidatiiviseen stressiin ja lipidimetaboliaan"[11, 13]. Toisaalta viitattuihin tietoihin sisältyy havaintoja siitä, että hapettunut EPA estää kudosviljelymallissa tulehduksellista NF-κB-reittiä, ja kalaöljyn hapettuneet metaboliitit sekä endogeeniset peroksidit (mukaan lukien EPA-johdannaiset) voivat aiheuttaa hyödyllisiä vaikutuksia in vivo, kuten estää NF-κB:tä makrofageissa ja vähentää MCP-1-tasoja[10, 12].
Tämän vuoksi ei ole mahdollista luotettavasti osoittaa yhtä "TOTOX-tasoa, josta alkaen omega-3 muuttuu proinflammatoriseksi" ihmisillä annettujen viittausten perusteella, koska: (1) katsaukset osoittavat kliinisen datan ja vaaranarvioinnin puuttuvan hapettuneiden lipidien kulutuksen osalta, ja (2) monet kliiniset tutkimukset eivät raportoi lainkaan tutkimuksessa käytetyn öljyn hapettumistilaa[10, 13]. Konkreettisin kliininen data, jossa vertailtiin suoraan eri TOTOX-tasoja (esim. 45 vs. 11), ei osoittanut merkittäviä muutoksia peroksidaation, tulehduksen ja oksidatiivisen stressin markkereissa lyhyellä aikavälillä (3–7 viikkoa), mikä viittaa korkeintaan siihen, ettei proinflammatorisuutta näillä tasoilla ja altistusajoilla ole helppo havaita tavanomaisilla markkereilla terveillä yksilöillä[12].
Kliiniset tutkimukset ihmisillä
Tärkeä rajoitus toistuu toimitetuissa aineistoissa: "tähän päivään mennessä" ihmisillä tehdyissä kliinisissä tutkimuksissa ei useinkaan ole raportoitu kokeissa käytetyn öljyn hapettumistilaa, mikä heikentää mahdollisuutta yhdistää tehokkuustuloksia valmisteen hapettumislaatuun[10]. Siksi kysymystenne kannalta hyödyllisimpiä ovat tutkimukset, joissa raportoidaan interventioöljyn PV/AV/TOTOX-arvot[12, 27].
Tutkimukset, joissa hapettumisparametrit on raportoitu
Satunnaistetussa, kaksoissokkoutetussa 7 viikon tutkimuksessa osallistujat jaettiin kolmeen ryhmään: "korkealaatuinen" kalaöljy (n=17), "hapettunut" kalaöljy (n=18) ja runsasöljyhappoinen auringonkukkaöljy (HOSO) -kapselit (n=19)[27]. Kukin ryhmä otti päivittäin 16 kapselia, jotka sisälsivät yhteensä 8 g/d kyseistä öljyä, ja "kokonaishapettumisen arvot (2PV + AV)" olivat 11 (HOSO), 45 (hapettunut FO) ja 11 (korkealaatuinen FO)[27]. Kirjoittajat viittaavat myös aikaisempiin tuloksiin, joissa "hapettuneelle FO:lle" oli ominaista PV=18 ja AV=9, ja "korkealaatuiselle FO:lle" PV=4 ja AV=3, ja tässä aikaisemmassa analyysissä hapettuneen FO:n kulutus ei vaikuttanut oksidatiivisen stressin, tulehduksen, lipidien peroksidaation tai hapettuneen LDL:n tasojen markkereihin 7 viikon jälkeen verrattuna kontrolli- ja korkealaatuiseen öljyyn[27].
Erikseen viitataan "kuuluisaan" RCT-tutkimukseen, jossa 83 henkilöä satunnaistettiin nauttimaan 8 g/d maustamatonta hapettunutta kalaöljyä (TOTOX = 45), hapettumatonta öljyä (TOTOX = 11) ja runsasöljyhappoista auringonkukkaöljyä (TOTOX = 11) 3–7 viikon ajan, eikä merkittäviä muutoksia lipidien peroksidaation, systeemisen tulehduksen tai oksidatiivisen stressin markkereissa havaittu[12]. Tämä tutkimus on ratkaisevan tärkeä, koska se yhdistää TOTOX-arvon suoraan biologisen vaikutuksen vertailuun (vaikkakin edelleen lyhyellä aikavälillä)[12].
Lisäksi viitattiin kokeeseen, johon osallistui terveitä 18–50-vuotiaita henkilöitä ja jossa altistuminen hapettuneelle kalaöljylle, korkealaatuiselle öljylle tai runsasöljyhappoiselle öljylle liittyi merkittäviin, haitallisiin vaikutuksiin lipoproteiinien alafraktioissa 7 viikon jälkeen (verrattuna korkealaatuisen öljyn kulutukseen), mikä viittaa mahdollisiin haitallisiin metabolisiin vaikutuksiin tietyissä päätepisteissä, vaikka tulehdusmarkkerit eivät muuttuisi yksiselitteisesti[12].
Kysymys vuoden 1993 tutkimuksesta
Toimitetut viittaukset eivät sisällä suoraa kuvausta Wanderin ja Dun "vuoden 1993 ihmistutkimuksesta" (eivätkä "tuoreen" vs. "hapettuneen" öljyn määritelmää kyseisessä protokollassa, eivätkä näiden öljyjen PV/AV/TOTOX-parametreja), joten kyseistä tutkimusta koskeviin kysymyksen osiin ei ole mahdollista vastata luotettavasti tämän aineiston perusteella ilman konfabulaation riskiä[10]. Saatavilla olevissa vuoden 1993 fragmenteissa Esterbauer (1993) esiintyy kuitenkin katsauksena/toksikologisena päätelmänä siitä, että suun kautta annetut voimakkaasti hapettuneet öljyt eivät ole akuutisti myrkyllisiä ihmisille, mikä koskee akuuttia turvallisuutta, ei TOTOX=26 -laatuspesifikaatiota tai "tuoreen/hapettuneen" määritelmää Wander/Du-interventiotutkimuksessa[15].
Jos tavoitteena on rekonstruoida "tuoreen vs. hapettuneen" parametrit tietystä vuoden 1993 tutkimuksesta, lähimmät korvikkeet toimitetussa datassa ovat RCT-tutkimukset, joissa öljy parametroidaan "korkealaatuiseksi" vs. "hapettuneeksi" PV/AV- tai TOTOX-arvojen avulla (esim. PV=4 ja AV=3 vs. PV=18 ja AV=9; ja TOTOX=11 vs. 45), koska operatiiviset määritelmät ovat niissä täsmällisiä[12, 27].
Johtopäätökset ja vaikutukset
Ensinnäkin TOTOX = 26 tulisi ymmärtää ensisijaisesti (teollisuuden ja monografioiden) laatuspesifikaationa, joka perustuu PV:n ja AV/p-AV:n yhdistelmään, eikä kliinisesti määritettynä turvallisuusrajana; tämä on linjassa sekä sen kanssa, että kyseinen raja on mukana GOED-, Codex- ja USP-standardeissa, että sen ilmoituksen kanssa, ettei hapettumisrajoja ole asetettu "turvallisuuden perusteella", sekä EFSA:n lausunnon kanssa siitä, ettei hapettumistasojen ja ihmisen toksikologian välisistä yhteyksistä ole tietoa[1, 4–6, 8].
Toiseksi hapettuminen voi kertyä nopeasti suotuisissa olosuhteissa (happi, valo, lämpö), kuten osoittavat nopeutetun hapettumisen tiedot (esim. PV ~+7 meq O_2/kg jo 1 päivän jälkeen ja PV=126 30 päivän jälkeen happikuplatuksella ja valolla) sekä havainnot siitä, että tuotteen todellisessa elinkaaressa PV/p-AV/TOTOX-arvot voivat nousta jopa muuttumattomalla EPA/DHA-pitoisuudella[9, 20].
Kolmanneksi "nousun estäminen" tarkoittaa käytännössä aggressiivista hidastamista: hapen rajoittamista (täyttö N_2/argonilla), valon vähentämistä, lämpötilan laskemista, antioksidanttien oikeaa valintaa ja oikea-aikaista lisäämistä (ennen hapettumisen alkamista) sekä sellaisten muotojen suosimista, jotka rajoittavat ilmakontaktia (kapselit), samalla kun tunnustetaan, ettei absoluuttista stabiiliutta reaalimaailman olosuhteissa voida saavuttaa[9, 17, 19].
Neljänneksi hapettumistuotteiden toksikologia viittaa reaktiivisten aldehydien olemassaoloon, joilla on mitattavaa sytotoksisuutta/genotoksisuutta solumalleissa, mutta samalla puuttuu luotettava data kliinisen "kynnysarvon" määrittämiseksi PV/AV/TOTOX-yksiköissä, ja EFSA viittaa nimenomaisesti näyttöaukkoon liittyvistä vaikutuksista ihmisillä[8, 15].
Viidenneksi kliiniset tiedot hapettuneiden omega-3-rasvahappojen proinflammatorisuudesta ja yleisestä haitallisuudesta ovat ristiriitaisia: mekanismit (NF-κB) ja eläindata viittaavat mahdollisiin haitallisiin vaikutuksiin, mutta RCT-tutkimus TOTOX-arvoilla 45 vs. 11 ei osoittanut lyhyen aikavälin eroja tulehdusmarkkereissa, ja kirjallisuus osoittaa myös valittujen hapettuneiden EPA-metaboliittien kontekstisidonnaisia, toisinaan "anti-inflammatorisia" vaikutuksia kokeellisissa malleissa[10, 12, 17].
Tarvittaessa voin laatia valmistajille/laadunvarmistukselle (QA) erillisen "tarkistuslista"-liitteen (kriittiset prosessi-, pakkaus- ja logistiikkapisteet), joka perustuu ainoastaan edellä mainittuihin suosituksiin (N2/argon, valo, lämpötila, antioksidantit, kapseli vs. nestemäinen muoto) ja tyypillisiin AOCS:n analyysimenetelmiin PV:lle ja p-AV:lle, jotta nämä havainnot voidaan viedä käytännön laadunvalvontaan[2, 17, 19].
