Yönetici Özeti
Omega-3 Takviyelerinde TOTOX 26: Limitin Kökeni, Oksidasyon Kinetiği, Saklama Koşulları, Toksikoloji ve Klinik Veriler
TOTOX (bazen ToTox olarak da yazılır), omega-3 yağları için oksidatif bir kalite indeksi olup (veya ) şeklinde hesaplanır; burada PV birincil olarak peroksitleri/hidroperoksitleri (birincil ürünler), AV/p-AV ise ikincil oksidasyon ürünlerini (esas olarak aldehitler) yansıtır. "Toplam" oksidasyonun sentetik bir ölçüsü olması amaçlanmıştır[1–3].
"26" sayısı, toksikolojik olarak türetilmiş bir güvenlilik eşiğinden ziyade, öncelikle endüstri standartlarında ve monograflarda (GOED, Codex CXS 329-2017, USP) bir kalite limiti/spesifikasyonu olarak işlev görür; güvenliliğe dayalı olarak belirlenmiş hiçbir balık yağı oksidasyon limiti bulunmadığı açıkça vurgulanmaktadır[1, 4–6]. Pratikte oksidasyon, elverişli koşullar altında (oksijen, ışık, sıcaklık) hızla ilerleyebilir ve gerçek yaşamda "mutlak" stabilite elde edilemez; bu süreç yalnızca oksijen, sıcaklık, ışık ve antioksidanların kontrol edilmesiyle önemli ölçüde yavaşlatılabilir[7–9].
Toksikolojik ve klinik veriler tutarsızdır ve şu anda insanlarda "omega-3'ün pro-inflamatuar hale geldiği" belirli bir TOTOX seviyesi tanımlanmasına izin vermemektedir; aynı zamanda, oksidasyon ürünlerinin oksidatif stres ve NF-κB aracılığıyla inflamatuar yolakları aktive edebileceğinden şüphelenmek için mekanistik temeller mevcuttur ve takviye dozlarında oksidasyon ürünlerine uzun süreli maruz kalma bazen potansiyel olarak olumsuz olarak değerlendirilmektedir[10, 11]. Diğer taraftan, TOTOX değeri yaklaşık 45 ile 11 olan yağların karşılaştırıldığı atıfta bulunulan bir RCT, birkaç hafta boyunca lipid peroksidasyonu, inflamasyon ve oksidatif stres belirteçlerinde anlamlı bir fark göstermemiştir[12].
TOTOX 26 Standardının Kökeni
TOTOX indeksi, en yaygın olarak veya şeklinde, PV ve AV/p-AV'nin ağırlıklı toplamı olarak tanımlanır; bu durum doğrudan USP monografından ve takviye kalitesi çalışmalarındaki TOTOX raporlama yöntemlerinin tanımlarından kaynaklanmaktadır[1, 2, 13]. Ölçüm uygulamalarını tanımlayan derleme literatürü, TOTOX'un acılaşmanın (ranyasite) bir göstergesi olarak kullanılan bir "toplam oksidasyon" ölçüsü olduğunu vurgulamakta ve iki testi tek bir sayıda birleştiren bir kurgu olması anlamında bazen "keyfi" olarak adlandırıldığını belirtmektedir[3].
Sunulan kaynaklarda bu limit, hızla büyüyen balık yağı pazarı için tek tip bir standardın bulunmamasına yanıt olarak ortaya çıkan kalite standartlarına güçlü bir şekilde dayanmaktadır. GOED (Global Organization for EPA and DHA Omega-3s), üyelerinin limitleri karşılayan omega-3 açısından zengin yağlar üretmeleri için gereklilikleri tanımlamaktadır: PV < 5 meq O_2/kg, p-AV < 20 ve TOTOX < 26[4]. Ek olarak, tarihsel materyaller, monografın (GOED'in öncülü olan Council for Responsible Nutrition bünyesindeki bir grubun çalışmalarından türetilmiştir) "2002'den beri endüstriyel kalite tanımı" olarak işlev gördüğünü göstermektedir; bu da limitlerin endüstriyel kökenini ve standardizasyon amacını açıklamaktadır[14].
Buna paralel olarak, ToTox/TOTOX = 26 limiti, balık yağları için Codex Alimentarius standardında (CXS 329-2017) yer almaktadır; burada ToTox parametresinin ("yağın toplam oksidasyonu"), birincil ve ikincil oksidasyon ürünlerinin aynı anda maksimum seviyelerde bulunduğu durumlardan kaçınmak için oluşturulduğu belirtilmekte ve şu limitler sunulmaktadır: PV ≤ 5, AV ≤ 20 ve ToTox ≤ 26[5]. Benzer şekilde, "Fish Oil containing Omega-3 Acids" (Omega-3 Asitleri İçeren Balık Yağı) için USP monografı açıkça şunu belirtmektedir: TOTOX "26'dan fazla olmamalıdır" ve formülü sunmaktadır[1].
Düzenleyici ve derleme materyalleri, aynı zamanda, tüketime yönelik balık yağı oksidasyon parametrelerine ilişkin bilgilerin sınırlı olduğunu vurgulamakta ve EFSA, 2010 yılındaki görüşünde, oksidasyon seviyeleri (PV ve anizidin) ile insanlardaki ilişkili toksikolojik etkiler hakkında veri eksikliği olduğunu belirtmektedir[8, 15]. Bu bağlamda "26", klinik olarak türetilmiş bir güvenlilik eşiği değil, öncelikle kalite ve proses/tazelik kontrolü için bir spesifikasyondur[6, 8].
Aşağıdaki tablo, atıfta bulunulan kaynaklardan en belirgin limitleri ve bunların bağlamlarını derlemektedir.
Oksidasyon Ne Kadar Hızlı Artar
Omega-3 oksidasyonu; yağ asidi bileşimi, oksijen ve ışığa maruz kalma, sıcaklık, antioksidan içeriği ile su ve ağır metallerin varlığı (kataliz) gibi faktörlere bağlı, karmaşık ve çok faktörlü bir süreçtir[8]. Ek olarak, kaynak yağdaki az miktardaki peroksitlerin veya oksitleyici koşullara maruz kalmanın bile n-3 PUFA oksidasyon hızını "dramatik" şekilde etkileyebildiği hızlandırılmış bir zincirleme reaksiyon olarak tanımlanmaktadır[7].
Yaklaşık olarak (pratik bir kural olarak), kimyasal reaksiyonların hızı, sıcaklıktaki 10°C'lik bir artışla iki katına çıkar; bu durum lipid oksidasyonu için de belirtilmektedir[17, 18]. Bu kestirimsel yöntem deneysel verilerin yerini almaz, ancak daha yüksek sıcaklıklarda taşıma ve saklamanın PV/p-AV/TOTOX artışını neden önemli ölçüde hızlandırabildiğini açıklar[17, 19].
Kesin kantitatif veriler, farklı "oksidasyon koşullarını" ve farklı yağları karşılaştıran hızlandırılmış oksidasyon deneylerinden elde edilmektedir. Standart floresan aydınlatma altında ve oda sıcaklığında 30 gün boyunca sürekli oksijen kabarcıklandırma (99.5% O_2) koşullarında, PV sadece 1 gün sonra yaklaşık 7 meq O_2/kg artmış ve 30 gün sonra (hoki karaciğeri yağı için) 126 meq O_2/kg değerine ulaşmıştır; buna 30 gün sonra son derece yüksek bir TOTOX = 295.7 değeri eşlik etmiştir[20]. Hava ile temas halinde ancak karanlıkta (radyasyon olmadan) 50°C'de gerçekleştirilen "termal oksidasyon" ile 30 gün sonra PV değeri 36.3 ± 1.6 meq O_2/kg (hoki) ve 43.2 ± 2.7 meq O_2/kg (hamsi) olmuş ve hoki için TOTOX değeri 117.4 olarak kaydedilmiştir (O_2 + ışık içeren koşullara kıyasla önemli ölçüde daha düşüktür)[20].
Aynı deneylerde, oksidasyon ilerledikçe "indüksiyon süresinde" (oksidasyon direncinin aşılması için geçen süre) bir azalma olduğu bildirilmiştir: hoki yağı için başlangıçta yaklaşık 3 saat olan bu süre, 30 gün sonra < 1 saate düşmüştür; bu durum antioksidan "tamponu" tüketildikçe ve reaksiyon ürünleri biriktikçe oksidasyonun kendi kendini besleme eğiliminde olduğunu göstermektedir[21].
Takviyelerde, ürün formu ve tüketici davranışı ile etkileşim de önem taşımaktadır. Kapsüller, çiğnenebilir formlar ve şurupları karşılaştıran bir çalışmada (oda sıcaklığında ve karanlıkta saklanan), saklama süresinin sonundaki maksimum değerler şuruplarda (44.6 meq/kg oil değerine kadar PV; 96.94 değerine kadar TOTOX), kapsüllere kıyasla (7.62 değerine kadar PV; 30.44 değerine kadar TOTOX) önemli ölçüde daha yüksek çıkmış, çiğnenebilir formlar ise ara değerler göstermiştir (26.14 değerine kadar PV; 65.76 değerine kadar TOTOX)[20]. Ne olursa olsun, derlemeler şişenin sık sık açılmasının, yağın hava ile temas eden yüzey alanının daha geniş olmasının ve uygunsuz koşulların (oda sıcaklığı, ışık) PV ve p-AV, dolayısıyla TOTOX artışını hızlandırdığını vurgulamaktadır[19].
Bunu tamamlayan nitelikteki "ürün ömrü" verileri mevcuttur: son kullanma tarihlerine bir yıl kalan beş ürünün gözlemlendiği ve bir yıl sonra yeniden test edildiği bir çalışmada, EPA ve DHA içeriği önemli ölçüde değişmemiş, ancak PV, p-AV ve TOTOX artmış; PV ve TOTOX sırasıyla 5 meq O_2/kg ve 26 limitlerine yaklaşmıştır[9]. Bu durum, EPA/DHA içeriği stabil kalsa bile, saklama sırasında oksidatif kalitenin bozulabileceği sonucunu desteklemektedir[9].
Pazar düzeyinde, takviye kalitesi çalışmaları ürünlerin önemli bir kısmının GOED limitlerini aştığını bildirmiştir: %38'i PV = 5 meq O_2/kg limitini aşmış ve tatlandırılmamış takviyeler arasında %33'ü TOTOX = 26 limitini aşmıştır[22]. Aynı zamanda, başka bir pazar çalışması (farklı bir limit seti için) ürünlerin %96'sının daha az kısıtlayıcı olan TOTOX = 50 limiti dahilinde olduğunu bildirmiş; bu da "uyumsuzluk" yüzdelerinin benimsenen spesifikasyona güçlü bir şekilde bağlı olduğunu göstermiştir[23].
TOTOX Değerinin Artmaması İçin Ne Yapılması Gerekir
Pratikte, gerçek yaşam koşullarında TOTOX artışını "durdurmak" (oksidasyon birikiminin olmaması) mutlak olarak elde edilmesi imkansız bir hedef olarak beyan edilmektedir; ancak süreç, oksidasyonu başlatan ve sürdüren faktörlere maruz kalmanın azaltılmasıyla önemli ölçüde yavaşlatılabilir[9]. Oksidasyon hızı ve derecesi oksijen, ışık, sıcaklık, antioksidanlar ile su ve ağır metallere bağlı olduğundan, etkili bir strateji aynı anda birkaç "kaldıraç" üzerinde hareket etmeyi gerektirir[8, 24].
İlk olarak, oksijen erişimini en aza indirmek kritik öneme sahiptir. Teknolojik öneriler, yağların "havasız" şekilde saklanmasını ve kap/kapsül içindeki tepe boşluğunun azot veya argon ile doldurulmasını önermektedir; bu da lipid fazına O_2 erişimini azaltır[17]. Daha fazla oksidasyonu en aza indiren analitik protokollerde yöntemler arasında, "N_2 battaniyesi" altında saklama ve hızlı analiz (ekstraksiyondan sonraki 30 dakika içinde) yer almaktadır; bu durum, oksijene kısa süreli maruz kalmanın bile sonuçları ve gerçek değişimleri etkileyebileceğini göstermektedir[7].
İkinci olarak, ışığın sınırlandırılması ve sıcaklığın düşürülmesi ölçülebilir bir öneme sahiptir. Omega-3 takviyelerinin serin ve karanlık bir yerde, sıvı yağların ise tercihen buzdolabında saklanması önerilmektedir; bu durum artan sıcaklıkla reaksiyonun hızlanması kuralı ve ışığın oksidasyonu başlatan bir faktör olması rolü ile tutarlıdır[17, 19]. Ayrıca cam ve plastik ambalajların UV ışınlarını engellediği, diğer malzemelerin ise radyasyona karşı korumayı artırabileceği belirtilmektedir[17].
Üçüncü olarak, antioksidanlar en iyi oksidasyon başlamadan ve peroksil radikalleri oluşmadan önce eklendiklerinde işe yararlar; ancak zincirleme reaksiyon zaten başlamışsa, halihazırda oksitlenmiş yağlara antioksidan eklemek sınırlı fayda sağlar[17]. Tokoferoller en önemli antioksidanlar olarak belirtilmekte, ayrıca ekstraktlar (örneğin biberiye), askorbatlar ve sitrik asit de kullanılmaktadır; sitrik asit, oksidasyonu katalize eden metal iyonlarını şelatlayabilir ve oksidatif kalitenin bozulmasını etkili bir şekilde geciktirebilir[17].
Dördüncü olarak, dozaj formu, yağın oksijen ve ışıkla teması açısından önem taşır. Derlemeler, jelatin kapsüllerin yağı hermetik olarak "mühürlemesi" sayesinde lipidlerin atmosferik oksijenle doğrudan temasını sınırladığını ve ışığa maruz kalmayı azalttığını vurgulamaktadır; many çalışmalar, kapsüllenmiş ürünlerde sıvı formlara kıyasla (özellikle daha uzun süreli saklamadan sonra) daha düşük PV/p-AV/TOTOX değerleri gözlemlemektedir[19]. Diğer taraftan, kontrollü "karanlık + oda sıcaklığı" koşullarında bile, şuruplar saklama sonunda en yüksek PV ve TOTOX değerlerini göstermiş; bu da ambalajlama ve kullanımın (açılma, tepe boşluğu, süre) oksidasyon seyrini önemli ölçüde etkilediğini kanıtlamıştır[20].
Oksidasyon Ürünlerinin Toksikolojisi
Omega-3 yağlarının oksidasyonu, birincil ve ikincil ürünlerin bir karışımının oluşmasına yol açar. Atıfta bulunulan kaynaklar, oksidasyon ilerledikçe oksitlenmemiş yağ asitlerinin miktarının azaldığını ve ikincil ürünlerden (aldehitler ve ketonlar dahil) ve peroksitlerden ("sıvı peroksitler") oluşan karmaşık bir karışımın ortaya çıktığını açıklamaktadır[24]. Ayrıca, birincil hidroperoksitlerin, son derece reaktif ve sitotoksik olan 4-hydroxy-2-alkenals dahil olmak üzere ikincil ürünlere ayrışabileceği ve lipid peroksitlerinin 4-hydroxyhexenal (HHE) ve malondialdehyde (MDA) gibi aldehitlere bozunabileceği vurgulanmaktadır[10, 25].
Toksikolojik olarak, α,β-doymamış aldehitler (örneğin HNE/HOE) ve diğer düşük moleküler ağırlıklı aldehitler özellikle önemlidir; zira bir derleme, bu bileşik sınıfında HNE ve HOE'nin en toksik olanlar arasında, HHE'nin ise en az toksik olanlar arasında yer aldığını belirtmiştir[15]. HNE için > 0.1 μM genotoksiklik eşikleri ve 1–20 μM aralığında DNA ve protein sentezinin kısmi inhibisyonu belirtilmiş; akrolein için ise memeli hücrelerine karşı bir LD50 = 20 μM değeri ile yaklaşık 1 μM konsantrasyonda koloni oluşturma yeteneğinde önemli bir düşüş bildirilmiştir[15]. Bu değerler, seçilen oksidasyon ürünlerinin hücresel modellerde düşük konsantrasyonlarda biyolojik olarak aktif olabileceğini göstermektedir; ancak bu durum diyetle alınan dozlara ve gerçek maruziyete otomatik olarak aktarılamaz[15].
Hayvan modelleri, oksitlenmiş PUFA'lar ile beslemenin; büyüme inhibisyonu, bağırsak irritasyonu, karaciğer ve böbrek büyümesi, hemolitik anemi, vitamin E azalması, artan lipid peroksitleri, karaciğerde inflamatuar değişiklikler ve kardiyomiyopati dahil olmak üzere olumsuz etkilere yol açabileceğini düşündürmektedir[17]. Eş zamanlı olarak, toksikolojik derlemeler, yüksek veya hafif derecede oksitlenmiş yağların tüketilmesinden sonraki "genel kaba patolojik etkilerin olmamasının", di- ve polimerlerin sınırlı emiliminden ve peroksitlerin glutatyon bağımlı enzimler tarafından detoksifiye edilmesinden kaynaklanabileceğini; öte yandan düşük moleküler ağırlıklı aldehitlerin daha kolay emildiğini ve hayvan modellerinde patolojik etkilere neden olabildiğini vurgulamaktadır, ancak hayvan çalışmalarında bu etkilere yol açan dozlara benzer miktarların "insanlar tarafından alınması pek olası değildir"[15].
Düzenleyici kurum ve insan risk değerlendirmesi düzeyinde, EFSA (2010), PV ve anizidin ile ölçülen balık yağı oksidasyon seviyeleri ve insanlardaki ilişkili toksikolojik etkiler hakkında bilgi eksikliği olduğunu açıkça belirtmiştir[8]. Bu bağlamda, "oral olarak verilen aşırı oksitlenmiş yağların insanlar için akut olarak toksik olmadığı" (Esterbauer 1993) sonucu da belirtilmektedir ki bu durum genel tabloyla uyumludur: TOTOX değerine dayalı bir güvenlilik eşiği belirlemek için yeterli veri bulunmamakla birlikte, biyolojik olarak reaktif oksidasyon ürünleri ve potansiyel uzun vadeli etkiler mevcuttur[8, 15].
Oksitlenmiş Omega-3 Pro-inflamatuar mıdır Yoksa Başka Olumsuz Özelliklere mi Sahiptir
Mekanistik olarak, lipid oksidasyon ürünleri, NF-κB yolağını aktive eden ve pro-inflamatuar sitokinlerin üretimini artıran oksidatif stres aracılığıyla inflamasyonu teşvik edebilir; ayrıca membran peroksidasyonu membran akışkanlığını, taşınmasını ve hücresel sinyal iletimini değiştirebilir ki bu durum genellikle önemli bir patojenik mekanizma olarak tanımlanır[17, 26]. Buna uygun olarak, hayvan modellerinde, oksitlenmiş PUFA'lar ile besleme, karaciğerdeki inflamatuar değişiklikler, lipid peroksitlerindeki artış ve bir dizi diğer patolojik değişiklik ile ilişkilendirilmiştir[17].
Aynı zamanda, oksitlenmiş omega-3'ün "pro-inflamatuar" özelliklerinin doğrudan klinik çalışmalara dayalı olarak değerlendirilmesi sınırlıdır. Bir yandan derlemeler, oksidasyon seviyelerindeki artışın n-3 ürünlerinin trigliserit ve kolesterol düşürücü etkisini sınırlayabileceği ve oksitlenmiş lipidlere uzun süreli maruz kalmanın inflamasyonu veya kanser riskini bile artırabileceği hipotezine; ayrıca takviyelerde bulunan dozlarda, oksidasyon ürünlerine uzun süreli maruz kalmanın "inflamasyon, oksidatif stres ve lipid metabolizması üzerinde zararlı etkilere sahip olmasının muhtemel olduğu" görüşüne atıfta bulunmaktadır[11, 13]. Diğer yandan, atıfta bulunulan veriler arasında, doku kültürü modelinde oksitlenmiş EPA'nın inflamatuar NF-κB yolağını inhibe ettiğine ilişkin gözlemler yer almakta olup, balık yağının oksitlenmiş metabolitleri ile endojen peroksitler (EPA türevleri dahil), makrofajlarda NF-κB'yi inhibe etmek ve MCP-1'i azaltmak gibi in vivo faydalı etkiler gösterebilmektedir[10, 12].
Sonuç olarak, sunulan atıflara dayanarak insanlarda "omega-3'ün pro-inflamatuar hale geldiği" tek bir "TOTOX seviyesi" belirtmek güvenilir bir şekilde mümkün değildir; çünkü: (1) derlemeler, oksitlenmiş lipidlerin tüketimine yönelik klinik verilerin ve tehlike değerlendirmesinin eksik olduğunu belirtmekte ve (2) birçok klinik çalışma, çalışmada kullanılan yağın oksidatif durumunu hiç bildirmemektedir[10, 13]. Farklı TOTOX seviyelerini doğrudan karşılaştıran en somut klinik veriler (örneğin 45'e karşı 11), kısa vadede (3–7 hafta) peroksidasyon, inflamasyon ve oksidatif stres belirteçlerinde anlamlı değişiklikler göstermemiş; bu durum, bu seviyelerde ve maruz kalma sürelerinde, pro-inflamasyonun sağlıklı bireylerde standart belirteçlerle kolayca yakalanamadığını en fazla düşündürmektedir[12].
İnsanlarda Yapılan Klinik Çalışmalar
Sunulan materyallerde önemli bir sınırlama tekrarlanmaktadır: "bugüne kadar", insan klinik çalışmaları genellikle denemelerde kullanılan yağın oksidatif durumunu bildirmemiştir; bu da etkililik sonuçlarını preparatın oksidatif kalitesiyle ilişkilendirme yeteneğini zayıflatmaktadır[10]. Bu nedenle, sorularınız için en yararlı çalışmalar, müdahale yağı için PV/AV/TOTOX değerlerini bildiren çalışmalardır[12, 27].
Oksidasyon Parametreleri Bildirilen Çalışmalar
Randomize, çift kör, 7 haftalık bir çalışmada katılımcılar üç gruba ayrılmıştır: "yüksek kaliteli" balık yağı (n=17), "oksitlenmiş" balık yağı (n=18) ve yüksek oleik asitli ayçiçek yağı (HOSO) kapsülleri (n=19)[27]. Her grup, ilgili yağdan günde toplam 8 g/d içeren 16 kapsül almış ve "toplam oksidasyon değerleri (2PV + AV)" 11 (HOSO), 45 (oksitlenmiş FO) ve 11 (yüksek kaliteli FO) olarak bulunmuştur[27]. Yazarlar ayrıca, "oksitlenmiş FO"nun PV=18 ve AV=9, "yüksek kaliteli FO"nun ise PV=4 ve AV=3 ile karakterize edildiği daha önceki sonuçlara atıfta bulunmakta ve bu önceki analizde, oksitlenmiş FO tüketiminin kontrol ve yüksek kaliteli yağa kıyasla 7 hafta sonra oksidatif stres, inflamasyon, lipid peroksidasyonu veya oksitlenmiş LDL seviyeleri belirteçlerini etkilemediğini belirtmektedir[27].
Ayrıca, 83 bireyin 3–7 hafta boyunca günde 8 g/d aromasız oksitlenmiş balık yağı (TOTOX = 45), oksitlenmemiş yağ (TOTOX = 11) ve yüksek oleik asitli ayçiçek yağı (TOTOX = 11) tüketmek üzere randomize edildiği "ünlü" RCT'ye atıfta bulunulmakta ve lipid peroksidasyonu, sistemik inflamasyon veya oksidatif stres belirteçlerinde anlamlı bir değişiklik bulunmamıştır[12]. Bu çalışma, TOTOX değerini doğrudan biyolojik etkilerin karşılaştırılmasıyla ilişkilendirdiği için (yine de kısa bir zaman ufkunda olsa da) kritik öneme sahiptir[12].
Ek olarak, 18–50 yaş arası sağlıklı bireylerin katıldığı ve oksitlenmiş balık yağı, yüksek kaliteli yağ veya yüksek oleik asitli yağa maruz kalmanın, 7 hafta sonra lipoprotein alt fraksiyonlarında (yüksek kaliteli yağ tüketimine kıyasla) belirgin, olumsuz etkilerle ilişkilendirildiği bir çalışmaya atıfta bulunulmuş; bu durum, inflamatuar belirteçler net bir şekilde değişmese bile belirli son noktalarda potansiyel olumsuz metabolik etkilere işaret etmektedir[12].
1993 Çalışması Hakkındaki Soru
Sunulan atıflar, Wander ve Du tarafından yapılan "insanlarda yürütülen 1993 çalışmasının" doğrudan bir tanımını (veya bu spesifik protokoldeki "taze" ile "oksitlenmiş" yağ tanımını ya da bu yağlar için PV/AV/TOTOX parametrelerini) içermemektedir; bu nedenle, konfabulasyon (uydurma) riski olmaksızın bu materyale dayanarak o çalışmayla ilgili soruların bir kısmına güvenilir bir şekilde yanıt vermek mümkün değildir[10]. Bununla birlikte, 1993 yılına ait mevcut parçalarda Esterbauer (1993), oral olarak verilen aşırı oksitlenmiş yağların insanlar için akut olarak toksik olmadığı yönünde bir derleme/toksikolojik sonuç olarak görünmektedir ki bu, TOTOX=26 kalite spesifikasyonuna veya Wander/Du müdahale çalışmasındaki "taze/oksitlenmiş" tanımına değil, akut güvenliliğe ilişkindir[15].
Amaç belirli bir 1993 çalışmasından "taze ve oksitlenmiş" parametrelerini yeniden oluşturmaksa, sunulan verilerdeki en yakın alternatifler, yağı PV/AV veya TOTOX değerine göre "yüksek kaliteli" ve "oksitlenmiş" olarak parametrelendiren RCT'lerdir (örneğin PV=4 ve AV=3'e karşı PV=18 ve AV=9; ve TOTOX=11'e karşı 45); çünkü buralardaki operasyonel tanımlar açıktır[12, 27].
Sonuçlar ve Çıkarımlar
İlk olarak, TOTOX = 26, klinik olarak türetilmiş bir güvenlilik eşiği olarak değil, PV ve AV/p-AV kombinasyonuna dayanan, öncelikle bir kalite spesifikasyonu (endüstriyel ve monografik) olarak anlaşılmalıdır; bu durum, hem bu limitin GOED, Codex ve USP'de bulunmasıyla hem de "güvenliliğe dayalı" hiçbir oksidasyon limitinin belirlenmediği beyanıyla ve EFSA'nın oksidasyon seviyelerini insan toksikolojisiyle ilişkilendiren veri eksikliğine ilişkin görüşüyle tutarlıdır[1, 4–6, 8].
İkinci olarak, hızlandırılmış oksidasyon verilerinin (örneğin O_2 kabarcıklandırma ve ışık altında 1 gün sonra PV ~+7 meq O_2/kg ve 30 gün sonra PV=126) ve bir ürünün gerçek yaşam döngüsünde EPA/DHA içeriği değişmeden kalsa bile PV/p-AV/TOTOX değerlerinin artabileceğine dair gözlemlerin gösterdiği gibi, elverişli koşullar altında (oksijen, ışık, ısı) oksidasyon hızla birikebilir[9, 20].
Üçüncü olarak, pratikte "artışı önlemek" agresif bir yavaşlatma anlamına gelir: oksijenin sınırlandırılması (N_2/argon ile doldurma), ışığın azaltılması, sıcaklığın düşürülmesi, antioksidan ilavesinin doğru seçilmesi ve zamanlaması (oksidasyon başlamadan önce) ve hava ile teması sınırlayan formların (kapsüller) tercih edilmesi; ancak gerçek yaşam koşullarında mutlak stabilitenin elde edilemez olduğu kabul edilmelidir[9, 17, 19].
Dördüncü olarak, oksidasyon ürünlerinin toksikolojisi, hücresel modellerde ölçülebilir sitotoksiklik/genotoksiklik gösteren reaktif aldehitlerin varlığına işaret etmekle birlikte, aynı zamanda PV/AV/TOTOX birimlerinde klinik bir "eşik" belirlemek için yeterli veri bulunmamaktadır ve EFSA insanlarda ilişkili etkilere yönelik bir kanıt boşluğuna açıkça işaret etmektedir[8, 15].
Beşinci olarak, oksitlenmiş omega-3'lerin pro-inflamatuar ve genel zararlılığına ilişkin klinik veriler karışıktır: mekanizmalar (NF-κB) ve hayvan verileri potansiyel olumsuz etkilere işaret etmektedir, ancak TOTOX değeri 45 ile 11'i karşılaştıran bir RCT, inflamatuar belirteçlerde kısa vadede hiçbir fark göstermemiştir ve literatür ayrıca deneysel modellerde seçilmiş oksitlenmiş EPA metabolitlerinin bağlamsal, bazen "anti-inflamatuar" etkilerine işaret etmektedir[10, 12, 17].
Talep edilirse, bu bulguları pratik kalite kontrolüne dönüştürmek amacıyla yalnızca yukarıda atıfta bulunulan önerilere (N2/argon, ışık, sıcaklık, antioksidanlar, kapsüle karşı sıvı form) ve PV ile p-AV için tipik AOCS analitik yöntemlerine dayanarak üreticiler/QA için ayrı bir "kontrol listesi" eki (kritik proses, ambalajlama ve lojistik noktaları) hazırlayabilirim[2, 17, 19].
