การเอาชนะความย้อนแย้งของ BCS Class IV ในกลุ่ม Senolytics: การนำส่งฟลาโวนอยด์ที่ไม่ละลายน้ำด้วยระบบ Nano-Micellar เพื่อการกำจัดเซลล์เสื่อมสภาพแบบจำเพาะเจาะจง
บทสรุปสำหรับผู้บริหาร
จากการทบทวนวรรณกรรมที่เกี่ยวข้อง fisetin และ quercetin ปรากฏเป็นฟลาโวนอยด์ที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพซึ่งประสิทธิภาพในการใช้งานจริงถูกจำกัดโดยการได้รับสาร (exposure) ที่ขึ้นอยู่กับสูตรตำรับ โดยแหล่งข้อมูลหลายแห่งระบุอย่างชัดเจนถึงความสามารถในการละลายน้ำที่ต่ำและความพร้อมทางชีวภาพ (bioavailability) ที่วัดได้ในระดับต่ำสำหรับรูปแบบเตรียมการทั่วไปหรือสารละลาย/สารแขวนลอย [1–4] แนวทางที่ใช้เทคโนโลยีนาโนและไขมันเป็นพื้นฐานหลายประการ (liposomes, nanoliposomes, polymeric micelles, nanosuspensions, nanoemulsions, nanocochleates, SNEDDS) ถูกนำเสนอในฐานะกลยุทธ์ที่นำไปใช้ได้จริงเพื่อเพิ่มการได้รับสารในระบบร่างกายและ/หรือจลนศาสตร์การดูดซึม ซึ่งมักจะให้ค่า AUC หรือความพร้อมทางชีวภาพสัมพัทธ์เพิ่มขึ้นในเชิงปริมาณอย่างมีนัยสำคัญ [3–9] ข้อมูลทางเภสัชจลนศาสตร์ในมนุษย์ที่โดดเด่นที่สุดในชุดข้อมูลนี้คือระบบ fisetin แบบไฮบริด micelle-in-hydrogel (FF-20) ซึ่งเพิ่ม AUC0–12h ของ fisetin ถึง 26.9 เท่า และเพิ่ม Cmax จาก 9.97 ng/mL เป็น 238.2 ng/mL เมื่อเทียบกับตัวเปรียบเทียบที่ไม่มีการปรับสูตรตำรับ พร้อมทั้งขยายช่วงเวลาที่สามารถตรวจวัดปริมาณ fisetin ในพลาสม่าได้ [4]
เหตุผลสนับสนุนในการใช้เป็น Senolytic
ในชุดข้อมูลนี้ fisetin ถูกวางกรอบไว้อย่างชัดเจนว่าเป็นฟลาโวนอยด์ประเภท senotherapeutic หรือ senolytic ในแหล่งข้อมูลหลายแห่ง รวมถึงการศึกษาที่เลือก fisetin โดยเฉพาะในฐานะ “ยา senotherapeutic ที่มีการศึกษามาอย่างดี” สำหรับการทดสอบใน liposomes และบทวิจารณ์ที่ระบุว่า fisetin มี “ฤทธิ์ในการสลายเซลล์เสื่อมสภาพ (senolytic effects)” [10, 11] หลักฐานพรีคลินิกในสัตว์ทดลอง (in vivo) ที่อ้างถึงในข้อความระบุว่า ในบรรดาฟลาโวนอยด์จากธรรมชาติสิบชนิดที่ทดสอบ in vivo นั้น fisetin ถูกรายงานว่าเป็น “สารประกอบ senolytic ที่มีประสิทธิภาพสูงสุด” โดยช่วยลดตัวบ่งชี้การเสื่อมสภาพในหนูที่มีภาวะแก่ก่อนวัยและหนูแก่ [12] อย่างไรก็ตาม การทดลองแบบจำลองการเสื่อมสภาพโดยตรงเพียงรายการเดียวที่มีในชุดข้อมูล (การเสื่อมสภาพที่เหนี่ยวนำด้วย doxorubicin ในเซลล์ A549 และ WI38) ไม่พบการสลายเซลล์เสื่อมสภาพแบบเลือกจำเพาะ (selective senolysis) สำหรับ fisetin อิสระหรือ liposomes ที่บรรจุ fisetin ในการทดสอบความอยู่รอดของเซลล์ (viability assays) ในขณะที่ยังคงสังเกตเห็นการปรับเปลี่ยนแบบ senomorphic ของไซโตไกน์ SASP ได้แก่ IL-6 และ IL-8 จากการทดสอบ ELISA [10]
กลยุทธ์การห่อหุ้มด้วย Liposome
Liposomal fisetin นำเสนอผ่านแนวทางการเตรียมและการวิเคราะห์คุณลักษณะหลายรูปแบบ รวมถึงวิธี thin-layer / thin-film โดยใช้ฟอสโฟลิปิดและคอเลสเตอรอลที่กำหนดไว้ เช่นเดียวกับแพลตฟอร์ม nanoliposome แบบ thin-film evaporation ที่มีการเคลือบ hyaluronic-acid เป็นทางเลือกเพื่อความเสถียรและผลลัพธ์ในการเกิด micellarization ในระยะการย่อย [10, 13] ในการศึกษาการเสื่อมสภาพในหลอดทดลอง (in vitro) รายการหนึ่ง liposomes ถูกเตรียมโดยการผสม DOPC, DSPE และคอเลสเตอรอลในตัวทำละลายอินทรีย์ เกิดเป็นฟิล์มไขมัน นำมาทำละลายใหม่ในบัฟเฟอร์ HEPES และรีดผ่านเมมเบรนโพลีคาร์บอเนตจนเหลือขนาด 100 nm เพื่อให้ได้ liposomes ที่สม่ำเสมอ [10] liposomes เหล่านั้นแสดงค่าเฉลี่ย Z-average ที่ 115.9 ± 0.9 nm (PDI 0.155 ± 0.004) และค่า ζ-potential −20.3 ± 0.6 mV เมื่อเป็นว่างเปล่า ในขณะที่การห่อหุ้มด้วย fisetin ช่วยลดขนาดลงเหลือ 95.1 ± 1.0 nm (PDI 0.178 ± 0.008) และเปลี่ยนค่า ζ-potential เป็น −11.6 ± 1.2 mV โดยมีประสิทธิภาพการห่อหุ้มที่ 13.68% [10]
ระบบ nanoliposome อีกระบบหนึ่งใช้เลซิตินและ fisetin ในอัตราส่วนมวล 25:1 โดยมีความเข้มข้นของ fisetin 0.8 mg/mL ผลิตโดยวิธี thin-film evaporation และการใช้คลื่นเสียงความถี่สูง (ultrasonication) (2 นาทีที่ 40 W/cm²) ให้ผลลัพธ์เป็น nanoliposomes รูปทรงสี่เหลี่ยมผืนผ้าขนาด ~80 nm พร้อมค่า PDI ประมาณ 0.3 [13] การเคลือบด้วย hyaluronic acid (HA) เตรียมโดยการละลาย HA ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์และผสมกับ nanoliposomes ในอัตราส่วนปริมาตร 1:10 พร้อมกวนข้ามคืน ซึ่งน้ำหนักโมเลกุลของ HA มีผลต่อประสิทธิภาพการห่อหุ้ม (90–95% ที่ขนาด 3/35/90–100 kDa และลดลงเหลือ 79% ที่ขนาด 150–250 kDa และ 74% ที่ขนาด 1000–1500 kDa) [13]
พอลิเมอร์และไมเซลล์ที่ประกอบตัวได้เอง
Polymeric micelles ถูกอธิบายอย่างชัดเจนในชุดข้อมูลว่าเป็นโครงสร้างประกอบระดับนาโนแบบแกน/เปลือก (core/shell) ที่ก่อตัวขึ้นจาก amphiphilic block copolymers และระบบ quercetin micelle หลายระบบให้ผลการปรับปรุง PK ทางการรับประทานในเชิงปริมาณ [2, 5, 7] ในหนูทดลอง MPEG-b-PLLA quercetin micelle (เตรียมโดยวิธี thin-film hydration) มีขนาดอนุภาค 88.5 ± 2.6 nm พร้อมค่า PDI 0.13 ± 0.04 ประสิทธิภาพการห่อหุ้ม 82.5 ± 2.1% และค่าศักย์ซีต้า (zeta potential) −8.72 ± 1.03 mV [7] ไมเซลล์นี้เพิ่ม AUC0–∞ จาก 4633.71 ± 557.67 h·ng/mL (สารแขวนลอยในน้ำ) เป็น 41677.10 ± 4573.95 h·ng/mL และถูกรายงานอย่างชัดเจนว่ามีความพร้อมทางชีวภาพสัมพัทธ์ทางการรับประทานเพิ่มขึ้น 9 เท่า โดยมีค่า Cmax สูงกว่า (1920.83 ± 250.14 ng/mL เทียบกับ 628.67 ± 64.66 ng/mL) และค่า Tmax ที่ล่าช้าออกไป (7.3 ± 1.6 h เทียบกับ 3.0 ± 1.1 h) [7]
แนวทาง quercetin micelle แบบที่สองใช้ Soluplus micelles ที่เตรียมโดยวิธี film dispersion แบบปรับปรุง (soluplus ร่วมกับ F127) ซึ่งการบรรจุยาตามทฤษฎีที่ 7% ให้ขนาดอนุภาค 79.00 ± 2.24 nm พร้อมค่า PDI 0.154 ± 0.044 ประสิทธิภาพการห่อหุ้ม 95.91% ± 4.05% และค่าศักย์ซีต้า −17.10 ± 2.30 mV [2] ในสุนัขพันธุ์บีเกิล ไมเซลล์เหล่านี้ช่วยขยายระยะเวลาการตรวจพบ quercetin จาก 24 ชั่วโมง (ยาอิสระ) เป็น 48 ชั่วโมง (ไมเซลล์) และเพิ่ม Cmax จาก 5.24 μg·mL−1 เป็น 7.56 μg·mL−1 ในขณะที่รายงานค่าครึ่งชีวิต (half-life) ยาวนานกว่า quercetin บริสุทธิ์ถึง 2.19 เท่า [2]
แพลตฟอร์มไขมันแข็งและอนุภาคนาโน
นอกเหนือจากไมเซลล์และไลโปโซมแล้ว ชุดข้อมูลยังรวมถึงแพลตฟอร์มอนุภาคนาโนหลายรูปแบบซึ่งครอบคลุมถึงอนุภาคนาโนพอลิเมอร์ (PLGA), อนุภาคนาโนโปรตีน (อ้างอิง BSA), อนุภาคนาโนไคโตซานแบบ ionic-gelation และ nanosuspensions/nanocrystals ซึ่งแต่ละแบบมีรายละเอียดขนาดและตัวชี้วัดการห่อหุ้ม [1, 14–16] อนุภาคนาโน PLGA สำหรับ fisetin ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อการประเมินที่เน้นการฉีดเข้าทางหลอดเลือดดำ โดยมีสูตรตัวอย่าง (NP4) ที่รายงานขนาดอนุภาคเฉลี่ยประมาณ ~330 nm, ζ-potential −7.2 mV, PDI 0.25, ประสิทธิภาพการห่อหุ้ม 83.58% และปริมาณการบรรจุยา (drug loading) 13.93% [17] ระบบอนุภาคนาโน PLGA ระบบที่สองสำหรับ fisetin (FST-NP) รายงานขนาดเฉลี่ย 187.9 nm, PDI 0.121, ζ-potential −29.2 mV และประสิทธิภาพการห่อหุ้ม 79.3% และสามารถสร้างการซึมผ่านที่สูงกว่าสารแขวนลอยถึง 4.9 เท่า, 3.2 เท่า และ 2.3 เท่า ในแบบจำลอง everted gut sac ตลอดช่วงลำไส้เล็กส่วน duodenum/jejunum/ileum [15]
Folate-targeted fisetin nanoparticles (FFANPs) ถูกรายงานว่าเป็นอนุภาคทรงกลมที่มีการกระจายตัวเดี่ยวขนาด 150 nm พร้อมค่า PDI 0.117 และประสิทธิภาพการห่อหุ้มสูง (92.36% ± 3.84) โดยมีความสามารถในการบรรจุ 8.39% ± 3.04 ซึ่งสนับสนุนรูปแบบการกำหนดเป้าหมายที่ตัวรับ (receptor-targeting) มากกว่ารูปแบบการได้รับสารทางการรับประทานภายในข้อความที่จัดเตรียมไว้ [14] อนุภาคนาโน fisetin แบบ chitosan/TPP ionic-gelation (FNPs) มีขนาดเฉลี่ย 363.1 ± 17.2 nm และ ζ-potential +17.7 ± 0.1 mV โดยมีประสิทธิภาพการห่อหุ้ม 78.79 ± 7.7% และความสามารถในการบรรจุ 37.46 ± 6.6% [1]
ระบบ Self emulsifying และนาโนอิมัลชัน
ชุดข้อมูลอธิบายทั้งแนวคิด SNEDDS ในระดับคำนิยามและระบบนาโนอิมัลชันที่เป็นรูปธรรมพร้อมผลลัพธ์ PK in vivo สำหรับ fisetin โดยเน้นที่จลนศาสตร์การดูดซึมที่ขับเคลื่อนโดยสูตรตำรับและประสิทธิภาพของขนาดยาในแบบจำลองโรค [5, 6] สำหรับ fisetin สูตรตำรับนาโนอิมัลชันที่เหมาะสมที่สุด (nanoemulsion 9) ประกอบด้วย Miglyol 812 N (10%), Labrasol (10%), Tween 80 (2.5%), Lipoid E80 (1.2%), glycerol (2.25%), NaOH (0.1N) เพื่อปรับ pH เป็น 7 และน้ำจนครบ 100% โดยมีเส้นผ่านศูนย์กลางอนุภาคนาโน 146 ± 3 nm และรายงานค่า PDI ที่ต่ำมากเพียง 0.015 สำหรับการเตรียมที่มีส่วนประกอบของ Miglyol [6] ตระกูลนาโนอิมัลชันเดียวกันนี้ยังได้รับการระบุว่ามีเส้นผ่านศูนย์กลางหยดละออง 153 ± 2 nm, ค่า ζ-potential เป็นลบ −28.4 ± 0.6 mV และ PDI 0.129 โดยรายงานว่านาโนอิมัลชันมีความเสถียรที่ 4 °C เป็นเวลา 30 วัน และเกิดการแยกชั้นที่ 20 °C [6]
ในทางเภสัชจลนศาสตร์ การบริหาร fisetin nanoemulsion ทางหลอดเลือดดำที่ขนาด 13 mg/kg รายงานว่าไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการได้รับสารในระบบร่างกายเมื่อเทียบกับ fisetin อิสระ ในขณะที่การบริหารทางช่องท้องให้ความพร้อมทางชีวภาพสัมพัทธ์เพิ่มขึ้นถึง 24 เท่าเมื่อเทียบกับ fisetin อิสระ ซึ่งอ้างว่าเป็นผลมาจากการดูดซึมที่เร็วขึ้นตามที่สะท้อนจากเวลาเฉลี่ยในการดูดซึมที่สั้นลง (MAT 1.97 h เทียบกับ 5.98 h) [6]
สำหรับ quercetin การศึกษา SNEDDS รายการหนึ่งอธิบายสูตรตำรับ nanoemulsifying ที่เหมาะสมโดยใช้ triacetin เป็นเฟสน้ำมัน, Tween 20 เป็นสารลดแรงตึงผิว และ ethanol เป็นสารลดแรงตึงผิวร่วม โดยมีขนาดอนุภาค NE4 ที่ 11.96 nm และรายงานปริมาณยาสูง (~97.98% ถึง 100.88%) [18]
การเพิ่มขึ้นของความพร้อมทางชีวภาพเชิงปริมาณ
วรรณกรรมที่ตัดตอนมานี้สนับสนุนรูปแบบที่สอดคล้องกัน: ระบบการนำส่งระดับนาโน/ไขมันสามารถเปลี่ยนระดับการได้รับสารได้หลายเท่าเมื่อเทียบกับสารละลายทั่วไป สารแขวนลอย หรือตัวเปรียบเทียบที่ไม่มีการปรับสูตรตำรับ โดยมีการรายงานจำนวนเท่าที่เปลี่ยนแปลงโดยตรงในการศึกษาและบทวิจารณ์อิสระหลายฉบับ [3–5, 7–9] ตารางด้านล่างรวบรวมจำนวนเท่าที่เพิ่มขึ้นที่รายงานและจุดสิ้นสุด PK หลักตามที่ระบุไว้ในแหล่งข้อมูล โดยใช้ความพร้อมทางชีวภาพสัมพัทธ์ตามค่า AUC เมื่อมีข้อมูล
ข้อจำกัดของการผ่านตับครั้งแรกและการดูดซึม
แม้ว่าชุดข้อมูลจะไม่ได้ระบุปริมาณเส้นทางการเผาผลาญที่ตับโดยตรง แต่การศึกษาหลายชิ้นแสดงให้เห็นในทางปฏิบัติว่าสูตรตำรับสามารถควบคุมกระบวนการและระยะเวลาของการดูดซึมได้ รวมถึงการดูดซึมที่เร็วขึ้น (MAT สั้นลง) สำหรับ fisetin nanoemulsion ที่บริหารทางช่องท้อง และการขยายระยะเวลาการตรวจพบสำหรับ FF-20 ในมนุษย์เมื่อเทียบกับตัวเปรียบเทียบที่ไม่มีการปรับสูตรตำรับ [4, 6] สำหรับ quercetin ตัวพานาโนทางการรับประทานหลายชนิดช่วยขยายระยะเวลาการพำนักในระบบร่างกาย รวมถึงอนุภาคนาโนเคซีนที่คงระดับในพลาสม่าที่วัดได้นานถึง 72 ชั่วโมง (เทียบกับ 24 ชั่วโมงสำหรับเงื่อนไขอนุภาคนาโนที่ไม่ใช่ cyclodextrin) และ Soluplus micelles ที่ขยายการตรวจพบเป็น 48 ชั่วโมงเทียบกับ 24 ชั่วโมงสำหรับยาอิสระในสุนัข [2, 3] ข้อมูลยังแสดงให้เห็นว่าตัวพานาโนสามารถเปลี่ยนค่า Tmax ไปในทิศทางใดทิศทางหนึ่งขึ้นอยู่กับสถาปัตยกรรมของระบบ เช่น Tmax ที่ล่าช้าใน MPEG-b-PLLA quercetin micelles (7.3 h เทียบกับ 3.0 h) และ Tmax ที่สั้นลงใน quercetin Pickering emulsion (1.75 h เทียบกับ 3.33 h) [7, 19]
การตรวจสอบความถูกต้องเชิงวิเคราะห์
ชุดข้อมูลให้หลักฐานมากมายว่าการประเมินเชิงปริมาณของสูตรตำรับนาโนฟลาโวนอยด์อาศัยเทคนิค Liquid Chromatography (HPLC/UPLC) และ LC-MS/MS เป็นอย่างมาก โดยมีการใช้ระเบียบวิธี UV-Vis absorbance และฟลูออเรสเซนต์เพิ่มเติมสำหรับการวิเคราะห์คุณลักษณะของสูตรตำรับและการทดสอบปริมาณสาร [1, 4, 7, 9, 10, 13] ในเภสัชจลนศาสตร์ของ fisetin ในมนุษย์สำหรับ FF-20 มีการวัดปริมาณ fisetin และ geraldol ซึ่งเป็นเมตาบอไลต์ของมันโดยใช้ UPLC-ESI-MS/MS (QTRAP) ในโหมด MRM ไอออนลบหลังจากสกัดด้วย acetonitrile และกรอง และมีการวัดปริมาณ fisetin โดยการวิเคราะห์ HPLC ที่ผ่านการตรวจสอบความถูกต้องแล้ว [4] ในเภสัชจลนศาสตร์ของ quercetin micelle ในหนู วิธี triple quadrupole LC-MS/MS ได้วัดปริมาณ quercetin โดยการเปลี่ยนผ่านของ MRM ที่ m/z 301.1 → 151.0 พร้อมการแยกสารด้วยโครมาโตกราฟีบนคอลัมน์ Agilent Eclipse-C18 ภายใต้เฟสเคลื่อนที่ของน้ำ/เมทานอลแบบ isocratic [7]
เอกสารสูตรตำรับหลายฉบับใช้ HPLC-UV หรือ HPLC-DAD สำหรับการทดสอบปริมาณสารและการปลดปล่อย/การซึมผ่าน รวมถึงการวัดปริมาณ fisetin nanoemulsion โดย reversed-phase HPLC พร้อมการตรวจวัดด้วย UV ที่ 360 nm และการวัดปริมาณอนุภาคนาโนเคซีนที่บรรจุ quercetin โดย HPLC-UV พร้อม DAD ที่ 370 nm [3, 6] บางระบบใช้ UV-Vis spectrophotometry สำหรับการประมาณความเข้มข้นของ fisetin หรือ quercetin (เช่น fisetin ที่ 364 nm สำหรับอนุภาคนาโนไคโตซาน; quercetin ที่ 374 nm สำหรับการละลาย/ปริมาณยาของ SNEDDS) และการศึกษา liposomal fisetin รายการหนึ่งได้วัดความเข้มข้นของ fisetin โดย spectrofluorometry ด้วยค่ากระตุ้น/การปลดปล่อย (excitation/emission) ที่ 418/486 nm [1, 10, 18]
ผลลัพธ์ด้านการเสื่อมสภาพและประสิทธิผล
ผลลัพธ์ของแบบจำลองการเสื่อมสภาพโดยตรงในชุดข้อมูลปัจจุบันถูกครอบงำโดยการศึกษาในหลอดทดลองหนึ่งรายการที่ทดสอบ fisetin และ liposomes ที่บรรจุ fisetin ในแบบจำลองการเสื่อมสภาพที่เหนี่ยวนำด้วย doxorubicin ซึ่งทั้ง fisetin อิสระและ liposomes ที่บรรจุ fisetin ไม่ได้ทำให้เกิดการตายของเซลล์ (apoptosis) แบบเลือกจำเพาะต่อเซลล์ที่เสื่อมสภาพเหนือเซลล์ที่ไม่เสื่อมสภาพในการทดสอบความอยู่รอด [10] อย่างไรก็ตาม การศึกษาเดียวกันนั้นรายงานกิจกรรมแบบ senomorphic ซึ่งพิสูจน์ได้จากการลดการหลั่ง IL-6 และ IL-8 ในเซลล์ที่เสื่อมสภาพ และจัดให้ทั้ง fisetin อิสระและแบบไลโปโซมมีการปรับเปลี่ยน SASP จากการวิเคราะห์ด้วย ELISA [10] เพื่อเสริมการค้นพบเหล่านี้ การอ้างสิทธิ์ senolytic in vivo ภายนอกที่รวมอยู่ในข้อความระบุว่า fisetin ถูกรายงานว่าเป็น senolytic ที่มีประสิทธิภาพสูงสุดในบรรดาฟลาโวนอยด์สิบชนิดที่ทดสอบ in vivo โดยช่วยลดตัวบ่งชี้การเสื่อมสภาพในหนูที่มีภาวะแก่ก่อนวัยและหนูแก่ แต่ไม่มีรายละเอียดสูตรตำรับในชุดข้อความที่จัดเตรียมไว้ [12]
นอกเหนือจากจุดสิ้นสุดด้านการเสื่อมสภาพ สูตรตำรับนาโนหลายชนิดแสดงประสิทธิผลในแบบจำลองโรคที่สอดคล้องกับการปรับปรุงการได้รับสาร รวมถึง fisetin nanoemulsion ที่สามารถลดปริมาตรเนื้องอกได้ 53% ที่ขนาด 36.6 mg/kg เทียบกับขนาดยา fisetin อิสระที่สูงกว่าประมาณ 6 เท่า (223 mg/kg) เพื่อการยับยั้งการเติบโตของเนื้องอกที่ใกล้เคียงกันในหนูที่เป็นมะเร็งปอด Lewis lung carcinoma [6] ตัวอย่างประสิทธิผลที่ไม่เกี่ยวข้องกับการเสื่อมสภาพอื่นๆ ได้แก่ fisetin nanosuspension ที่ช่วยปรับปรุงความจำและการเรียนรู้ และลดระดับ MAO-A ในหนูที่เป็นโรคสมองเสื่อมที่เหนี่ยวนำด้วย Aβ(25–35) และอนุภาคนาโนไคโตซาน fisetin ที่ช่วยลด mRNA ของไซโตไกน์ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบ (TNF-α และ IL-6) และเพิ่ม IL-10 ในเซลล์กระดูกอ่อน (chondrocytes) ที่ปรับสภาพด้วย IL-1β ในขณะที่ป้องกันการลดลงของทรานสคริปต์ที่เกี่ยวข้องกับกระดูกอ่อน (Sox-9 และ COL2) [1, 16]
สถานะการนำไปใช้จริง
ชุดข้อมูลรวมถึงการศึกษาความพร้อมทางชีวภาพในอาสาสมัครมนุษย์หลายรายการสำหรับทั้งสูตรตำรับ fisetin และ quercetin ซึ่งให้ความเกี่ยวข้องโดยตรงในการนำไปใช้จริงสำหรับการอ้างสิทธิ์ในการเพิ่มระดับการได้รับสาร [4, 8] สำหรับ fisetin การศึกษาแบบสุ่ม ปิดลับสองทาง และสลับกลุ่ม (randomized, double-blinded, cross-over) ในอาสาสมัครสุขภาพดี 15 คนเปรียบเทียบขนาด 1000 mg ของ UF กับ 1000 mg ของ FF-20 (ซึ่งให้ fisetin 192 mg) โดยมีระยะพัก (washout) 10 วัน ช่วยให้สามารถเปรียบเทียบ PK ภายในบุคคลรายเดิมได้โดยตรง ซึ่งแสดงให้เห็นค่า AUC และ Cmax ที่สูงขึ้นอย่างชัดเจนสำหรับ FF-20 และระยะเวลาที่วัดได้ในพลาสม่ายาวนานขึ้นสำหรับ fisetin [4] สำหรับ quercetin การศึกษาสลับกลุ่มแบบไม่ปิดลับในอาสาสมัครที่เป็นผู้ใหญ่สุขภาพดี 12 คนได้ประเมินผลิตภัณฑ์ quercetin สามชนิดและรายงานว่าเมทริกซ์ไมเซลล์ของเหลว LipoMicel ให้ค่า AUC เพิ่มขึ้น 8 เท่า และ Cmax เพิ่มขึ้น 9 เท่า เมื่อเทียบกับ quercetin อิสระ โดยมี Cmax อยู่ที่ 182.85 ng/mL ที่ Tmax 0.5 h [8]
ช่องว่างและทิศทางในอนาคต
ภายใต้ขอบเขตของหลักฐานที่จัดเตรียมไว้ ช่องว่างสำคัญคือการเชื่อมโยงการปรับปรุงความพร้อมทางชีวภาพทางการรับประทานเข้ากับจุดสิ้นสุดการกำจัดเซลล์เสื่อมสภาพโดยตรง (เช่น การกำจัดเซลล์เสื่อมสภาพแบบเลือกจำเพาะ) เนื่องจากมีการทดลองแบบจำลองการเสื่อมสภาพที่ชัดเจนเพียงรายการเดียวที่นี่ซึ่งแสดงการลดลงของ SASP แบบ senomorphic โดยไม่มีความสามารถในการเลือกสลายเซลล์เสื่อมสภาพ (senolytic selectivity) สำหรับทั้ง fisetin อิสระและ liposomes ที่บรรจุ fisetin [10] อีกช่องว่างหนึ่งคือแพลตฟอร์มบางอย่างรายงานการปรับปรุงที่สำคัญในด้าน bioaccessibility หรือการซึมผ่าน (เช่น fisetin nanoliposomes ที่เพิ่ม bioaccessibility เป็น 88.9–92.5% เทียบกับ 7.2% ในน้ำมันทั่วไป และอนุภาคนาโน PLGA fisetin ที่เพิ่มการซึมผ่านของลำไส้ได้ถึง 4.9 เท่าในแบบจำลอง everted gut sac) โดยไม่มีการยืนยัน PK ในระบบร่างกาย in vivo คู่ขนานกันในข้อความที่ตัดตอนมานี้ [13, 15]
ทิศทางในอนาคตที่นำไปใช้ได้จริงตามหลักฐานคือการรวมการวิเคราะห์คุณลักษณะของสูตรตำรับเข้ากับการวัดทางชีววิเคราะห์ที่ผ่านการตรวจสอบความถูกต้องให้แน่นแฟ้นยิ่งขึ้น เนื่องจากชุดข้อมูลแสดงระเบียบวิธีที่กว้างขวาง ตั้งแต่ LC-MS/MS และ UHPLC-HRMS ใน PK ทางคลินิก ไปจนถึงการทดสอบ UV-Vis สำหรับการห่อหุ้มหรือการละลายในการคัดกรองสูตรตำรับ ซึ่งบ่งชี้ว่ากลยุทธ์การวัดปริมาณที่สอดคล้องกันสามารถปรับปรุงการเปรียบเทียบระหว่างการศึกษาได้ [1, 4, 8, 18] ทิศทางในอนาคตประการที่สองคือการเลือกสูตรตำรับที่ปรับให้เหมาะกับรูปแบบการดูดซึมที่ต้องการ เนื่องจากการศึกษาแสดงให้เห็นทั้ง Tmax ที่ล่าช้าและเร่งขึ้นขึ้นอยู่กับประเภทของตัวพา (เช่น MPEG-b-PLLA micelles ทำให้ Tmax ล่าช้า เทียบกับ Pickering emulsions ที่ทำให้สั้นลง) ซึ่งหมายความว่าสูตรตำรับ "ที่ดีที่สุด" อาจแตกต่างกันไปตามวัตถุประสงค์การรักษาและช่วงเวลาการให้ยา [7, 19]
